Ovariectomia e 17β-estradiol substituição em ratos e camundongos: uma demonstração visual

Summary

Ovariectomia e subsequente substituição do 17β-estradiol, por meio de cápsulas de silastic e Nutella perorai são demonstrados em ratos e ratinhos.

Abstract

Estrogens são uma família de hormonas sexuais femininos com um espectro excepcionalmente ampla de efeitos. Quando os ratos e ratinhos são utilizados na investigação estrogénio são vulgarmente ovariectomizados, a fim de ablação a produção da hormona rapidamente bicicleta, substituindo o exogenamente 17β-estradiol. Há, no entanto, a falta de consenso em relação a como a hormona deve ser administrada para se obter as concentrações séricas fisiológicas. Isto é crucial uma vez que o 17β-estradiol método nível / administração influencia profundamente os resultados experimentais ^1-3. Temos em uma série de estudos caracterizados os diferentes modos de administração 17β-estradiol, encontrando que as cápsulas subcutâneas silastic e por-oral Nutella porca creme-são superiores aos disponíveis comercialmente peletes de libertação lenta (produzido pela empresa Research Innovative da América) e injecções diárias, em termos de produção de fisiológicas concentrações séricas de 17β-estradiol ^4-6. Entre os advantages do método porca creme, que anteriormente foi utilizado para a administração da buprenorfina ^7, é que, quando utilizada para a administração estrogénio que se assemelha a terapia de substituição hormonal perorai e é não-invasivo. As cápsulas subcutâneas silastic são convenientes e produzir as concentrações mais estáveis ​​no soro. Este artigo contém vídeo passo-a-passo demonstrações de ovariectomia e 17β-estradiol reposição hormonal por cápsulas de silastic e Nutella via oral em ratos e camundongos, seguido por uma discussão de aspectos importantes dos procedimentos administrativos.

Protocol

1. Ovariectomia pela Rota Dorsal Anestesiar o animal, por exemplo, utilizando 1,5% de isoflurano (4% para a indução) em um óxido de oxigénio / nitroso 30% de mistura / 70%. Colocar o animal na posição de bruços em uma placa de aquecimento ligada a um termómetro rectal. É importante ter uma fina camada de isolamento entre o animal e da placa, e que o sistema de termómetro feed-back mantém a temperatura do corpo dentro de 37 ± 0,5 ° C. Aplicar gel de protecção dos olhos e administrar 5 mg de peso…

Discussion

As formas de administração apresentadas acima têm em estudos anteriores mostraram-se superiores a comerciais de libertação lenta e as injecções de peletes em termos de produção de fisiológicas concentrações séricas de 17β-estradiol. Enquanto pelotas liberação lenta produzir muito altas e prolongadas picos de concentração de soro, as injeções causam extremos, as flutuações hormonais diárias e exigem manuseio repetido estressante dos ^4-6 animais. A importância da escolha de modos de admi…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments
Rimadyl, 50 mg/mL	Pfizer	462986	Postoperative analgesia after ovariectomy.
Lubrithal eye gel	Leo Laboratories		Eye protection during surgery.
Jodopax vet	Pharmaxim		Surgery disinfection.
Vicryl 4-0 suture	Johnson & Johnson		Wound suture and ovary ligation.
17β-estradiol, >98%	Sigma	E8875-1G	In sesame oil for silastic capsules and Nutella.
Sesame oil	Sigma	S3547-1L	Dissolving the 17β-estradiol.
Silastic tubing, ID/OD: 1.575/3.175 mm	Dow Corning	508-008	Production of silastic capsules.
Wooden applicator stick	Selefatrade	12-0783	Capping of silastic capsules.
Nutella	Ferrero		Medium for peroral 17β-estradiol.