Мы показываем, изготовление простой микрожидкостных устройство, которое может быть интегрировано со стандартными установками электрофизиологии подвергать микромасштабной поверхности мозга срез в хорошо контролируемым образом, чтобы различные нейромедиаторы.
Abstract
Мы показали, изготовление двухуровневой микрожидкостных устройство, которое может быть легко интегрирована с существующими установками электрофизиологии. Двухуровневая микрожидкостных устройства изготовлены с использованием двухступенчатой стандартные отрицательные сопротивляться процесса литографии 1. Первый уровень содержит микроканалов с впускные и выпускные отверстия на каждом конце. Второй уровень содержит микромасштабной круглые отверстия расположен на полпути от длины канала и по центру, а также ширины канала. Пассивный насосных метод используется для перекачки жидкостей из входного отверстия к выходному порту 2. Микрожидкостных устройство интегрирован с вне готовых камер перфузии и позволяет полную интеграцию с установки электрофизиологии. Жидкости представлен на входе потока через порты микроканалов к розетке порты, а также выходить через круглые отверстия расположены на верхней части микроканалов в ванну перфузии. Таким образом, нижней поверхности мозга срез помещают в ванну камеры перфузии и выше микрожидкостных устройство может подвергаться воздействию различных нейромедиаторов. Микромасштабной толщина микрожидкостных устройств и прозрачным характером материалов [покровное стекло и PDMS (полидиметилсилоксан)] используется, чтобы сделать микрожидкостных устройств позволяют микроскопии мозга срез. Микрожидкостных устройство позволяет модуляции (как пространственные, так и временных) на химические раздражители представлен микросреды мозга срез.
Protocol
SU-8 плесень изготовления Мастер подготовки SU-8 мастер на подложке пластины кремния подготовлен с использованием двухступенчатой стандартные отрицательные сопротивляться процесса литографии. Знаков совмещения на пластине кремния удаляют с помощью лезвия …
Discussion
Существующие макромасштабе или микромасштабной мозга камер ломтик перфузии ограничены с точки зрения пространственного разрешения, которые они предоставляют подвергать мозг ломтики нейромедиаторов. Микрожидкостных технологии устройства продемонстрировали здесь преодолевает это ограничени…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Финансирование было предоставлено NIH MH-64611 и NARSAD премия для молодых следователь. Авторы также хотели бы отметить Адам Бигли, Марк Dikopf, и Бен Смит за техническую помощь.
Materials
Material Name
Tipo
Company
Catalogue Number
Comment
RC-26GPL
Tool
Warner Instruments
W2-64-0236
Low Profile Large Bath RC-26GLP Recording Chamber
SHD-26GH/10
Tool
Warner Instruments
W2-64-0253
Stainless steel slice hold-down for RC-26G, 1.0 mm thread spacing
Shaikh Mohammed, J., Caicedo, H., Fall, C. P., Eddington, D. T. Brain Slice Stimulation Using a Microfluidic Network and Standard Perfusion Chamber. J. Vis. Exp. (8), e302, doi:10.3791/302 (2007).