Microfluidic 네트워크 및 표준 재관류 회의소를 사용하여 뇌 슬라이스 자극
Summary
우리는 서로 다른 신경 전달 물질로 잘 제어 방식으로 뇌 슬라이스의 microscale 표면 노출 표준 전기 생리학의 설정과 통합되는 간단한 microfluidic 장치의 제조를 보여줍니다.
Abstract
우리는 쉽게 기존의 전기 생리학의 설정과 통합 수있는 두 수준 microfluidic 장치의 제조를 증명하고있다. 두 수준 microfluidic 장치는 두 단계 표준 리소그래피 프로세스 1 저항 부정을 사용하는 조작이다. 첫 번째 수준은 각 끝에 유입 및 배출구 포트 microchannels가 포함되어 있습니다. 두 번째 수준은 채널 길이의 중간에 위치하고 채널 폭과 함께 중심으로 microscale 원형 구멍을 포함하고 있습니다. 수동 펌프 방법은 입구 포트에서 배출구 포트 2 유체를 펌프하는 데 사용됩니다. microfluidic 장치는 재고품 재관류의 챔버와 통합 및 전기 생리학 설정과 완벽한 통합이 가능합니다. 유체의 출구 포트를 향해 microchannels를 통해 유입 포트 흐름에 도입하고 또한 재관류의 목욕탕에 microchannels 상단에있는 원형 구멍을 통해 탈출. 따라서 재관류 챔버 목욕과 microfluidic 장치 위에 위치 뇌 슬라이스의 바닥 표면은 서로 다른 신경 전달 물질과 함께 노출 수 있습니다. microfluidic 장치의 microscale 두께와 소재의 투명한 자연 [유리 coverslip와 PDMS (polydimethylsiloxane)] microfluidic 장치가 뇌 슬라이스의 현미경을 허용하기 위해 사용됩니다. microfluidic 장치는 뇌의 슬라이스 microenvironments 소개 화학 자극의 변조 (공간과 시간적 모두) 수 있습니다.
Protocol
Discussion
기존 macroscale 또는 microscale 두뇌 슬라이스 재관류 챔버스들은 신경 전달 물질로 뇌 조각을 폭로 제공하는 공간 해상도 측면에서 한계가 있습니다. 여기 시연 microfluidic 장치 기술은 간단한 bioMEMS 기법을 사용하여이 제한을 극복. 그것은 microfluidic 장치의 제조 및 기존 전기 생리학의 설정과 통합의 용이성에 단순이 증명 장치 기술의 광범위한 응용 프로그램을 만들 것이라는 것을 예상합니다. 불가능되지 않은 흥?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
기금은 NIH MH – 64611와 NARSAD 젊은 탐정 수상에 의해 제공되었다. 저자는 또한 기술 지원 아담 비글리, 마크 Dikopf, 그리고 벤 스미스 인정하고 싶습니다.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RC-26GPL | Tool | Warner Instruments | W2-64-0236 | Low Profile Large Bath RC-26GLP Recording Chamber |
| SHD-26GH/10 | Tool | Warner Instruments | W2-64-0253 | Stainless steel slice hold-down for RC-26G, 1.0 mm thread spacing |
| PDMS (polydimethylsiloxane) | Reagent | Dow Corning | Sylgard 184 | Silicone Elastomer Kit |
| Plasma Preen-II 862 | Tool | Plasmatic Systems, Inc. | Microwave plasma system | |
| Model P-1 | Tool | Warner Instruments | W2-64-0277 | Series 20 Plain Platform, Model P-1 |
| SA-NIK | Tool | Warner Instruments | W2-64-0291 | Adapter for Nikon Diaphot/TE200/TE2000, SA-NIK |
| Oxygenated, heated ACSF (Artificial cerebro-spinal fluid) | Reagent | Exact composition will vary with application |
Referências
- Blake, A. J., Pearce, T. M., Rao, N. S., Johnson, S. M., Williams, J. C. Multilayer PDMS microfluidic chamber for controlling brain slice microenvironment. Lab on a Chip. 7, 842-849 (2007).
- Walker, G. M., Beebe, D. J. A passive pumping method for microfluidic devices. Lab on a Chip. 2, 131-134 (2002).
