Summary

Crustacean साथ लंबी अवधि के घातक विषाक्तता टेस्ट Artemia franciscana</em

Published: April 14, 2012
doi:

Summary

इस अध्ययन और एक मूल्यवान पद्धति के लिए लंबी अवधि (14 दिन) घातक रासायनिक पदार्थों, औद्योगिक अपशिष्ट या मल और खारे पानी जलीय पर्यावरण पर तरल नमूने द्वारा exerted विषाक्तता निर्धारित प्रोटोकॉल के विकास और मानकीकरण का सवाल है,<em> Artemia franciscana</em>.

Abstract

हमारे अनुसंधान गतिविधियों के खारे पानी / खारा पानी और तलछट के लिए विशेष संदर्भ के साथ पर्यावरण की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए जैविक विधियों के प्रयोग के लक्ष्य. जैविक संकेतकों की पसंद विश्वसनीय वैज्ञानिक ज्ञान पर आधारित होना चाहिए, और संभवतः मानकीकृत प्रक्रियाओं की उपलब्धता पर. इस अनुच्छेद में, हम एक मानकीकृत प्रोटोकॉल है कि समुद्री जलीय Artemia का इस्तेमाल रसायन और / या समुद्री पर्यावरण matrices के विषाक्तता का मूल्यांकन करने के लिए उपस्थित थे. वैज्ञानिकों का प्रस्ताव है कि नमकीन चिंराट (Artemia) के दुनिया भर में उपयोग करने के लिए एक मानक bioassay के विकास के लिए एक उपयुक्त उम्मीदवार है. नमकीन चिंराट (Artemia) पर विभिन्न रसायनों और विषैले पदार्थ के विषैले प्रभाव पर कागज के एक नंबर प्रकाशित किया गया है. विषाक्तता अध्ययन के लिए इस जलीय के प्रमुख लाभ शुष्क अल्सर की कुल उपलब्धता है, तुरंत इन परीक्षण में इस्तेमाल किया जा सकता है और मुश्किल खेती की मांग नहीं की है <sup> 1,2. पुटी आधारित विषाक्तता assays सस्ते होते हैं, लगातार उपलब्ध सरल और विश्वसनीय और इस प्रकार विषाक्तता स्क्रीनिंग की दिनचर्या की जरूरत है एक महत्वपूर्ण जवाब औद्योगिक निगरानी आवश्यकताओं के लिए या विनियामक 3 प्रयोजनों के लिए,. प्रस्तावित विधि एक endpoint के रूप में मृत्यु दर शामिल है. जीवित बचे लोगों की संख्या में गिना गया और मौतों का प्रतिशत गणना की गई. लार्वा मृत माना गया है अगर वे 4 अवलोकन के कई सेकंड के दौरान किसी भी आंतरिक या बाह्य आंदोलन प्रदर्शन नहीं किया था. यह प्रक्रिया मानकीकृत परीक्षण संदर्भ पदार्थ (सोडियम Dodecyl सल्फेट) था, कुछ परिणाम इस काम में रिपोर्ट कर रहे हैं. यह लेख एक वीडियो कि प्रक्रियात्मक विषाक्तता परीक्षण के प्रदर्शन का वर्णन है, प्रोटोकॉल के लिए संबंधित सभी चरणों को दिखाने के साथ.

Protocol

1. विधि मानक हमारे परीक्षण पदार्थ सांद्रता के अंतराल या एकाग्रता या कमजोर पड़ने के स्तर है कि 14 दिनों से अधिक उजागर जीवों की 50% की मृत्यु (50 नियंत्रण रेखा) का कारण होता है का निर्धारण करने के ?…

Discussion

Artemia सबसे मूल्यवान परीक्षण इतनी दूर किया ecotoxicity परीक्षण और अनुसंधान के लिए उपलब्ध जीवों में से एक है हमें राज्य है कि यह संभव है Artemia विष विज्ञान और ईकोटोकसीकोलौजी में में उपयोग करने के लिए संबंधित कई…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Web Unit).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch, the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality and Luciana Migliore, Tor Vergata University (Rome) for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; Fabio Matassa and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Materials

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Name of the reagent Company Product number
Sodium Dodecyl Sulfate Sigma-Aldrich L4390

Appendix

The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.

A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO3, 30 g of KH2PO4 and 20 g of NH4Cl in distilled water.

Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:

  • A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO4 H2O, 25 g of CuSO4 5 H2O, 30 g of CoSO4 7 H2O and 20 g of MnSO4 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl3 •6 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “C” containing 25 g of Na2MoO4 •2 H2O in distilled water;
  • A liter of solution “D” containing 50 g di Na2EDTA •2 H2O in distilled water.

A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.

Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:

  • A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
  • A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
  • A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.

A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.

A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.

Referências

  1. Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
  2. Persoone, G., Wells, P. G., Sorgeloos, P. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterization Toxicology. , 259-275 (1987).
  3. Nunes, B. S., Carvalho, F. D., Guilhermino, L. M., Stappen, G. V. a. n. Use of the genus Artemia in ecotoxicity testing. Envir. Poll. 144, 453-462 (2006).
  4. APAT IRSA-CNR. . Metodi analitici per le acque Manuali e Linee guida 29/2003. Terzo Metodo, 8060 (2003).
  5. Sorgellos, P., Wielen, C. R. e. m. i. c. h. e. -. V. a. n. D. e. r., Persoone, G. The use of Artemia nauplii for toxicity tests – a critical analysis. Ecotox. Env. Saf. 2, 249-255 (1978).
  6. Savorelli, F., Palazzi, D., Gorbi, G., Invidia, M., Sei, S., Magaletti, E., Manfra, L., Gelli, F. Set up of a standard methodology for 14-day bioassay on Artemia franciscana and A. parthenogenetica. Biol. Amb. 21, 27-36 (2007).
  7. Brix, K. V., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Chronic toxicity of arsenic to the Great Salt Lake brine shrimp, Artemia franciscana. Ecotox. Environ. Saf. 54, 169-175 (2003).
  8. Brix, K. V., Deforest, D. K., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Derivation of a chronic site-specific water quality standard for selenium in the Great Salt Lake, Utah, USA. Environ. Toxicol. Chem. 23, 606-612 (2004).
  9. . Qualitá dell’acqua – Determinazione della tossicitá letale a 14 giorni con Artemia franciscana (Crustacea: Anostraca). Commissione UNICHIM “Qualitá dell’acqua” Gruppo di Lavoro “Metodi Biologici” Sottogruppo “Acque salate/salmastre e sedimenti”. , (2010).
  10. Varo, I., Navarro, J. C., Amat, F., Guilhermino, L. Characterisation of cholinesterases and evaluation of the inhibitory potential of chlorpyrifos and dichlorvos to Artemia salina and Artemia parthenogenetica. Chem. 48, 563-569 (2002).
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Manfra, L., Savorelli, F., Pisapia, M., Magaletti, E., Cicero, A. M. Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana. J. Vis. Exp. (62), e3790, doi:10.3791/3790 (2012).

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