Summary

À long terme des essais de toxicité létale avec le Crustacé Artemia franciscana</em

Published: April 14, 2012
doi:

Summary

Cette étude concerne le développement et la standardisation d'un protocole méthodologique précieux pour déterminer à long terme (14 jours) toxicité létale exercée par des substances chimiques, les eaux usées industrielles ou des eaux usées et liquides des échantillons environnementaux sur le crustacé d'eau salée,<em> Artemia franciscana</em>.

Abstract

Nos activités de recherche cibler l'utilisation de méthodes biologiques pour l'évaluation de la qualité de l'environnement, avec une référence particulière à l'eau salée / eau saumâtre et les sédiments. Le choix des indicateurs biologiques doivent être fondées sur des connaissances scientifiques fiables et, éventuellement, de la disponibilité des procédures normalisées. Dans cet article, nous présentons un protocole standardisé qui a utilisé la crustacés marins Artemia pour évaluer la toxicité des produits chimiques et / ou de marins matrices environnementales. Des scientifiques proposent que la crevette de saumure (Artemia) est un candidat approprié pour le développement d'un bio-essai standard pour l'utilisation dans le monde entier. Un certain nombre de documents ont été publiés sur les effets toxiques des produits chimiques divers et des substances toxiques sur la crevette de saumure (Artemia). L'avantage majeur de ce crustacé pour les études de toxicité est la disponibilité globale des kystes secs; ceux-ci peuvent être immédiatement utilisés dans les essais et la culture difficile n'est pas exigé <sup> 1,2. Essais de toxicité Cyst-base ne coûtent pas cher, disponible en permanence, simple et fiable et sont donc une réponse importante aux besoins de routine de dépistage de la toxicité, pour les besoins de surveillance industriels ou à des fins réglementaires 3. La méthode proposée consiste à la mortalité comme critère d'évaluation. Les chiffres de survivants ont été comptés et le pourcentage de décès ont été calculés. Les larves ont été considérés comme morts si elles ne présentent pas de tout mouvement interne ou externe pendant plusieurs secondes d'observation 4. Cette procédure était de tests normalisés d'une substance de référence (dodécyl sulfate de sodium); certains résultats sont rapportés dans ce travail. Cet article accompagne une vidéo qui décrit les performances des tests de toxicité de la procédure, montrant toutes les étapes liées au protocole.

Protocol

1. La méthode standard Notre test consiste à exposer les larves d'Artemia à un intervalle de concentrations de la substance ou un échantillon d'essai pour la détermination des niveaux de concentration ou de dilution qui causent la mort de 50% des organismes (CL 50) exposés pendant 14 jours et répondant aux conditions définies par cette méthode. Si nécessaire et possible, celui-ci peut également être déterminée: a) le niveau de concentration qui provoqu…

Discussion

Artemia est l'un des organismes d'essai les plus précieuses disponibles pour des essais d'écotoxicité et de la recherche fait jusqu'ici nous permet d'affirmer qu'il est possible de maintenir plusieurs options relatives à l'utilisation d'Artemia en toxicologie et écotoxicologie. Les caractéristiques qui font de cette organisme dans une espèce appropriée pour des essais biologiques sont les suivants: une répartition géographique large, une grande adaptabilité au…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Produit par Loredana Manfra de l'Institut pour la protection de l'environnement et de la recherche (ISPRA-ministère de la surveillance de la qualité de l'environnement) et Federica Savorelli de l'Agence régionale pour la protection de l'environnement (Emilie-Romagne, Italie).

Membres de référence pour le Groupe de travail sur les sous-le crustacé Artemia au sein du Groupe des méthodes biologiques – Saltwater / eau saumâtre et des sédiments de la Commission sur la qualité de l'eau UNICHIM (l'institut de normalisation technique d'exploitation dans le secteur de la chimie).

Vidéographie et montage par Marco Pisapia de l'ISPRA (Web de l'Unité).

Coordination de la production par Anna Maria Cicéron et Erika Magaletti de l'ISPRA (ministère de la surveillance de la qualité de l'environnement).

Nous tenons à remercier l'Agence régionale pour la protection de l'environnement de l'Emilie-Romagne, Ferrare Direction, le Groupe des méthodes biologiques – Saltwater / saumâtreEau et des sédiments de la Commission sur la qualité de l'eau UNICHIM et Luciana Migliore, l'Université Tor Vergata (Rome) pour leur coopération; Rossella Boscolo et Massimo Gabellini de l'ISPRA (Département de la prévention et l'atténuation des impacts) pour leur soutien financier; Fabio Matassa et la London École de langues à Rome pour leur soutien linguistique.

Materials

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Name of the reagent Company Product number
Sodium Dodecyl Sulfate Sigma-Aldrich L4390

Appendix

The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.

A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO3, 30 g of KH2PO4 and 20 g of NH4Cl in distilled water.

Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:

  • A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO4 H2O, 25 g of CuSO4 5 H2O, 30 g of CoSO4 7 H2O and 20 g of MnSO4 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl3 •6 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “C” containing 25 g of Na2MoO4 •2 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “D” containing 50 g di Na2EDTA •2 H2O in distilled water.

A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.

Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:

  • A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
  • A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
  • A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.

A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.

A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.

Referências

  1. Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
  2. Persoone, G., Wells, P. G., Sorgeloos, P. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterization Toxicology. , 259-275 (1987).
  3. Nunes, B. S., Carvalho, F. D., Guilhermino, L. M., Stappen, G. V. a. n. Use of the genus Artemia in ecotoxicity testing. Envir. Poll. 144, 453-462 (2006).
  4. APAT IRSA-CNR. . Metodi analitici per le acque Manuali e Linee guida 29/2003. Terzo Metodo, 8060 (2003).
  5. Sorgellos, P., Wielen, C. R. e. m. i. c. h. e. -. V. a. n. D. e. r., Persoone, G. The use of Artemia nauplii for toxicity tests – a critical analysis. Ecotox. Env. Saf. 2, 249-255 (1978).
  6. Savorelli, F., Palazzi, D., Gorbi, G., Invidia, M., Sei, S., Magaletti, E., Manfra, L., Gelli, F. Set up of a standard methodology for 14-day bioassay on Artemia franciscana and A. parthenogenetica. Biol. Amb. 21, 27-36 (2007).
  7. Brix, K. V., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Chronic toxicity of arsenic to the Great Salt Lake brine shrimp, Artemia franciscana. Ecotox. Environ. Saf. 54, 169-175 (2003).
  8. Brix, K. V., Deforest, D. K., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Derivation of a chronic site-specific water quality standard for selenium in the Great Salt Lake, Utah, USA. Environ. Toxicol. Chem. 23, 606-612 (2004).
  9. . Qualitá dell’acqua – Determinazione della tossicitá letale a 14 giorni con Artemia franciscana (Crustacea: Anostraca). Commissione UNICHIM “Qualitá dell’acqua” Gruppo di Lavoro “Metodi Biologici” Sottogruppo “Acque salate/salmastre e sedimenti”. , (2010).
  10. Varo, I., Navarro, J. C., Amat, F., Guilhermino, L. Characterisation of cholinesterases and evaluation of the inhibitory potential of chlorpyrifos and dichlorvos to Artemia salina and Artemia parthenogenetica. Chem. 48, 563-569 (2002).
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Manfra, L., Savorelli, F., Pisapia, M., Magaletti, E., Cicero, A. M. Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana. J. Vis. Exp. (62), e3790, doi:10.3791/3790 (2012).

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