Summary

Utbildning en sofistikerad mikrokirurgisk teknik: mellanliggande yttre halsvenen Graft i den gemensamma halspulsådern i råttor

Published: November 11, 2012
doi:

Summary

Neointimal hyperplasi är den främsta orsaken till stenos i arterialized vener. Vi föreslår ett nytt protokoll varigenom den högra yttre jugularvenen ympas med manschetten tekniken i den gemensamma halsartären i Sprague Dawley-råttor. Överlevnaden var 100% vid tidpunkten för avlivning.

Abstract

Neointimal hyperplasi är en de främsta orsakerna till stenos i arterialized vener som är av stor betydelse i arteriell koronar bypass-kirurgi, perifer arteriell bypass-kirurgi samt arteriovenösa fistlar. 1-5 den experimentella proceduren för ventransplantat däremellan i den gemensamma halsartären genom att använda manschetten-tekniken har använts i flera forskningsprojekt för att undersöka etiologi av neointimal hyperplasi och terapeutiska alternativ för att ta itu med det. 6-8 Manschetten hindrar fartyget anastomotisk ombyggnad och inducerar turbulens inom transplantatet och därmed utvecklingen av neointimal hyperplasi.

Använda den överlägsna cava ventransplantat är en etablerad liten djurmodell för venös arterialization experiment. 9-11 Denna nuvarande protokollet hänvisar till en etablerad halsvenen transplantat mellanliggande som först beskrivits av Zou et al. 9 samt andra. 12-14 </sup> Trots dessa citerade små djur protokoll komplicerat.

För att förenkla förfarandet och minimera antalet experimentella behövs djur en detaljerad operation protokoll genom video utbildning presenteras. Denna video bör hjälpa nybörjare kirurgen att lära sig både manschetten-tekniken och ventransplantat däremellan. Härigenom har den högra yttre jugularvenen ympad i manschetten-teknik i den gemensamma halsartären av 21 Sprague Dawley-råttor kategoriseras i tre lika stora grupper som offrades på dag 21, 42 och 84, respektive. Noterbart inga donatordjur behövs eftersom auto-transplantationer utfördes. Överlevnaden var 100% vid tidpunkten för avlivning. Dessutom, var transplantatet patency ränta 60% under de första 10 manövrerade djur och 82% för de återstående 11 djuren. Blodflödet vid tidpunkten för avlivning var 8 ± 3 ml / min. Sammanfattningsvis detta kirurgiska protokoll avsevärt förenklar, optimerar och standardiserar denna complicated förfarande. Det ger nybörjare kirurger enkla steg-för-steg instruktion, förklarar eventuella fallgropar, vilket hjälper dem att få kunskap snabbt och undvika onödigt offer försöksdjur.

Protocol

1. Försöksdjur Skaffa en lokal etisk kommitté godkännande för alla experiment som ska utföras i enlighet med de FELASA djurskydd riktlinjer. Använd Sprague-Dawley tillgängliga att köpa från någon kommersiell uppfödare (t.ex. Charles River Wiga GmbH, Sulzfeld, Tyskland). Vi använde 21 djur uppdelade i tre grupper om 7 djur vardera som avlivades vid 3, 6 och 12 veckor efter operationen. Vid tidpunkten för köpet, måste djuren vara 12 veckors ålder och väger 250-300 g.. <…

Discussion

Anbringa en yttre jugularvenen transplantat i den gemensamma halsartären är en sofistikerad teknik mikrokirurgi. Denna video hjälper nybörjare kirurgen behärska denna teknik på kortast möjliga tid med ett lägre slöseri med försöksdjur.

Inhalativ anestesi är det bästa alternativet för denna operation, eftersom den undviker en alltför djup anestesi skede kan kontrolleras väl och tillåter kirurgen tillräckligt med tid för att fungera. Dessutom råttan är en experimentell dju…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Denna studie har finansierats av forskningen för främjande "START" av den medicinska fakulteten RWTH Aachen University, Tyskland (Titel: "Die Arterialisation venöser Gefäße" START 690.753). Vi vill tacka Mary-Joan Blümich för hennes utmärkta redigering hjälp.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Braided Silk black 7-0 Ethicon Products 892100
Vicryl 3-0 Ethicon Products J285G
Vicryl 4-0 Ethicon Products J284G
Portex non sterile nylon tubing 0.75 mm, 0.94 mm Fine-Bore Polyethylene (Polythene) Tubing Portex UK 800/200/175/100
Isofluorane 5 % Any genericon
Heparin Any genericon
0.9% saline Any genericon
Buprenorphine Any genericon

