Do-It-Yourself Устройство для восстановления криоконсервированных образцов случайно уронил в криогенных резервуаров
Summary
Здесь мы представляем недорогой, прочный cryotolerant устройство для извлечения образца из танков Дьюара с жидким азотом. Простота конструкции и модульной конструкции устройство делает процесс извлечения образцов из криогенных баков простым и безопасным.
Abstract
Жидкий азот имеет цвета, запаха, очень холодной (-196 ° C) жидкость находится под давлением. Он широко используется в качестве криогенной жидкости для длительного хранения биологических материалов, таких как кровь, клетки и ткани 1,2. Криогенной природы жидкого азота, в то время как идеальный образец для сохранения, может привести к быстрому замораживанию живых тканей на контакт – известный как "криогенный ожог '2, что может привести к серьезным обморожения у людей тесно связаны с хранения и извлечения образцов из сосудов Дьюара. Кроме того, как жидкий азот испаряется она снижает концентрацию кислорода в воздухе и может привести к асфиксии, особенно в ограниченном пространстве 2.
В лабораториях, биологических образцов, часто хранятся в криопробирки или cryoboxes сложены из нержавеющей стали стойки в танках Дьюара 1. Эти стеллажи снабжены длинным валом коробки, чтобы предотвратить соскальзывание из стоек и в нижней частиДьюара при обычной работе. Слишком часто, однако, коробки или флаконы с драгоценными образцами выскользнуть и опускаются на дно жидкого азота заполнить бак. В таких случаях образцы могут быть получены после утомительного передачи жидкого азота в запасной контейнер или отбросить его. Коробки и флаконы могут быть относительно благополучно оправилась от опустели Дьюара. Тем не менее, криогенной природы жидкого азота и его расширение ставка составляет затонувших опасных извлечения образца. Это обычно рекомендованных безопасности офисов, что образец поиска никогда не будет осуществляться одним человеком. Другой альтернативой является использование коммерчески доступных прохладно видеозахвата или щипцы, чтобы вытащить флаконах 3. Тем не менее, ограниченная видимость в темной жидкости заполнены Дьюара представляет собой главное ограничение в их использовании.
В этой статье мы рассмотрим строительство DIY Cryotolerant поиск устройств, что делает поиск образца из Дюара с криогенных жидкостей и безопасноя просто.
Protocol
Discussion
Один из самых распространенных методов получения cryoboxes и криопробирки из нижней части емкости Дьюара является сцеживать жидкого азота в запасной контейнер и вытащите образцы, остающиеся в колбе или плавающие в сливают жидкий азот. Это, однако, опасное действие, которое может вызвать к?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
DIY криогенного извлечения устройства были протестированы в ходе проекта "Моделирование бактериальных prenylation белка в эукариотических клеток с помощью биоинформатики и молекулярные подходы", организованная Мария Луиза Эндрюс премии по исследованию рака программы, Вирджиния академии наук, "Физиологический смысл редактирование РНК в плазме дендритных клеток ", организованная Томас Ф. Джеффресс и Кейт Миллер Джеффресс мемориального треста и государственного контракта 16.740.11.0364 (Министерство науки и образования, Россия). Мы хотели бы поблагодарить Бет Нот за помощь в эксперименте целостности РНК.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge | Local Hardware shop | N/A | 1 unit required |
| Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw | Local Hardware shop | Model # 42281 | 4 units required |
| Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers | Local Hardware shop | Model # 20122 | 4 units required |
| Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut | Local Hardware shop | Model # 18512 | 4 units required |
| Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base | Local Hardware shop | Model # BC40Z | 2 units required |
| Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap | Local Hardware shop | Model # 66T | 1 unit required |
| Oneida 6″ Mesh Strainer | Local Grocery shop | Model # 7859W | 1 unit required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16 | Local Hardware shop | Model #:810509 | 6 units required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16 | Local Hardware shop | 4 units required | |
| Foam for insulation | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Screw Driver | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Pliers | Local Hardware shop | 1 unit required |
Referências
- Kittel, P. . Advances in Cryogenic Engineering. , 41 (1996).
- Edeskuty, F. J., Walter, F. . Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , (1996).
- Council, N. R. . Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Management of Chemical Hazards. , (2011).
- Muyal, J., Muyal, V., Kaistha, B., Seifart, C., Fehrenbach, H. Systematic comparison of RNA extraction techniques from frozen and fresh lung tissues: checkpoint towards gene expression studies. Diagnostic Pathology. 4, 9 (2009).
- Sambrook, J., Russell, D. W. . Molecular cloning: a laboratory manual. , (2001).
- Holland, N. T., Smith, M. T., Eskenazi, B., Bastaki, M. Biological sample collection and processing for molecular epidemiological studies. Mutation Research/Reviews in Mutation Research. 543, 217-234 (2003).
- Lynch, P. T. CELL, TISSUE AND ORGAN CULTURE | Storage and Cryopreservation. Encyclopedia of Rose Science. , 106-111 (2003).
- Crawford, R. J. . Plastics Engineering. , (1998).
- Gorenc, B., Tinyou, R., Syam, A. . Steel designers’ handbook. , (1996).
- Harper, C. A., Petrie, E. M. Plastics materials and processes: a concise encyclopedia. Wiley-Interscience. , (2003).
