Dinamica dopamina presinaptica in fettine di cervello striatale con Fast-scan Voltammetria ciclica
Summary
Tramite scansione veloce voltammetria ciclica per misurare elettricamente evocate dinamiche dopamina presinaptica in fettine di cervello striatale.
Abstract
La vasta ricerca si è concentrata sul neurotrasmettitore dopamina a causa della sua importanza nel meccanismo d'azione dei farmaci d'abuso (ad esempio la cocaina e anfetamine), il ruolo che gioca in malattie psichiatriche (es. schizofrenia e Attention Deficit Hyperactivity Disorder), e il suo coinvolgimento in degenerativa disturbi come il Parkinson e la malattia di Huntington. In condizioni fisiologiche normali, la dopamina è noto per regolare l'attività locomotoria, conoscenza, apprendimento, influiscono emotivo, e la secrezione ormonale neuroendocrino. Uno dei più grandi densità di neuroni dopaminergici è all'interno del corpo striato, che possono essere suddivisi in due distinte regioni neuroanatomiche conosciuto come il nucleo accumbens e del caudato-putamen. L'obiettivo è quello di illustrare un protocollo generale per la fetta di scansione veloce voltammetria ciclica (FSCV) all'interno del corpo striato mouse. FSCV è una ben definita tecnica elettrochimica fornendo l'opportunità di misurare il rilascio di dopamina e la diffusione in tempo reale discrete cervello regioni. Microelettrodi in fibra di carbonio (diametro di circa 7 micron) sono utilizzati in FSCV per rilevare l'ossidazione della dopamina. Il vantaggio di utilizzare FSCV analitici per rilevare la dopamina è la sua migliore risoluzione temporale di 100 millisecondi e una risoluzione spaziale di meno di dieci micron, fornendo informazioni complementari al microdialisi in vivo.
Protocol
Discussion
Il protocollo presentato qui dimostra come preparare e utilizzare fette coronali del cervello del mouse per gli esperimenti FSCV. Anche se questo metodo è specifico per ottenere e misurare la dinamica della dopamina, neurotrasmettitori altri come l'adenosina, perossido di idrogeno, noradrenalina e serotonina sono stati monitorati in vivo o in vitro con FSCV 3, 8 – 11. FSCV può essere utilizzato per monitorare alcune di queste sostanze neurochimiche altri semplici modifiche della forma …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Finanziamenti forniti dal National Institute on abuso di alcool e l'alcolismo (NIAAA; AA-016967 e AA016967-01S1, TAM), Wayne State University di avvio dei fondi, e la Wayne State University Research Grant Program. Il contenuto è di esclusiva responsabilità degli autori e non rappresenta il punto di vista ufficiale del NIAAA o il National Institutes of Health.
Materials
| Name | Company | CAS number |
Reagent |
||
Potassium Chloride |
Fisher | 7447407 |
Sodium chloride |
EMD Chemicals | 7647145 |
Magnesium chloride |
Fisher |
7791186 |
Calcium chloride |
Fisher |
10035048 |
Sodium bicarbonate |
EMD Chemicals |
144558 |
Sodium phosphate,Dibasic |
EMD Chemicals |
7558794 |
D-glucose |
Fisher |
50997 |
Ascorbic acid |
Fisher |
50817 |
Sucrose |
Fisher |
57501 |
|
|
|
Materials |
Vendor |
Catalogue number |
Carbon fiber |
Goodfellow Oakdale, PA | |
Glass capillary |
A-M Systems Carlsborg WA. | 602000 |
Silver wire |
A-M Systems Carlsborg WA. | 787000 |
Tungsten stimulating electrode |
Plastics One, Roanoke, VA | |
Platinum wire |
||
Lead wire |
Squires Electronics, Cornelius, OR | |
Loctite 404 instant adhesive |
Hankal Corp. Rocky Hill CT. |
|
Razor blade |
World precision Instruments Inc. FL. | |
BD Spinal needle |
BD Medical systems, Franlin Lake, NJ |
REF 405234 |
Surgical Blade |
Feather Safety razor Co. LTD. Japan | |
|
||
Software |
Vendor |
Catalogue number |
TH software |
ESA Inc.,Chelmsford, MA | |
Instrument |
Vendor |
Catalogue number |
Submersion recording chamber |
Custom Scientific, Denver, CO | |
Neorolog stimulus isolator |
Digitmeter, Hertfordshire, England | |
Automatic temperature controller |
Warner Instrument Corporation | |
Microscope (SZX7) |
Olympus | |
Microscope |
Fisher | |
Vibratome 3000 sectioning system |
St. Louis , MO. | |
Perfusion pump |
Watson Marlow Limited, Falmouth Cornwall – England | H110708 |
Micropipette puller |
Narishige, Tokyo, Japan | |
ChemClamp potentiostat |
Dagan Corporations, Minneapolis, MN. |
Referências
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