甲殻類との長期致死毒性試験アルテミアfranciscana</em

Summary

本研究では、化学物質、産業廃水や下水と海水甲殻類の液体環境試料によって発揮される長期的（14日）致死毒性を決定するための貴重な方法論的なプロトコルの開発と標準化にかかわる<em>アルテミアfranciscana</em>。

Abstract

我々の研究活動は、海水/汽水と堆積物への特定を参照して、環境の質の評価のための生物学的方法の使用を対象としています。生物学的指標の選択は、標準化された手順の可用性に、おそらく、信頼できる科学的知見に基づいてしなければなりません。本稿では、化学物質、および/ ​​または海洋環境の行列の毒性を評価するために、海洋甲殻類のブラインシュリンプを使用した標準化されたプロトコルを提示します。科学者たちは、ブラインシュリンプ（ アルテミア ） は世界的に利用するための標準アッセイの開発に適した候補であることを提案する。論文の数は、ブラインシュリンプ（ アルテミア ）の様々な化学物質や有害物質の毒性に公開されています。毒性研究のためのこの甲殻類の主な利点は、乾燥した嚢胞の全体的な可用性であり、これらはすぐにテストで使用することができ、困難な栽培が求められていません<suP> 1,2。嚢胞ベース毒性アッセイは、継続的に、利用可能な、シンプルで信頼性の高い安価であるため、工業用監視の要件については、または規制上の目的³の毒性スクリーニングのルーチンニーズに重要な答えです。提案手法は、エンドポイントとして死亡率を伴う。生存者の数を数えたと死亡の割合を算出した。彼らが観察⁴の数秒の間に、任意の内部または外部の動きを示さなかった場合は、幼虫が死んだと考えられた。このプロシージャは、参照物質（ドデシル硫酸ナトリウム）標準化されたテストであった。いくつかの結果がこの仕事に報告されています。この資料では、プロトコルに関連するすべての手順を示す、手続きの毒性試験の性能を説明するビデオが付属しています。

Protocol

1。メソッドは、標準我々のテストは、14日間暴露し、定義された条件を満たす生物の50％（LC 50）の死を引き起こす濃度または希釈濃度を決定する目的のために物質濃度や試験サンプルの間隔にアルテミア幼生を公開することが含まれこの方法による。必要かつ可能であれば、以下も決定することができる。）露出した生物の20％（LC 20）の死を引き?…

Discussion

アルテミアは、私たちは、それが毒性毒性学におけるアルテミアの使用に関連するいくつかのオプションを維持することが可能であることを明記することができ、これまで行わ生態毒性試験および研究のために利用できる最も貴重な試験生物の一つです。バイオアッセイに適した種にこの生物をオン特性は次のとおりです。広い地理的分布、不利な環境条件と様々な栄養素を、…

Materials

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Name of the reagent	Company	Product number
Sodium Dodecyl Sulfate	Sigma-Aldrich	L4390

Appendix

The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.

A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO₃, 30 g of KH₂PO₄ and 20 g of NH₄Cl in distilled water.

Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:

• A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO₄ H₂O, 25 g of CuSO₄ 5 H₂O, 30 g of CoSO₄ 7 H₂O and 20 g of MnSO₄ H₂O in distilled water;
• A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl₃ •6 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “C” containing 25 g of Na₂MoO₄ •2 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “D” containing 50 g di Na₂EDTA •2 H₂O in distilled water.

A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.

Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:

• A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
• A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
• A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.

A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.

A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.