背腹鼠类内侧嗅皮层组织的调查矢状窦片的制备
Summary
我们描述了大脑切片，保持背腹轴的内侧嗅皮层（MEC）的编制和电生理记录的程序。由于定位的神经编码如下内MEC的背腹侧组织，这些程序协助调查重要的导航和记忆的细胞机制。
Abstract
在大脑的计算依赖于适当的回应突触输入的神经元。神经元的不同，在他们的补充和细胞膜离子通道的分布，确定他们如何应对突触输入。然而，这些细胞的特性和动物行为的神经元功能之间的关系还不是很清楚。这个问题的办法之一，是研究地形组织的神经回路在单个神经元映射到它们编码的信息或计算的位置，他们携带1。使用这种方法的实验表明调节突触反应，感觉和认知电路2,3基本信息编码的原则。
沿背腹轴内侧嗅皮层（MEC）的空间表示地形的组织提供了一个机会，以建立细胞的机制和计算之间的关系，我空间认知mportant。啮齿类动物的MEC的第二层中的神经元编码的位置，使用网格状发射领域4-6。为MEC的背仓发现的神经元，个别的射击领域，形成了一个网之间的距离是30厘米的顺序，而这个距离在逐步位置更腹侧神经元增加至大于1米。一些研究表明MEC的，像网格射击领域之间的间距，也根据自己的背腹位置不同的第二层的神经元细胞的特性，这表明这些细胞的特性是重要的空间计算2,7-10。
在这里，我们描述程序编制和维持MEC的有利地形组织MEC的神经元的生物物理和解剖特性的调查背腹程度的脑切片的电生理记录。背腹的位置确定列印eurons相对解剖标志是难以建立与使用水平的MEC 7,8,11,12片的协议，准确，因为它是难以确定确切的背腹片的位置参考点。我们所描述的程序，使沿背腹轴的迈克，以及可视化的2,10分子梯度准确和一致的测量记录细胞的位置。成年小鼠（28天）使用的程序已经开发，并已成功受聘小鼠1.5岁。的调整，他们可以用年轻的老鼠或其他啮齿类动物。标准化体系的编制及测量系统的调查将有助于这方面的细胞和微电路的特性。
Protocol
Discussion
为了方便调查MEC的电路特性，遵循背腹的组织，我们已经描述了在这里详细为生产矢状切片准备保留MEC的背腹的程度的过程。
关键步骤
卸下从动物大脑 。特别小心，以避免对大脑施加压力。这是比迅速清除大脑更重要。
切片。切片应牢固地粘在地板控股室。在vibratome应该有Z轴振动<2微米，并应与高振幅和?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢他们的支持以下内容：英国联邦奖学金委员会资助（惠普），EPSRC的（惠普），BBSRC的（最惠国待遇）和欧盟的玛丽·居里行动（最惠国）。
Materials
| Cutting ACSF(mM) | Standard ACSF(mM) | Internal solution (mM) | CASNumber | Supplier Catalogue Number | |
| NaCl | 86 | 124 | 7647-14-5 | Sigma S9888 | |
| NaH2PO4 | 1.2 | 1.2 | 13472-35-0 | Sigma 71505 | |
| KCl | 2.5 | 2.5 | 10 | 7447-40-7 | Sigma P3911 |
| NaHCO3 | 25 | 25 | 144-55-8 | Fischer S/4240 | |
| Glucose | 25 | 20 | 50-99-7 | Sigma G5767 | |
| Sucrose | 75 | 57-50-1 | Sigma S5016 | ||
| CaCl2 | 0.5 | 2 | 10043-52-4 | VWR 190464K | |
| MgCl2 | 7 | 1 | 2 | 7786-30-3 | Sigma 63020 |
| K Gluconate | 130 | 299-27-4 | Sigma G4500 | ||
| HEPES | 10 | 7365-45-9 | Sigma H3375 | ||
| EGTA | 0.1 | 67-42-5 | Sigma E4378 | ||
| Na2ATP | 2 | 34369-07-8 | Sigma A7699 | ||
| Na2GTP | 0.3 | 36051-31-7 | Sigma G8877 | ||
| NaPhospho-Creatine | 10 | 19333-65-4 | Sigma P7936 | ||
| Biocytin (optional) | 2.7 | 576-19-2 | Sigma B4261 |
Table 1. Cutting ACSF, standard ACSF and K-Gluconate internal solution recipes.
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