Summary

Denne januar i Jove

Published: January 02, 2012
doi:

Summary

Abstract

The Journal of visualiseres Experiments (Jove) begynner 2012 med å publisere sin 1500th artikkelen, som fokuserer på en metode for analyse av frie radikaler sammensetningen av sigarettrøyk. Selv om tobakk tjære er antatt å være den mest kreftfremkallende agent i sigarettrøyk, er frie radikaler godt kjente kreftfremkallende molekyler, og nivået på disse kreftfremkallende stoffer som finnes i sigarettrøyk er foreløpig ikke kjent. