초음파 혈액 - 뇌 장벽 파괴 및 망간 향상된 MRI를 사용하여 기능성 Neuroimaging
Summary
기술은 광범위하게 microbubbles와 초음파를 사용하여 마우스의 혈액 – 뇌 장벽을 여는 대해 설명되어 있습니다. 이 기법을 사용하여, 망간은 마우스 뇌에 관리할 수 있습니다. 망간은 depolarized 뉴런에 축적 MRI 대비 에이전트이기 때문에, 이러한 방식의 연결 활동의 이미징을 가능하게합니다.
Abstract
생쥐는 신경 과학, 마우스의 기능 neuroimaging의 유전 및 분자 토대를 공부에 대한 지배적인 모델 시스템이지만 것은 기술적으로 도전 남아있다. 하나의 접근 방법, 정품 인증 유발 망간 향상된 MRI (AIM MRI)는 설치류 1-5에의 연결 활동을 매핑하는 데 성공적으로 사용되었습니다. AIM MRI에서는 MN 2 + 칼슘 아날로그를 역할을하고 depolarized 뉴런 6,7 년 쌓입니다. MN 2 + T 1 조직 속성을 단축하기 때문에 고가의 연결 활동 지역은 MRI로 향상됩니다. 또한, MN 2 + 활성화된 지역에서 서서히 걷히고 있으므로 자극이 큰 실험적인 유연성을 가능하게 사전 이미징에 자석 외부에서 수행할 수 있습니다. 다만, MN 2 + 즉시 특히 생쥐의 혈액 뇌 장벽 (BBB) BBB는 AIM MRI의 사용을 제한하고있다 열 필요성을, 교차하지 않기 때문에.
BBB를 열기위한 하나의 도구 ult입니다rasound. 위험성이 있지만 초음파는 가스입 microbubbles (즉, 초음파 대비 에이전트)과 함께 시행되는 경우, BBB 오프닝에 필요한 음향 압력은 상당히 낮습니다. 초음파 및 microbubbles의이 조합이 안정적으로 조직 손상 8-11를 일으키는없이 BBB을 여는 데 사용할 수 있습니다.
여기서 방법은 BBB를 엽니다 microbubbles와 초음파를 이용하여 MRI AIM 수행을 위해 제공됩니다. perflutren의 microbubbles의 정맥 주사 후, 산만 펄스 초음파 빔는 3 분 동안 면도 마우스 머리에 적용됩니다. 단순 위해서는 Microbubbles 및 BOMUS 12 등 초음파와 BBB 영업이 기법을 참조하십시오. 양쪽 대뇌 반구에 걸쳐 BBB를 엽니다 BOMUS를 사용하여 망간은 전체 마우스 두뇌로 관리합니다. 가볍게 좀 진정 생쥐의 실험 자극 후, AIM MRI가의 연결 응답을 매핑하는 데 사용됩니다.
에이 접근법을 보여주는, 여기 BOMUS 및 AIM MRI도 13 가볍게 마취 생쥐의 vibrissae의 일방적인 기계적 자극을 매핑하는 데 사용됩니다. BOMUS 양쪽 반구에 걸쳐 BBB를 열 수 있기 때문에 뇌의 unstimulated 측면은 특이 현상이 배경 자극에 대해 제어하는 데 사용됩니다. 결과 3D 활성화지도 총신 분야 피질 14 vibrissae 지역의 출판 표현과 잘 동의한다. BBB의 초음파 개통은 빠른 비침 투, 그리고 가역입니다; 때문에 이러한 방식은 깨어있는 생쥐의 높은 처리량 및 / 또는 종단 연구에 적합합니다.
Protocol
Discussion
여기 방법 noninvasively 초음파 및 microbubbles (BOMUS)로 전체 마우스 뇌 전체에 BBB를 열기 위해 제시되었다. BBB 오픈과 함께, MN 2 + 투여되었으며 활성화 유발 망간 향상된 MRI는 (AIM MRI) 가볍게 진정제를 생쥐의 짧은 기간 동안의 자극에 대한 이미지의 연결 응답에 사용되었다.
적절한 BBB 오프닝은 0.36 MPA의 피크 – 부정적인 음향 압력으로 실현됐다. 참고 이것은 초음파 빔의 ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
모든 작품은 VIVO 현미경에 대한 공작 센터, NIH / NIBIB에서 수행되었다 국립 바이오 메디컬 기술 리소스 센터 (P41 EB015897)와 NCI 작은 동물 이미징 자원 프로그램 (U24 CA092656). 추가 지원은 NSF 대학원 연구 원정 (2,003,014,921)에서 제공했습니다.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalog number | Comments |
| Hydrophone | Sonora Medical Systems, Longmont, CA | SN S4-251 | |
| Translation stage | Newport Corporation, Irvine, CA | ||
| Ultrasound transducer | Olympus NDT, Inc., Waltham MA | A306S-SU | Review the manufacturer’s test sheet that accompanies the transducer to find the exact center frequency of that particular transducer, which may differ from the nominal frequency listed in the catalog. (e.g., the nominal frequency of our transducer was 2.25 MHz, but the actual center frequency was 2.15 MHz.) |
| Vevo Imaging Station | VisualSonics, Inc. Toronto, Canada | ||
| 50 dB power amplifier | E&I, Rochester, NY | model 240L | |
| Signal generator | Agilent Technologies, Santa Clara, CA | model 33220A | |
| MnCl2-(H2O)4 | Sigma | Molecular weight varies by batch, call manufacturer for exact measurement | |
| Perflutren lipid microspheres | Lantheus Medical Imaging, N. Billerica, MA | DEFINITY | |
| Microsphere agitator | Lantheus Medical Imaging, N. Billerica, MA | VIALMIX | |
| MR imaging coil | m2m Imaging Corp., Hillcrest, OH | 35 mm diameter quadrature transmit/receive volume coil | |
| MRI system | GE Healthcare, Milwaukee, WI | GE EXCITE console operating a 7-T horizontal bore magnet | |
| Image analysis environment | Visage Imaging, San Diego, CA, MathWorks, Natick MA | Amira MATLAB |
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