Hemos desarrollado una base de colágeno en el ensayo in vitro, que promueve la proliferación y la invasión de las muestras de todos los subtipos de cáncer de mama. Tomografía óptica de proyección, una técnica de tres dimensiones se utilizó la microscopía para visualizar y cuantificar la expansión del tumor. Este ensayo puede ser utilizado para cuantificar la respuesta al fármaco de las muestras tumorales individuales.
El cáncer de mama es la principal causa de mortalidad en el mundo occidental. Es bien sabido que la propagación del cáncer de mama, en primer lugar a nivel local y distal más tarde, es un factor importante en el pronóstico del paciente. Sistemas experimentales de cáncer de mama se basan en las líneas celulares derivadas de tumores por lo general primario o derrames pleurales. Dos grandes obstáculos dificultan esta investigación: (i) algunos conocidos subtipos de cáncer de mama (tumores pronóstico notablemente pobre luminal B) no están representadas en colecciones de la línea actual, (ii) la influencia del microambiente tumoral no se suele tener en cuenta.
Se demuestra una técnica de cultivo primario especímenes de cáncer de mama de todos los subtipos. Esto se logra mediante el uso de tres dimensiones (3D) de los sistemas de cultivo en el que pequeños trozos de tumor están incrustados en el colágeno de rata suave que amortigua. El plazo de 2-3 semanas, las células tumorales se propagan en el colágeno y la forma de diversas estructuras similares a los observados en tumours1 humanos. Adipocitos viables, las células epiteliales y fibroblastos en el núcleo original se hicieron evidentes en la histología. Células epiteliales malignos con morfología escamoide se demostró en la invasión de colágeno circundante. Pleomorfismo nuclear fue evidente dentro de estas células, junto con figuras de mitosis y cuerpos apoptóticos.
Hemos empleado la tomografía óptica de proyección (OPT), una tecnología de imagen 3D, con el fin de cuantificar el grado de diseminación del tumor en la cultura. Hemos utilizado OPT para medir el volumen de la masa de la cultura del tumor, un parámetro de una medida rutinaria en el tratamiento neo-adyuvante de pacientes con cáncer de mama para evaluar la respuesta al tratamiento farmacológico.
Aquí, se presenta una oportunidad para los tumores de mama humanos sin cultura sub-tipo de prejuicios y cuantificar la propagación de los ex vivo. Este método podría ser utilizado en el futuro para cuantificar la sensibilidad de la droga en el tumor original. Esto puede proporcionar un modelo más predictivo que las líneas celulares actualmente en uso.
A base de colágeno ensayos para estudiar el comportamiento de líneas celulares de cáncer son ampliamente utilizados 6,7,8. Sin embargo, estos ensayos no han reflejado en su totalidad la complejidad del tumor y su entorno. En este estudio, mostramos que los materiales de cáncer de mama humano puede ser utilizado de una manera similar, ex vivo. Además, OPT es una herramienta útil para caracterizar la expansión 3D de cáncer de mama. Se encontró que la principal limitación de esta técnica es la disponibilidad de materiales tumor (una sola biopsia con aguja gruesa es suficiente para 4-6 ensayos). Otro factor limitante es que la invasión estructural sólo se produce en aproximadamente el 40% de los ensayos. Para superar esto, que regularmente agregar cualquier tratamiento deseado alrededor del día 7 a todos los ensayos con un crecimiento visible.
El uso de los territorios palestinos ocupados podría ampliarse en el futuro para detectar también cambios masivos, ex vivo, que resulta del tratamiento de drogas. Esto a su vez podría facilitar el tratamiento del cáncer más individualizada, independiente de los modelos animales. Actualmente estamos explorando la respuesta de los tumores RE + al tamoxifeno ex vivo.
The authors have nothing to disclose.
Damos las gracias a Lorna Renshaw (Unidad de Mama de Edimburgo) por su inestimable ayuda en la obtención de muestras clínicas.
El uso de material tumoral fue aprobado por el Comité Ético de Investigación Lothian (08/S1101/41) y obtuvo bajo los auspicios de Medicina Experimental del Cáncer Programa de Centros (Edimburgo).
Este trabajo es apoyado por el Consejo Escocés de Financiación. ADL es una señorita Margaret Butters Reekie compañeros de confianza clínica.
Name of Reagent | Company | Catalogue No. |
MEGM Complete | Lonza | CC-3150 |
DMEM/F12 | Sigma-Aldrich | D8900 10X1L |
β-oestradiol | Sigma-Aldrich | E8875-250MG |
Rabbit anti-cytokeratin | Dako | Z0622 |
Goat anti-rabbit Alexa555 | Invitrogen | A21422 |
All other standard reagents were obtained from Sigma-Aldrich.