Summary

विज़ुअलाइज़ेशन और यकृत microcirculation में रक्त और ऑक्सीजन की खपत के प्रवाह का विश्लेषण: एक तीव्र हेपेटाइटिस मॉडल के लिए आवेदन

Published: August 04, 2012
doi:

Summary

एक ऑप्टिकल प्रणाली FITC लेबल एरिथ्रोसाइट्स के साथ यकृत microcirculation और कल्पना, microvessels में लेजर सहायता phosphorimetry के साथ ऑक्सीजन की आंशिक दबाव मापने के लिए विकसित किया गया था. इस विधि के microvascular संरचना, व्यास, रक्त प्रवाह वेग, और ऑक्सीजन तनाव का विश्लेषण करके शारीरिक और रोग तंत्र की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

Abstract

जिगर में ऑक्सीजन की आपूर्ति और मांग के बीच एक काफी विसंगति है क्योंकि यकृत ऑक्सीजन की खपत अपेक्षाकृत उच्च है, लेकिन यकृत रक्त की आपूर्ति के बारे में 70% खराब पोर्टल शिरा जठरांत्र संबंधी मार्ग और तिल्ली से प्राप्त रक्त से oxygenated है. ऑक्सीजन रक्त पोर्टल शिरा के एक टर्मिनल शाखा से sinusoids के माध्यम से केंद्रीय venule बह द्वारा से hepatocytes करने के लिए दिया जाता है, और यह यकृत lobules में ऑक्सीजन ढाल बनाता है. ऑक्सीजन ढाल एक महत्वपूर्ण शारीरिक पैरामीटर है कि नदी के ऊपर और नीचे की ओर यकृत microcirculation में एंजाइमों की अभिव्यक्ति है, लेकिन यकृत microcirculation में ऑक्सीजन की खपत को मापने के लिए तकनीक की कमी के कारण जिगर में ऑक्सीजन चयापचय से संबंधित तंत्र की व्याख्या में देरी शामिल है. इसलिए हम FITC लेबल एरिथ्रोसाइट्स इस्तेमाल यकृत microcirculation कल्पना करने के लिए और लेजर सहायता phosphorimetry के इस्तेमाल किया microvessels में ऑक्सीजन की आंशिक दबाव को मापने. Noncontaसीटी और निरंतर ऑप्टिकल माप रक्त प्रवाह वेग, पोत व्यास, और ऑक्सीजन gradients के जिगर में ऑक्सीजन की खपत से संबंधित यों कर सकते हैं. एक तीव्र हैपेटाइटिस मॉडल में हम चूहों हम दोनों पोर्टल और केंद्रीय venules में वृद्धि हुई ऑक्सीजन का दबाव है लेकिन एक कम sinusoids में ऑक्सीजन ढाल मनाया एसिटामिनोफेन प्रशासन द्वारा किए गए, यह दर्शाता है कि hepatocyte परिगलन pericentral क्षेत्र में ऑक्सीजन दबाव बदलाव ऊपर और एंजाइम अभिव्यक्ति प्रभावित periportal क्षेत्र में. अंत में, हमारे यकृत hemodynamics और ऑक्सीजन की खपत को मापने के लिए ऑप्टिकल तरीकों यकृत रोग से संबंधित तंत्र प्रकट कर सकते हैं.

Protocol

1. Fluorescein आइसोथियोसाइनेट isomer मैं (FITC) के साथ लेबल एरिथ्रोसाइट्स सभी प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल हम इस्तेमाल Keio विश्वविद्यालय के स्कूल ऑफ मेडिसिन के पशु की देखभाल समिति द्वारा अनुमोदित किया गया. ए?…

Discussion

ऊतकों को ऑक्सीजन पहुंचाने के microcirculation का एक अनिवार्य भूमिका है, और पत्र की एक बहुत microvessel शरीर रचना और rheology 6 संबंधित रोगों का वर्णन है. जिगर रक्त प्रवाह धमनी और शिरापरक रक्त का एक संयोजन है. खून जिगर के प्र?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखक तकनीकी सहायता और मदद प्रयोगों के लिए सुश्री Risa ओत्सुका धन्यवाद. इस शोध आंशिक रूप से शिक्षा मंत्रालय, विज्ञान, खेल और संस्कृति के द्वारा समर्थित किया गया अनुदान सहायता में युवा वैज्ञानिकों (बी), 2010, 22,700,476, और के.टी. के लिए Suzuken मेमोरियल 2010 फाउंडेशन और इस अध्ययन के अनुसंधान और विकास द्वारा समर्थित किया गया के लिए रहते हैं बात है, और अगली पीढ़ी MEXT की सुपर परियोजना के विकास में इस्तेमाल की एक भाग, JST ERATO Suematsu गैस जीवविज्ञान परियोजना से भाग में और अगली पीढ़ी के एकीकृत सिमुलेशन.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Pd(II) meso-Tetra(4-carboxyphenyl)porphine Frontier Scientific, Inc. PdT790
Fluorescein isothiocyanate isomer I Sigma-Aldrich Co. F7250
Acetaminophen Sigma-Aldrich Co. A7085

Name of the equipment Company Catalogue number
      Equipment
photomultiplier tube hamamatsu photonics k.k H10722-20

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Citar este artigo
Tsukada, K., Suematsu, M. Visualization and Analysis of Blood Flow and Oxygen Consumption in Hepatic Microcirculation: Application to an Acute Hepatitis Model. J. Vis. Exp. (66), e3996, doi:10.3791/3996 (2012).

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