Summary

الشريان المساريقي تقلص والاسترخاء عن طريق الدراسات الآلي Myography أسلاك

Published: September 22, 2011
doi:

Summary

يوصف أسلوب myography الآلي لقياس القوة في الشرايين المساريقي معزولة. انها توظف Mulvany – هالبيرن Myograph سيارات أسلاك مزدوجة 510A لتحديد الاستجابات لفينيليفرين والكالسيوم خارج الخلية. الأسلوب يسمح تصميم ثابت من الاستجابات لمنبهات متساوي القياس في أوعية صغيرة من أقطارها من 6-30 ميكرون ، بشكل مستقل.

Abstract

الأوعية المقاومة القريبة ، مثل الشرايين المساريقي ، يسهم بشكل كبير في المقاومة الطرفية. هذه السفن الصغيرة ما بين 100-400 ميكرون في القطر وظيفة في المقام الأول في توجيه تدفق الدم إلى الأعضاء المختلفة وفقا لمتطلبات الكلية من الجسم. الشريان المساريقي الفئران التي يبلغ قطرها أكبر من 100 ميكرون. ويستند هذا الأسلوب myography ، وصف لأول مرة من قبل وMulvay هالبيرن 1 ، على الطريقة التي اقترحها بيفان وأوشر 2. هذه التقنية يوفر معلومات عن السفن الصغيرة في ظل ظروف متساوي القياس ، حيث يتم منع تقصير كبير من إعداد العضلات. منذ إنتاج القوة والحساسية من السفن لمنبهات مختلفة تعتمد على مدى تمتد ، وفقا لعلاقة التوتر طول النشط ، من الضروري إجراء دراسات في ظل ظروف الانكماش متساوي القياس للحيلولة دون الامتثال للأسلاك المتزايدة. ويفضل لأسلاك الفولاذ المقاوم للصدأ أسلاك التنجستين بسبب الأكسدة من هذا الأخير ، الذي يؤثر على ردود سجل 3 ، والأسلوب يسمح للمقارنة بين ناهض بفعل انكماش الأوعية منصة للحصول على أدلة عن وظيفة عادية من الأوعية الدموية على نحو سلس مستقبلات الخلايا العضلية.

لقد أظهرنا في العديد من الدراسات التي الشرايين المساريقي المعزولة التي يتم التعاقد عليها مع phenylyephrine الاسترخاء بالإضافة إلى تركيزات التراكمي من الكالسيوم خارج الخلية (كا 2 + ه). نتائج أدت بنا إلى الاستنتاج بأن الأعصاب المحيطة بالأوعية الحسية ، التي تعبر عن مجموعة البروتين يقترن كا 2 + للاستشعار مستقبلات (السيارة) ، التوسط هذا الرد ارتخاء وعائي. باستخدام الأسلوب الآلي myography الأسلاك ، وتبين لنا هنا أن الشرايين المساريقي من يستار ، داهل الملح الحساسة (DS) ، والملح داهل المقاوم (DR) الفئران تستجيب لمختلف كا 2 + ه. وأظهرت الأنسجة من فئران ويستار أعلى كا 2 + الحساسية مقارنة بالذين من الدكتور وDS. انخفاض التعبير سيارات في الشرايين المساريقي من الفئران DS يرتبط انخفاض الكالسيوم 2 + ه بفعل استرخاء الشرايين معزولة قبل التعاقد. وتشير البيانات إلى أن هناك حاجة للسيارات للاسترخاء الشرايين المساريقي تحت نغمة الأدرينالية المتزايدة ، كما يحدث في ارتفاع ضغط الدم ، وتشير إلى وجود عيب متأصل في مسار السيارة في إشارة الحيوانات داهل ، وهو أشد وطأة في DS.

يمكن أن الطريقة مفيدة في تحديد الأوعية الدموية المجراة سابقا التفاعل في الشرايين ومقاومة المساريقي مماثلة الأوعية الدموية الصغيرة ومقارنات بين منبهات مختلفة و / أو الخصوم بسهولة وباستمرار المقررة جنبا إلى جنب 6،7،8.

Protocol

1. عزل الشريان المساريقي الفئران الصغيرة تخدير الحيوانات مع isoflurane في غرفة مغلقة ومسح البطن مع الكحول. تنفيذ خط منتصف البطن لفضح السرير المساريقي. باستخدام مقص ، و?…

Discussion

ارتفاع ضغط الدم هو السبب الرئيسي لأمراض القلب والأوعية الدموية ، الدماغ والكلى / وفيات. حدوث ارتفاع ضغط الدم مرتفعة في عدد السكان والملح تراعي ارتفاع ضغط الدم مرتفع بشكل خاص في شيخوخة السكان ، وأكثر انتشارا بين السود من البيض. ويعتقد أن هذا نتيجة لميل من السود للاحتفا…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

وأيد المشروع التي وصفها أرقام جائزة HL064761 R01 ، R25 HL059868 ، 1SC1 HL099139 وP20 MD000175 شكل المعاهد الوطنية للصحة. المحتوى هو فقط من مسؤولية الكتاب ولا تمثل بالضرورة وجهة النظر الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة.