Referências

  1. Motwani, J. G., Topol, E. J. Aortocoronary saphenous vein graft disease: Pathogenesis, Predisposition, and Prevention. Circulation. 97, 916-931 (1998).
  2. Bonatti, J., Oberhuber, A., Schachner, T., Zou, Y., Hammerer-Lercher, A., Mittermair, R., Laufer, G. Neointimal hyperplasia in coronary vein grafts: Pathophysiology and prevention of a significant clinical problem. The Heart Surg. , E72-E87 (2004).
  3. Roy-Chaudhury, P., Kelly, B. S., Zhang, J., Narayana, A., Desai, P., Melhem, M., Duncan, H., Heffelfinger, S. C. Hemodialysis Vascular Access Dysfunction: From Pathophysiology to Novel Therapies. Blood Purif. 21, 99-110 (2003).
  4. Dixon, B. S. Why don’t fistulas mature. Kidney Int. 70, 1413-1422 (2006).
  5. Newby, A. C., Zaltsman, A. B. Molecular mechanisms in intimal hyperplasia. J. Pathol. 190, 300-309 (2000).
  6. Schachner, T., Heiss, S., Zipponi, D., Tzankov, A. Perivascular treatment with azathioprine reduces neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Heart Surg. 9, E515-E517 (2006).
  7. Zhang, L., Sivashanmugam, P., Wu, J. H., Brian, L., Exum, S. T., Freedman, N. J., Peppel, K. Tumor necrosis factor receptor-2 signaling attenuates vein graft neointima formation by promoting endothelial recovery. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 28, 284-289 (2008).
  8. Tzankov, A., Mairinger, T., Laufer, G., Bonatti, J. O. Local application of rapamycin inhibits neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Ann. Thorac. Surg. 77, 1580-1585 (2004).
  9. Zou, Y., Dietrich, H., Hu, Y., Metzler, B., Wick, G., Xu, Q. Mouse Model of Venous bypass graft arteriosclerosis. A.J.P. 153, 1301-1310 (1998).
  10. Schachner, T., Oberhuber, A., Zou, Y., Tzankov, A., Ott, H., Laufer, G., Bonatti, J. Rapamycin treatment is associated with an increased apoptosis rate in experimental vein grafts. Eur. J. Cardiothorac. Surg. 27, 302-306 (2005).
  11. Ali, Z., Bursill, C., Hu, Y., Choudhury, R. P., Xu, Q., Greaves, D. R., Channon, K. M. Gene transfer of a broad spectrum CC-chemokine inhibitor reduces vein graft atherosclerosis in apolipoprotein E-knockout mice. Circulation. 30, 1235-1241 (2005).
  12. Zou, J., Zhang, X., Yang, H., Zhu, Y., Ma, H., Wang, S. Rapamycin-loaded nanoparticles for inhibition of neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Ann. Vasc. Surg. 25, 538-546 (2011).
  13. Wang, J., Liu, K., Shen, L., Wu, H., Jing, H. Small interfering RNA to c-myc inhibits vein graft restenosis in a rat vein graft model. J. Surg. Res. 169, e85-e91 (2011).
  14. Schachner, T., Zou, Y., Oberhuber, A., Mairinger, T., Tzankov, A., Laufer, G., Ott, H., Bonatti, J. Perivascular application of C-type natriuretic peptide attenuates neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Eur. J. Cardiothorac. Surg. 25, 585-590 (2004).
  15. Thomas, A. C., Newby, A. C. Effect of matrix metalloproteinase-9 knockout on vein graft remodelling in mice. J. Vasc. Res. 47, 299-308 (2010).
check_url/pt/4124?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Schleimer, K., Grommes, J., Greiner, A., Jalaie, H., Kalder, J., Langer, S., Koeppel, T. A., Jacobs, M., Kokozidou, M. Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats. J. Vis. Exp. (69), e4124, doi:10.3791/4124 (2012).

View Video