A coloração imuno-histoquímica de B7-H1 (PD-L1) na histológicos em parafina lâminas de tecido adenocarcinoma do pâncreas

Elaine Bigelow; Katherine M. Bever; Haiying Xu; Allison Yager; Annie Wu; Janis Taube; Lieping Chen; Elizabeth M. Jaffee; Robert A. Anders; Lei Zheng

doi:10.3791/4059

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Artigo de método

A coloração imuno-histoquímica de B7-H1 (PD-L1) na histológicos em parafina lâminas de tecido adenocarcinoma do pâncreas

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DOI:

10.3791/4059

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3 de janeiro de 2013

Elaine Bigelow¹^,² , Katherine M. Bever¹^,² , Haiying Xu¹^,²^,³ , Allison Yager¹ , Annie Wu¹^,²^,⁴ , Janis Taube³^,⁵ , Lieping Chen⁶ , Elizabeth M. Jaffee¹^,²^,⁵^,⁷^,⁸ , Robert A. Anders¹^,²^,⁵^,⁸ , Lei Zheng¹^,²^,⁴^,⁵^,⁷

¹The Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ²Department of Oncology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ³Department of Dermatology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁴Department of Surgery, Johns Hopkins University School of Medicine, ⁵The Sol Goldman Pancreatic Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁶Yale Cancer Center, Yale School of Medicine, ⁷The Skip Viragh Center for Pancreatic Cancer, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁸Department of Pathology, The Johns Hopkins University School of Medicine

Neste artigo

Resumo

B7-H1 (PD-L1) e a sua ligação ao PD-1 fornece um sinal induzida por tumor principal imunossupressor no microambiente do tumor. Uma técnica de coloração imuno-histoquímica para caracterizar a expressão e localização de B7-H1 em adenocarcinoma pancreático é descrito aqui.

Resumo

B7-H1/PD-L1, um membro da família B7 de imuno-regulação de superfície celular de proteínas, tem um papel importante na regulação negativa de respostas mediadas por células imunitárias através da sua interacção com o seu receptor, a morte programada-1 (DP -1) ^1,2. A sobre-expressão de B7-H1 por células tumorais foi observado em vários cancros humanos, incluindo o melanoma, glioblastoma, e carcinomas do pulmão, mama, cólon, ovário e células renais, e tem sido mostrado para danificar anti-tumorais T- imunidade celular ^3-8.

Recentemente, a expressão B7-H1 por tecidos de adenocarcinoma do pâncreas foi identificado como um potencial marcador de prognóstico ^9,10. Além disso, o bloqueio de B7-H1, em um modelo de rato de cancro pancreático foi mostrado para produzir uma resposta anti-tumor ^11. Estes dados sugerem a importância de B7-H1 como um potencial alvo terapêutico. Anticorpos anti-B7-H1 bloqueio são, portanto, está sendo testado em ensaios clínicos para multiple tumores sólidos humanos, incluindo melanoma e cancros do pulmão, do cólon, estômago, rim e pâncreas ^12.

A fim de, eventualmente, ser capaz de identificar os doentes que irão beneficiar de B7-H1 terapias com alvo, é crítico para investigar a correlação entre a expressão e localização de B7-H1 e a resposta do paciente ao tratamento com os anticorpos B7-H1 bloqueio. Examinando a expressão de B7-H1 em tecidos pancreáticos humanos através de adenocarcinoma imunohistoquímica dará um melhor entendimento de como esta molécula de sinalização co-inibidor contribui para a supressão da imunidade antitumoral em microambiente do tumor. O anticorpo anti-B7-H1 monoclonal (clone 5H1), desenvolvido por Chen e colaboradores demonstrou produzir resultados fiáveis em criocortes de coloração de vários tipos de tecidos neoplásicos humanos ^4,8, mas a coloração de lâminas embebidas em parafina tinha sido um desafio até Recentemente, ^13-18. Temos devfugiu do protocolo de coloração B7-H1 para os slides incluídos em parafina de tecidos de adenocarcinoma do pâncreas. O protocolo de coloração B7-H1 descrito aqui produz a coloração das membranas e citoplasmática consistente de B7-H1 com pouco fundo.

Protocolo

Recentemente, a expressão B7-H1 por tecidos de adenocarcinoma do pâncreas foi identificado como um....