Summary

Beyin Dilim Uyarım mikroakışkan Ağ ve Standart Perfüzyon Odası

Published: October 01, 2007
doi:

Summary

Biz farklı nörotransmitterlerin iyi kontrollü bir şekilde bir beyin dilim microscale yüzeyleri açığa çıkarmak için standart elektrofizyoloji kurulumları ile entegre edilebilir basit bir mikroakışkan cihaz imalatı göstermektedir.

Abstract

Biz mevcut elektrofizyoloji kurulumları kolaylıkla entegre edilebilir bir iki düzey mikroakışkan cihazın imalat göstermiştir. Iki düzey mikroakışkan bir cihaz, iki adımlı standart litografi süreci 1 karşı negatif kullanılarak imal edilir. Ilk seviye her iki ucunda, giriş ve çıkış delikleri ile mikro içerir. Ikinci düzey, kanal uzunluğu ortasında bulunur ve kanal genişliği ile birlikte merkezli microscale yuvarlak delikler bulunur. Pasif pompalama yöntemi giriş limanından çıkış noktası 2 sıvıları pompalamak için kullanılır. Mikroakışkan cihaz off-the-raf perfüzyon odaları ile entegre ve elektrofizyoloji kurulum ile sorunsuz entegrasyon sağlar. Sıvıları yoluyla giriş çıkış portları doğru mikro port akış tanıtıldı ve aynı zamanda perfüzyon banyo içine mikro üstünde bulunan dairesel açıklıklar yoluyla kaçmak. Böylece perfüzyon odasının banyosuna yerleştirilir ve mikroakışkan cihaz üzerinde beyin dilim alt yüzeyi farklı nörotransmitterlerin maruz kalabilir. Mikroakışkan cihaz ve malzemelerin şeffaf doğası microscale kalınlığı [cam lamel ve PDMS (polidimetilsiloksan)] mikroakışkan cihaz beyin dilim mikroskopi izin yapmak için kullanılır. Mikroakışkan cihaz, beynin dilim mikroçevrelerde tanıtıldı kimyasal uyaranlara modülasyonu (hem mekansal ve zamansal) sağlar.

Protocol

SU-8 kalıp imalatı Yüksek Lisans hazırlık SU-8 ana silikon gofret substrat iki adımlı standart negatif karşı litografi süreci kullanılarak hazırlanmıştır. Silikon gofret hizalama işaretleri bu yapıların yüksekliği gibi bir jilet kullanarak kaldırılır (gofret dış çevre boyunca yer) gerçek cihaz yapıları daha fazla. Silikon gofret izopropil alkol ile temizlenmeli ve N 2 akışı kurutulur. En yüksek cihaz yapısı daha az ban…

Discussion

Mevcut macroscale veya microscale beyin dilim perfüzyon odaları nörotransmitterlerin beyin dilimleri maruz sağlar uzaysal çözünürlük açısından sınırlıdır. Burada gösterilen mikroakışkan cihaz teknolojisi basit bioMEMS teknikleri kullanarak bu sınırlama üstesinden gelir. Bu basitlik mikroakışkan cihazın imalat ve mevcut elektrofizyoloji kurulumları ile entegre kolaylığı göstermiştir cihaz teknolojisi yaygın uygulama izin vereceği tahmin edilmektedir. Daha önce mümkün olmayan ilginç deneyler mevcut mikroak…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Finansman NIH MH-64.611 ve NARSAD Genç Araştırmacı Ödülü verilmiştir. Yazarlar ayrıca, teknik yardım için, Adam Beagley, Mark Dikopf, ve Ben Smith kabul etmek istiyorum.

Materials

Material Name Tipo Company Catalogue Number Comment
RC-26GPL Tool Warner Instruments W2-64-0236 Low Profile Large Bath RC-26GLP Recording Chamber
SHD-26GH/10 Tool Warner Instruments W2-64-0253 Stainless steel slice hold-down for RC-26G, 1.0 mm thread spacing
PDMS (polydimethylsiloxane) Reagent Dow Corning Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit
Plasma Preen-II 862 Tool Plasmatic Systems, Inc.   Microwave plasma system
Model P-1 Tool Warner Instruments W2-64-0277 Series 20 Plain Platform, Model P-1
SA-NIK Tool Warner Instruments W2-64-0291 Adapter for Nikon Diaphot/TE200/TE2000, SA-NIK
Oxygenated, heated ACSF (Artificial cerebro-spinal fluid) Reagent     Exact composition will vary with application

Referências

  1. Blake, A. J., Pearce, T. M., Rao, N. S., Johnson, S. M., Williams, J. C. Multilayer PDMS microfluidic chamber for controlling brain slice microenvironment. Lab on a Chip. 7, 842-849 (2007).
  2. Walker, G. M., Beebe, D. J. A passive pumping method for microfluidic devices. Lab on a Chip. 2, 131-134 (2002).

Play Video

Citar este artigo
Shaikh Mohammed, J., Caicedo, H., Fall, C. P., Eddington, D. T. Brain Slice Stimulation Using a Microfluidic Network and Standard Perfusion Chamber. J. Vis. Exp. (8), e302, doi:10.3791/302 (2007).

View Video