갑각류와 장기 치명적인 독성 시험 Artemia franciscana</em

Summary

이 연구, 화학 물질, 산업 폐수 또는 하수 및 해수 갑각류에 액상 환경 시료에 의해 진력 장기 (14 일) 치명적인 독성을 결정하는 중요한 방법론 프로토콜의 개발 및 표준화에 관한<em> Artemia franciscana</em>.

Abstract

우리의 연구 활동은 바닷물 / 소금기있는 물 및 침전물에 대한 특정 참조와 함께, 환경 품질 평가를위한 생물 학적 방법의 사용을 타겟팅합니다. 생물 학적 지표의 선택은 표준화된 절차의 예약 상황에, 가능성, 신뢰성있는 과학적 지식을 기반으로해야합니다. 이 문서에서 우리는 화학 물질 및 / 또는 해양 환경 매트릭스의 독성을 평가하기 위해 해양 갑각류 Artemia를 사용한 표준화된 프로토콜을 소개합니다. 과학자들은 소금물 새우 (Artemia)는 전 세계적 활용에 대한 표준 bioassay의 발달에 적합한 후보는 것을 제안합니다. 논문의 숫자는 소금물 새우 (Artemia)에서 다양한 화학 물질과 toxicants의 독성 효과에 공개되었습니다. 독성 연구를 위해이 갑각류의 주요한 이점은 건조 cysts의 전반적인 가용성이며 이들은 즉시 테스트에 사용될 수 있으며, 어려운 재배는 요구하지 않습니다 <suP> 1,2. 낭종 기반 독성 assays이 저렴하고, 지속 가능한 간단하고 신뢰성 및 산업 모니터링 요건이나 규제 목적 ^3, 따라서 독성 검사의 일상적인 요구에 중요한 대답입니다. 제안된 방법은 엔드 포인트로서 사망률과 관련이 있습니다. 생존자의 숫자는 집계되었으며 사망자의 비율이 계산되었다. 그들이 관찰 ^4의 몇 초 동안 내부 또는 외부 움직임을 전시하지 않은 경우 애벌레는 죽은 것으로 간주되었다. 이 절차를 참조 물질 (나트륨 Dodecyl 황산) 표준 테스트를했습니다, 일부 결과는이 작품에보고됩니다. 이 문서는 프로토콜에 관련된 모든 단계를 보여주는 절차적 독성 테스트의 성능을 설명하는 동영상을 함께.

Protocol

1. 방법 표준 우리의 테스트는 생물의 50 %의 사망 (LC 50) 14 일 동안 노출이 발생할 것입 농도 또는 희석 수준을 결정하는 목적으로 약물 농도의 간격이나 테스트 샘플에 Artemia의 애벌레를 노출하고 정의된 조건을 충족 포함 이 방법에 의해. 필요하고 가능하다면, 다음도 결정될 수 있습니다) 노출 생물의 20 % (LC 20)의 사망 원인이 농도 수준, B)보다 높은 사?…

Discussion

Artemia 우리는 독극물과 Ecotoxicology의 Artemia 사용과 관련된 몇 가지 옵션을 유지하는 것이 가능하다고 명시 수 있도록 지금까지 한 ecotoxicity 테스트 및 연구에 사용할 수있는 가장 가치있는 시험 생물 중 하나입니다. bioassays에 적합한 수종에이 유기체를 돌려 특징은 다음과 같습니다 넓은 지리적 분포, 불리한 환경 조건과 다양한 영양소, 비교적 간단한 실험실 문화 유지 보수, 조작에 ?…

Materials

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Name of the reagent	Company	Product number
Sodium Dodecyl Sulfate	Sigma-Aldrich	L4390

Appendix

The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.

A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO₃, 30 g of KH₂PO₄ and 20 g of NH₄Cl in distilled water.

Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:

• A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO₄ H₂O, 25 g of CuSO₄ 5 H₂O, 30 g of CoSO₄ 7 H₂O and 20 g of MnSO₄ H₂O in distilled water;
• A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl₃ •6 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “C” containing 25 g of Na₂MoO₄ •2 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “D” containing 50 g di Na₂EDTA •2 H₂O in distilled water.

A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.

Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:

• A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
• A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
• A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.

A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.

A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.