Laser Microdissezione Cattura di tessuti di mammiferi

Abstract

Microscopia laser capture, noto anche come microdissezione laser (LMD), permette all'utente di isolare un piccolo numero di cellule o tessuti da congelati o fissati in formalina, incluse in paraffina e sezioni di tessuto. LMD tecniche si basano su una membrana termo labile posizionato sia sulla parte superiore di, o sotto, la sezione di tessuto. In un metodo, l'energia laser focalizzato è usato per fondere la membrana sulle cellule sottostanti, che possono poi essere tirato fuori dalla sezione di tessuto. Negli altri, l'energia laser vaporizza il foglio lungo un percorso "disegnato" sul tessuto, permettendo alle cellule selezionate per cadere in un dispositivo di raccolta. Ogni tecnica consente la selezione di cellule con una risoluzione minima di alcuni micron. DNA, RNA, proteine, lipidi ed i campioni possono essere isolati e analizzati da micro-campioni sezionati. In questo video, che dimostrano l'uso del Leica AS-LMD strumento microdissezione laser in sette segmenti, compreso una introduzione ai principi del LMD, inizializzare lo strumento per l'uso, considerazioni generali per la preparazione del campione, il campione di montaggio e la creazione di tubi di cattura , allineando il microscopio, regolando i controlli di cattura, e la cattura campioni di tessuto. Laser-capture micro-dissezione consente al ricercatore di isolare campioni di popolazioni di cellule pure piccolo come un paio di cellule equivalenti. Questo permette l'analisi delle cellule di interesse che sono privo di contaminanti vicini, che possono confondere i risultati sperimentali.