Um Modelo contundente de lesão da medula espinhal cervical unilateral Usando o Impactor horizonte infinito

Summary

Uma maneira confiável e repetível para produzir uma lesão da medula espinhal cervical unilateral utilizando o pêndulo horizonte infinito é descrito. O método leva vantagem de um quadro projetado e grampo para estabilizar a coluna. O procedimento padronizado e biomecânica lesão os parâmetros resultam em lesões suficientes e sustentados.

Abstract

Embora a maioria dos humanos lesões da medula espinhal ocorrer na medula cervical, a grande maioria da pesquisa de laboratório emprega modelos animais de lesão da medula espinal (SCI), na qual o cabo vertebral torácica é ferido. Além disso, porque a maioria dos humanos lesões da medula ocorrer como resultado de romba, trauma não penetrante (acidente de veículo automóvel, por exemplo, lesões desportivas) onde a medula espinal é violentamente atingido por osso deslocado ou tecidos moles, a maioria dos investigadores SCI são da opinião que a maioria dos modelos de lesão clinicamente relevantes são aqueles em que a medula espinal é rapidamente contundido. ¹ Portanto, um passo importante para a avaliação pré-clínica de novos tratamentos no seu caminho para a tradução humana é uma avaliação da sua eficácia num modelo de contusão SCI dentro A medula cervical. Aqui, descrevemos os aspectos técnicos e consequentes resultados anatômicos e comportamentais de um modelo unilateral contundente da cervical SCI que emprega oHorizonte Infinito impactor lesão medular.

Ratos Sprague Dawley foram submetidos a uma laminectomia unilateral do lado esquerdo no C5. Para optimizar a reprodutibilidade dos resultados biomecânicos, funcional e histológica do modelo de lesão, contundido as medulas espinais, utilizando uma força de impacto de 150 kdyn, uma trajectória de impacto de 22,5 ° (animais rodado a 22,5 °), e um local de impacto fora da linha média de 1,4 mm. A recuperação funcional foi avaliada através do cilindro de criação, teste escada horizontal, preparação e teste modificado Montoya escadaria até 6 semanas, após o que as medulas espinhais foram avaliados histologicamente para poupador substâncias branca e cinzenta.

O modelo de lesão aqui apresentado transmite consistentes e reprodutíveis forças biomecânicas para a medula espinal, uma característica importante de qualquer modelo experimental SCI. Isto resulta em danos histológica discreta para a metade lateral da medula espinal, que é em grande parte contido em tele lado ipsilateral da lesão. A lesão é bem tolerado pelos animais, mas não resulta em déficits funcionais do membro anterior, que são significativa e sustentada nas últimas semanas após a lesão. O modelo de lesão cervical unilateral apresentado aqui pode ser um recurso para pesquisadores que desejam avaliar terapias potencialmente promissores antes da tradução humana.

Protocol

1. Configure: Frame e Design Pinça para Segurar o Animal A moldura e grampo para prender o animal foi customizado para acomodar o horizonte infinito (IH) Impactor de lesão medular. A base do quadro é uma plataforma de alumínio cortado em as seguintes dimensões (30,2 cm x 20,3 cm x 1,3 cm), a fim de se encaixar no suporte de guia tabela que vem padrão com o dispositivo IH (Figura 1A). Quatro Flexaframe placas de apoio do pé (Fisher Scientific, Toronto, ON) estão lig…

Discussion

Neste artigo, descrevemos um modelo de contusão cervical unilateral com o horizonte infinito (IH) impactor, a uma força de 150 kdyn, um ângulo de 22,5 ° fora da vertical, e um objectivo lateral, de 1,4 mm da linha média. Com essas configurações, fomos capazes de produzir sofridos déficits comportamentais no membro anterior ipsilateral com o rompimento do parênquima contido em grande parte para o lado ipsilateral, onde verificou-se que ocorreu um dano considerável para as regiões onde as vias rubroespinal, ret…

Materials

Name of the equipment	Company	Catalogue number	Comments
Infinite Horizon Impactor	Precision Systems and Instrumentation	IH-0400
Aluminum metal sheet	Metalsupermarlets.com	APT6061/500
Flexaframe support foot plates	Fishers Scientific	1466625Q
Flexaframe support rods	Fishers Scientific	1466610GQ
Flexaframe Support Connectors	Fishers Scientific	1466620Q
Clamp1	Custom made		Choo et al., 2009
Metal holders	Custom made		See above
Impactor tip	Custom made		Diameter: 1.15 mm
Stereotaxic frame	David Kopf Instruments	Model 900
Cylinder Level	YIJIA TOOLS	YJ-SL0620
Microscope	Leica		Model #: MZ8
Laboratory scissor jack	VWR	12620-902