Долгосрочные Смертельное испытания токсичности с ракообразных Артемия franciscana</em

Summary

Это исследование касается разработки и стандартизации ценный методологический протокол для определения долгосрочных (14 дней) летальный токсичность оказывают химические вещества, промышленных сточных вод или сточных вод и жидких проб окружающей среды на морских ракообразных,<em> Артемия franciscana</em>.

Abstract

Наша исследовательская деятельность нацелены на использование биологических методов для оценки качества окружающей среды, с особым упором на морской / соленой воды и осадка. Выбор биологические показатели должны быть основаны на надежных научных знаний и, возможно, на наличие стандартных процедур. В этой статье мы представляем стандартизированный протокол, который используется морских ракообразных Artemia для оценки токсичности химических веществ и / или морской среды матриц. Ученые предлагают артемии (Artemia) является подходящим кандидатом для разработки стандартных биопроб во всем мире использование. В ряде работ были опубликованы на токсическое воздействие различных химических веществ и токсичных веществ на артемии (Artemia). Основное преимущество этого рачка для исследования токсичности общей доступности сухой кисты; они могут быть немедленно использованы в тестировании и трудно выращивание не требует <suр> 1,2. Киста на основе анализов токсичности дешевых, постоянно доступны, просты и надежны, и, таким образом, важным ответом на рутинный потребности токсичности скрининга, для промышленных потребностей мониторинга или для целей регулирования ^3. Предлагаемый метод включает в себя смертность в качестве конечной точки. Число выживших были подсчитаны и процент смертности были рассчитаны. Личинки считали мертвым, если они не проявляют любого внутреннего или внешнего движения в течение нескольких секунд наблюдения ^4. Эта процедура была стандартизированное тестирование эталонного вещества (сульфат натрия додецилсульфата), некоторые результаты представлены в этой работе. Эта статья сопровождается видео, которое описывает выполнение процедурных тестирования токсичности, показывая все этапы, связанные с протоколом.

Protocol

1. Метод стандартных Наше тестирование включает в себя разоблачение Артемия личинок интервале концентраций веществ или образца для определения концентрации или разведения уровней, которые могут вызвать гибель 50% организмов (LC 50) подвергается в течение 14 дней ?…

Discussion

Артемия является одним из самых ценных тест-организмов для тестирования экотоксичности и исследований, проведенных до сих пор позволяет нам утверждать, что можно сохранить несколько вариантов, связанных с использованием артемии в токсикологии и экотоксикологии. Характерис…

Materials

Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).

Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).

Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).

Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).

We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.

Name of the reagent	Company	Product number
Sodium Dodecyl Sulfate	Sigma-Aldrich	L4390

Appendix

The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.

A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO₃, 30 g of KH₂PO₄ and 20 g of NH₄Cl in distilled water.

Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:

• A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO₄ H₂O, 25 g of CuSO₄ 5 H₂O, 30 g of CoSO₄ 7 H₂O and 20 g of MnSO₄ H₂O in distilled water;
• A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl₃ •6 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “C” containing 25 g of Na₂MoO₄ •2 H₂O in distilled water;
• A liter of solution “D” containing 50 g di Na₂EDTA •2 H₂O in distilled water.

A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.

Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:

• A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
• A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
• A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.

A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.

A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.