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Single Oocyte Bisulfite Mutagenesis

Mutagênese Bissulfito Único de ovócitos

DOI:
10.3791/4046-v

•

13:18 min

•

June 27, 2012

•

, ,
1Department of Obstretrics & Gynaecology,Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, 2Department of Biochemistry,Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, 3Children’s Health Research Institute

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:22Oocyte Collection
  • 03:09Agarose Embedding and Lysis
  • 04:41Bisulfite Mutagenesis
  • 07:00First and Second Round PCR Amplification
  • 09:09TA Cloning and Colony PCR
  • 10:31Results: Electrophoretic Analysis of Single Oocyte Bisulfite Mutagenesis
  • 12:40Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Mutagênese bissulfito é o padrão ouro para a análise de metilação do DNA. Nosso protocolo modificado permite a análise de metilação do DNA ao nível de uma única célula e foi projetado especificamente para oócitos individuais. Também pode ser utilizado para a clivagem do estágio-embriões.

Tags

Single Oocyte Bisulfite MutagenesisEpigeneticsChromatin ModificationsGene AccessibilityGene TranscriptionDNA MethylationRepressive MarkCpG DinucleotidesMethyl GroupRepressive ProteinsHistone ModificationsDevelopmental ProgrammingCell DifferentiationRetroviral ElementsX-chromosome InactivationGenomic ImprintingBisulfite MutagenesisSodium BisulfiteDeaminationUracilsPCR AmplificationSequencingConversion EventsThyminesMethylated CytosinesNucleotide LevelAgarose Bead

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