A longo prazo de Teste de toxicidade letal com o crustáceo Artemia franciscana</em
Summary
Este estudo diz respeito ao desenvolvimento e padronização de um protocolo metodológico valioso para determinar toxicidade a longo prazo (14 dias) letal exercida por substâncias químicas, efluentes industriais ou esgotos e líquidos amostras ambientais sobre o crustáceo de água salgada,<em> Artemia franciscana</em>.
Abstract
Nossas atividades de pesquisa sobre a utilização de métodos biológicos para a avaliação da qualidade ambiental, com particular referência à água salgada / água salobra e sedimentos. A escolha dos indicadores biológicos devem ser baseadas em conhecimentos científicos confiáveis e, possivelmente, sobre a disponibilidade de procedimentos padronizados. Neste artigo, apresentamos um protocolo padronizado que utilizou o crustáceo marinho Artemia para avaliar a toxicidade de produtos químicos e / ou marinhos matrizes ambientais. Os cientistas propõem que o camarão (Artemia) é um candidato adequado para o desenvolvimento de um bioensaio padrão para utilização em todo o mundo. Uma série de artigos têm sido publicados sobre os efeitos tóxicos de vários produtos químicos e substâncias tóxicas sobre Artemia salina (Artemia). A principal vantagem do presente crustáceo para estudos de toxicidade é a disponibilidade geral dos cistos secos; estes podem ser imediatamente utilizado no teste e de difícil cultivo não é exigido <sup> 1,2. Cisto ensaios baseados toxicidade são baratos, continuamente disponível, simples e confiável, e são, portanto, uma resposta importante para as necessidades de rotina de triagem de toxicidade, por exigências de controlo industriais ou para fins de regulamentação 3. O método proposto envolve a mortalidade como um ponto final. O número de sobreviventes foram contadas ea percentagem de mortes foram calculados. As larvas foram considerados mortos se eles não apresentaram qualquer movimento interno ou externo durante vários segundos de observação 4. Este procedimento foi testes padronizados uma substância de referência (dodecil sulfato de sódio); alguns resultados são reportados neste trabalho. Este artigo acompanha um vídeo que descreve o desempenho de testes de toxicidade processual, mostrando todos os passos relacionados com o protocolo.
Protocol
Discussion
Artemia é um dos organismos de teste mais valiosos disponíveis para testes de ecotoxicidade e de investigação feito até agora permite-nos afirmar que é possível manter várias opções relacionadas com Artemia uso em Toxicologia e Ecotoxicologia. As características que tornam este organismo em uma espécie com potencial para bioensaios são: uma ampla distribuição geográfica, alta adaptabilidade às condições ambientais adversas e nutrientes variados, cultura laboratorial relativamente sim…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Produzido por Loredana Manfra do Instituto para a proteção ambiental e à pesquisa (ISPRA-Departamento de Monitoramento da Qualidade Ambiental) e Savorelli Federica da Agência Regional de Proteção Ambiental (Emilia-Romagna, Itália).
Os membros de referência para o subgrupo de trabalho sobre o crustáceo Artemia dentro do Grupo métodos biológicos – água salgada / água salobra e Sedimentos da Comissão UNICHIM da Qualidade da Água (Instituto para a operação de normalização técnica no sector químico).
Videografia e edição por Marco Pisapia de ISPRA (Unidade de Web).
Coordenação de Produção por Anna Maria Cícero e Magaletti Erika de ISPRA (Departamento de Monitoramento da Qualidade Ambiental).
Gostaríamos de agradecer à Agência Regional de Proteção Ambiental da Emilia-Romagna, Ferrara Branch, o Grupo de Métodos Biológicos – água salgada / salobraÁgua e Sedimentos da Comissão UNICHIM sobre Qualidade da Água e Migliore Luciana, da Universidade Tor Vergata (Roma) da sua cooperação; Boscolo Rossella e Massimo Gabellini de ISPRA (Departamento de Prevenção e Mitigação de Impactos) pelo apoio financeiro; Matassa Fabio e Londres Escola de Idiomas em Roma, pelo seu apoio linguístico.
Materials
Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).
Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).
Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).
Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).
We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.
| Name of the reagent | Company | Product number |
| Sodium Dodecyl Sulfate | Sigma-Aldrich | L4390 |
Appendix
The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.
A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO3, 30 g of KH2PO4 and 20 g of NH4Cl in distilled water.
Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:
- A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO4 H2O, 25 g of CuSO4 5 H2O, 30 g of CoSO4 7 H2O and 20 g of MnSO4 H2O in distilled water;
- A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl3 •6 H2O in distilled water;
- A liter of solution “C” containing 25 g of Na2MoO4 •2 H2O in distilled water;
- A liter of solution “D” containing 50 g di Na2EDTA •2 H2O in distilled water.
A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.
Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:
- A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
- A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
- A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.
A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.
A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.
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