脑片的刺激，利用微流控网络和标准灌注腔
Summary
我们证明一个简单的微流体装置，可与标准的电设置综合揭露一个很好的控制方式不同的神经递质的大脑切片的微观表面加工。
Abstract
我们已经证明了两个级别的微流体装置，可以很容易地与现有的电设置集成制造。两个级别的微流体装置是采用两个步骤的标准，消极抵制光刻工艺1。第一层次包含在每年年底与入口和出口微。第二个层次包含位于通道长度的中间，与通道宽度为中心沿微型圆孔。被动抽水的方法是用泵的液体，从进气口， 出气口2。集成微流体装置与现成的灌注商会，允许无缝集成与电设置。在进气道流通过对出口口岸的微流体介绍，并通过位于顶部的微灌注洗澡的圆形开口也难逃。因此可以接触不同的神经递质的大脑切片置于灌注室浴及以上的微流体装置的底部表面。微流体装置的微型厚度和材料的透明性玻璃盖玻片和PDMS（聚二甲基硅氧烷）]用于制造微流体装置允许的大脑切片的显微镜。微流体装置，可以介绍到大脑切片的微环境的化学刺激（包括空间和时间）调制。
Protocol
SU – 8模具制造硕士准备硅片衬底上的SU – 8的主人是准备使用两个步骤的标准消极抵制光刻工艺。 被删除的硅片上的对准标记（位于外周边沿晶圆），使用这些结构的高度刀片超过实际设备结构。 硅片，然后用异丙醇清洗和干燥后的 N 2流。与胶带厚度小于最高的器件结构的支柱取代四边晶圆对准标记。 注：如果支柱的高度超?…
Discussion
现有的宏观或微观的脑片灌注商会在他们提供公开与神经递质的大脑切片的空间分辨率是有限的。这里展示的微流体装置的技术克服了这个限制，使用简单的微机电技术。据预计，在微流体设备制造和易于集成与现有的电设置简单，使所显示的设备技术的广泛应用。有趣的实验是不可能的前面，可以与目前的微流体装置。脑片不同的微环境，可以接触到不同的神经递质，在不同的时间尺度。目前的原型设备包括?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
经费是由美国国立卫生研究院MH – 64611和NARSAD青年研究者奖。作者还想Beagley，马克Dikopf，亚当史密斯和Ben承认他们的技术援助。
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RC-26GPL | Tool | Warner Instruments | W2-64-0236 | Low Profile Large Bath RC-26GLP Recording Chamber |
| SHD-26GH/10 | Tool | Warner Instruments | W2-64-0253 | Stainless steel slice hold-down for RC-26G, 1.0 mm thread spacing |
| PDMS (polydimethylsiloxane) | Reagent | Dow Corning | Sylgard 184 | Silicone Elastomer Kit |
| Plasma Preen-II 862 | Tool | Plasmatic Systems, Inc. | Microwave plasma system | |
| Model P-1 | Tool | Warner Instruments | W2-64-0277 | Series 20 Plain Platform, Model P-1 |
| SA-NIK | Tool | Warner Instruments | W2-64-0291 | Adapter for Nikon Diaphot/TE200/TE2000, SA-NIK |
| Oxygenated, heated ACSF (Artificial cerebro-spinal fluid) | Reagent | Exact composition will vary with application |
Referências
- Blake, A. J., Pearce, T. M., Rao, N. S., Johnson, S. M., Williams, J. C. Multilayer PDMS microfluidic chamber for controlling brain slice microenvironment. Lab on a Chip. 7, 842-849 (2007).
- Walker, G. M., Beebe, D. J. A passive pumping method for microfluidic devices. Lab on a Chip. 2, 131-134 (2002).
Citar este artigo
Shaikh Mohammed, J., Caicedo, H., Fall, C. P., Eddington, D. T. Brain Slice Stimulation Using a Microfluidic Network and Standard Perfusion Chamber. J. Vis. Exp. (8), e302, doi:10.3791/302 (2007).