Диагностическое вскрытие и выбранной коллекции тканей и образцов у крыс и мышей
Summary
В этой статье описывается порядок проведения экспертизы основных посмертных от мыши или крысы, и набор основных органов, а также более сложные типы выборки из для гистологического, микробиологических и ПЦР оценки.
Abstract
Есть несколько типов образцов, которые могут быть собраны из эвтаназии животных в целях диагностики или обнаружить возбудителей инфекционных заболеваний животных в колонии. Правильное коллекции тканей для дальнейшего гистологического обработка может повлиять на качество результатов контроля. В этой статье описывается поведение основных макроскопическом исследовании включая определение сердца, печени, легких, почек и селезенки, а также как собирать эти органы. Кроме того, четыре из наиболее сложных тканей / образец методы коллекции демонстрируются. Коллекция легких и перфузии может быть особенно трудно, так как ткань должна быть должным образом раздуты с фиксатором для того, чтобы внутри ткани исправить должным образом и дать возможность тщательного гистологического оценки. В этой статье показано шаг за шагом технику для удаления легких и раздувать его с фиксатором для достижения оптимальной фиксации ткани в течение 24 часов. Мозг коллекции можно так же трудно, так как ткань мягкая и легко повреждается. В этой статье показано шаг за шагом техника выявить и удалить мозг из черепа с минимальным повреждением тканей. Брыжеечных лимфатических узлов хороший тип образца, в котором для обнаружения многих распространенных инфекционных агентов, как кишечные вирусы сохраняются дольше в лимфатических узлах, чем они пролили в кале. В этой статье показано шаг за шагом процедуры для поиска и удаления асептически брыжеечных лимфатических узлов. Наконец, выявление возбудителей инфекционных заболеваний дыхательных путей может выполняться бактериальной культуры или ПЦР тестирование носа и / или бронхиальной жидкости всасывает принято на вскрытии. Эта процедура описывает получение и подготовку дыхательных образца аспирата для бактериальной культуры и ПЦР-тестирование.
Protocol
Discussion
Сбор данных в конце исследования могут потребовать вскрытии животных. Опишите также то, что видел и помню, чтобы изучить все ткани. Эти процедуры предназначены прежде всего для оптимизации вскрытия и отбора образцов для эпиднадзора за инфекционными болезнями, но большинство из них лег…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Reagent name | Company | Catalog number | Comments |
|---|---|---|---|
| Cutting board | Thermo Electron Corp Cat #36114 | Cat #36114 | |
| Small scissors | ROBOZ | RS-5910, G204 | 23mm blades, 3.5″ length, straight |
| Medium scissors | ROBOZ | RS-6808, G207 | 5″ |
| Large scissors | ROBOZ | RS-6826, G65″ | 6.25″ |
| Forceps-Curved | ROBOZ | RS-8254 (M1/21004) | 4.5″, serrated, slight curve |
| Forceps-Microdissecting | ROBOZ | RS-5238 | Hudson-(EWALD) |
| Forceps-Tissue Forceps | ROBOZ | RS–8160 | Rat tooth |
| Flame sterilizer | Oxford Labware Products | Bacti-Cinerator #5889-001007 | |
| Scalpel | Cancer Diagnostics, Inc. | Finger Scalpels #60, Cat#FS0060 | |
| Pipettes | VWR | Pasteur Pipet 5 3/4″, Cat#14672-400 | |
| Autoclave bags | Propper Manufacturing Company | Sterilizer Bag Paper Pouches Cat#021002(3100923)E09110 | For Pasteur pipettes |
| Pipette bulb | VWR | Cat#56310-240 | |
| Eppendorf tubes | Sarstedt | SafeSeal microtube 2mL, Ref#72.695 | |
| Eppendorf tubes | Argos | 5mL microtube Cat#T20765-C | |
| Syringe | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910 5ml-309603 10mL Cat#309604 20mL Cat#309661 | |
| Needles | BD | 26G-309625 18G-305195 | |
| Neutral buffered formalin | VWR | 20L 10% NBF, Cat#16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Blood Bank Saline, Cat#23-309-178 | |
| Trypticase soy broth | Becton Dickenson | TSB: Dehydrated, Cat#211825 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma Aldrich | HA Buffer, Cat#P3813-10PAK | |
| Formalin cups | VWR | 4oz Cat#36318-852 8oz Cat#36318-860 16oz Cat#36318-858 | |
| Large formalin cups | OakRidge Products | 32oz container Cat#0432-1100 | |
| Extra large formalin cup | VWR | HDPE Multipurpose 160oz container Cat#89038-282 | |
| Suture material | Henry Schein | Braided silk surgical suture, Ref#100-5000, M766750 | For mouse lung inflation |
| Twine | Staples | Cat#QUA-46173 | For rat lung inflation |
Referências
- AVMA. . AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. . Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. . The Necropsy Book. , (2006).
- Kittel, B. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 2. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 413-431 (2004).
- Komarek, V., Fox, J. G. Chapter 1. The Mouse in Biomedical Research. , 1-22 (2007).
- Morawietz, G. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 3. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 433-449 (2004).
- Popesko, P., Raijtová, V., Horák, J. . Colour Atlas of Anatomy of Small Laboratory Animals. 2, 91-106 (2002).
- Ruehl-Fehlert, C. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–part 1. Exp Toxicol Pathol. 55, 91-106 (2003).
