Langfristige letale Toxizität Test mit dem Krustentier Artemia franciscana</em

Summary

Diese Studie bezieht sich auf die Entwicklung und Standardisierung eines wertvollen methodischen Protokoll, um langfristig (14 Tage) letale Toxizität von chemischen Substanzen, industrielles Abwasser oder Abwasser und flüssigen Umweltproben auf dem Salzwasser Krustentier ausgeübt zu bestimmen,<em> Artemia franciscana</em>.

Abstract

Unsere Forschungsaktivitäten gezielt den Einsatz von biologischen Methoden zur Beurteilung der Umweltqualität, insbesondere in Bezug auf Salzwasser / Brackwasser und Sediment. Die Wahl des biologischen Indikatoren müssen auf zuverlässigen wissenschaftlichen Erkenntnissen beruhen und möglicherweise auf die Verfügbarkeit von standardisierten Verfahren. In diesem Artikel präsentieren wir ein standardisiertes Protokoll, das die Marine Krustentier Artemia verwendet, um die Toxizität von Chemikalien und / oder der Meeresumwelt Matrizen zu bewerten. Die Wissenschaftler schlagen vor, den Artemia (Artemia) ein geeigneter Kandidat für die Entwicklung eines Standard-Bioassay für die weltweite Nutzung ist. Eine Reihe von Arbeiten über die toxischen Wirkungen von verschiedenen Chemikalien und Schadstoffen auf Artemia (Artemia) veröffentlicht worden. Der große Vorteil dieses Krustentier für Studien zur Toxizität ist die allgemeine Verfügbarkeit der trockenen Zysten, diese können sofort in Tests verwendet werden und schwierige Anbau wird nicht verlangt <sup> 1,2. Cyst-basierte Toxizitätstests sind billig, sind ständig verfügbar, einfach und zuverlässig und damit eine wichtige Antwort auf die Bedürfnisse von Routine-Screening Toxizität, für industrielle Überwachungs-Anforderungen für regulatorische Zwecke oder ^3. Das vorgeschlagene Verfahren umfasst die Mortalität als Endpunkt. Die Zahl der Überlebenden wurden gezählt und Prozentsatz der Todesfälle wurden berechnet. Die Larven wurden als tot, wenn sie nicht zeigen alle internen oder externen Bewegung während mehreren Sekunden der Beobachtung ^4. Dieses Verfahren war standardisierten Tests eine Referenzsubstanz (Natriumdodecylsulfat); Einige Ergebnisse sind in dieser Arbeit berichtet. Dieser Artikel begleitet ein Video, das die Leistung des Verfahrensrechts Toxizitätstests beschreibt, in der alle Schritte im Zusammenhang mit dem Protokoll.

Protocol

1. Method Standard Unsere Tests schließt ein, dass Artemia Larven auf ein Intervall von Stoffkonzentrationen oder einer Probe zum Zwecke der Bestimmung der Konzentration oder Verdünnung Ebenen, die den Tod von 50% der Organismen (LC 50) über 14 Tage ausgesetzt wäre und die die Bedingungen definiert nach diesem Verfahren. Wenn nötig und möglich, kann die folgende ermittelt werden: a) die Konzentration, die den Tod von 20% der Organismen ausgesetzt (LC 20) be…

Discussion

Artemia ist eine der wertvollsten Testorganismen für Ökotoxizitätsuntersuchungen und Forschung bisher getan erlaubt uns zu behaupten, dass es möglich ist, mehrere Optionen im Zusammenhang mit Artemia Einsatz in Toxikologie und Ökotoxikologie zu erhalten. Die Merkmale, die diesen Organismus verwandeln in eine geeignete Arten für Bioassays sind: eine breite geografische Streuung, hohe Anpassungsfähigkeit an widrige Umgebungsbedingungen und abwechslungsreiche Nährstoffe, relativ einfachen Labor-Ku…

Materials

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Name of the reagent	Company	Product number
Sodium Dodecyl Sulfate	Sigma-Aldrich	L4390

Appendix

The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.

A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO₃, 30 g of KH₂PO₄ and 20 g of NH₄Cl in distilled water.

Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:

• A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO₄ H₂O, 25 g of CuSO₄ 5 H₂O, 30 g of CoSO₄ 7 H₂O and 20 g of MnSO₄ H₂O in distilled water;
• A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl₃ •6 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “C” containing 25 g of Na₂MoO₄ •2 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “D” containing 50 g di Na₂EDTA •2 H₂O in distilled water.

A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.

Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:

• A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
• A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
• A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.

A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.

A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.