Materials

Name of equipment/ reagent Company Catalogue number Comments(optional)
Auto Dual Wire Myograph System-510A DMT-USA, Inc. Atlanta, GA. 100151  
PowerLab/4SP Data Acquisition System ADInstruments, Colorado Springs, CO. ML750 New models with 4-16 input channels are available.
Dell Dimension XPS Gen 4 Computer Dell    
Stemi SV II (Apo) Dissection Microscope with Ocular Carl Zeiss International.    
Wistar, Dahl salt-sensitive, Dahl salt-resistant rats Harlan Sprague Dawley, Indianapolis, IN.    
Rodent chow Harland Tekland, Madison, WI.    
Phenylephrine Sigma-Aldrich, St. Louis, MO.    
Other chemicals     All chemicals used were of the purest grades available commercially.

Referências

  1. Mulvany, M. J., Halpern, W. Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ. Nature. 260, 617-619 (1976).
  2. Bevan, J. A., Osher, J. V. A direct method for recording tension changes in the wall of small blood vessels in vitro. Agents Actions. 2, 257-260 (1972).
  3. Mulvany, M. J. Procedures for investigating of small vessels using small vessel myograph. DMT Danish Myo Technology. , (2004).
  4. Angus, J. A., Wright, C. E. Techniques to study the pharmacodynamics of isolated large and small blood vessels. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 44, 395-407 (2000).
  5. Halpern, W., Mulvany, M. J., Warshaw, D. M. Mechanical properties of smooth muscle cells in the walls of arterial resistance vessels. J. Physiol. 275, 85-101 (1978).
  6. Lindhorst, J., Alexander, N., Blignaut, J., Rayner, B. Differences in hypertension between blacks and whites: an overview. Cardiovasc. J. Afr. 18, 241-247 (2007).
  7. Eley, S. L., Allen, C. M., Williams, C. L., Bukosi, R. D., Pointer, M. A. Action of thiazide on renal interstitial calcium. Am. J. Hypertens. 21, 814-819 (2008).
  8. Palmer, C. E., Rudd, M. A., Bujoski, R. D. Renal interstitial Ca2+ during sodium loading of normotensive and Dal-salt hypertensive rats. Am. J. Hypertens. 16, 771-776 (2003).
  9. Hurwitz, S. Homeostatic control of plasma calcium concentration. Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 31, 41-100 (1996).
  10. Brown, E. M., MacLeod, R. J. Extracellular sensing and extracellular calcium signaling. Physiol. Rev. 81, 239-297 (2001).
  11. Breitwieser, G. E. Extracellular calcium as an integrator of tissue function. Int. J. Biochem. Cell Biol. 40, 1467-1480 (2008).
  12. Mupanomunda, M. M., Wang, Y., Bukoski, R. D. Effect of chronic sensory denervation on Ca2+-induced relaxation of isolated mesenteric resistance arteries. Am. J. Physiol. 274, 1655-1661 (1998).
  13. Mupanomunda, M. M., Ishioka, N., Bukoski, R. D. Interstitial Ca2+ undergoes dynamic changes sufficient to stimulate nerve-dependent Ca2+-induced relaxation. Am. J. Physiol. 276, 1035-1042 (1999).
  14. Mupanomunda, M. M., Tian, B., Ishioka, N., Bukoski, R. D. Renal interstitial Ca2+. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 278, F644-F649 (2000).
  15. Awumey, E. M., Hill, S. K., Diz, D. I., Bukoski, R. D. Cytochrome P-450 metabolites of 2-arachidonoylglycerol play a role in Ca2+-induced relaxation of rat mesenteric arteries. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, 2363-2370 (2008).
  16. Chen, W., Bergsman, J. B., Wang, X., Gilkey, G., Pierpoint, C. R., Daniel, E. A., Awumey, E. M., Dauban, P., Dodd, R. H., Ruat, M., Smith, S. M. Presynaptic external calcium signaling involves the calcium-sensing receptor in neocortical nerve terminals. PloS One. 5, e8563-e8563 (2010).
  17. Bukoski, R. D. The perivascular sensory nerve Ca2+ receptor and blood pressure regulation: a hypothesis. Am. J. Hypertens. 11, 1117-1123 (1998).
  18. Bukoski, R. D. Dietary Ca2+ and blood pressure: evidence that Ca2+-sensing receptor activated sensory nerve dilator activity couples changes in interstitial Ca2+ with vascular. 16, 218-221 (2001).
check_url/pt/3119?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. Mesenteric Artery Contraction and Relaxation Studies Using Automated Wire Myography. J. Vis. Exp. (55), e3119, doi:10.3791/3119 (2011).

View Video