ニューロンの光刺激のために手ごろな価格のLEDアレイを使用する
Summary
ChR2を表現成人生まれのニューロンは嗅覚神経回路の機能に向けての貢献を検討するために、スライスの電気生理学的な準備に操作することができます。
Abstract
標準スライスの電気生理学は、研究者は電気的または薬理学的操作の1,2に対応して単一細胞の電気的応答を記録することによって、神経回路の個々のコンポーネントをプローブすることができました。光学的に遺伝的に標的ニューロンを（optogenetics）を制御する方法の発明で、研究者は今、標準のスライス標本におけるニューロンの特定のグループを制御するための前例のないレベルを持っている。特に、感光channelrhodopsin – 2（ChR2）研究者が光3,4でニューロンを活性化することができます。標準スライスの電気生理学とChR2のLEDベースの光刺激を慎重にキャリブレーションを組み合わせることで、我々はより詳細で嗅球、嗅覚系の最初の中心的なリレーの成人生まれの介在の役割を調べることができます。成人生まれのニューロンで特異的にChR2 – YFPのウイルスの式を使用して、我々は選択的に古いの環境では若い成人生まれのニューロンを制御することができますD成熟ニューロン。私たちの光制御が簡単で安価なLEDシステムを使用して、そして我々は、このシステムは、光が単一のニューロンのスパイク活動を喚起するために必要とされるどの程度理解するためにキャリブレーションする方法を示しています。したがって、青色光の短い点滅は、リモートChR2形質導入新生児の細胞の発火パターンを制御することができます。
Protocol
Discussion
近年は神経科学研究6 optogeneticツールの人気が爆発的に見てきました。その結果、これらの新しいツールを使用し始めることを希望するラボのエントリの障壁を低くすることがますます重要です。ここではそれがchannelrhodopsin発現ニューロンのフルフィールド光刺激を行うことができるように、従来のパッチクランプリグのシンプルで低コストの改修とキャリブレーションを実施する方…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、生命保険会社"AG2Rラ-モンディアル"、エコールデ神経科学パリ（ENP）、"ERA – NET NEURONのフレームでアジャンス国立デラルシェルシュ"ANR – 09 – neuro -の異形004"によってサポートされていました"欧州委員会、およびパスツール財団によるFP7のプログラムの。セバスチャンワグナーはLetten財団によってサポートされていました。
Materials
| Material | Tipo | Company | Catalogue No. |
| Ketamine | 100 mg/ml | Imalgène 1000 | |
| Xylazine | 2% | Rompun | |
| NaCl | &nbps; | Sigma | S5886 |
| KCl | Sigma | P5405 | |
| MgSO4 | Sigma | M1880 | |
| NaHCO3 | Sigma | S5761 | |
| NaHPO4 | Sigma | S5011 | |
| Glucose | Sigma | G7021 | |
| CaCl2 | Sigma | C7902 | |
| Agarose | Sigma | A9539 | |
| Pipette Puller | P-97 | Sutter | |
| Glass Capillaries | 1.5 mm O.D./1.17 mm I.D. | Harvard Apparatus | GC150T-10 |
| LED array | Bridgelux | BXRA-C2000 | |
| Collimating lens | 40 mm beam diameter | Thor Labs | LEDC1 |
| Power supply | 2.8 amp | A1W Electronik | HKO2800 |
| Optical power meter | Thor Labs | PM 100 | |
| Heatsink | Silent Boost K8 | Thermaltake | A1838 |
| Fan | Silent Boost K8 | Thermaltake | A1838 |
| Vibratome | Leica | VT1200S |
Referências
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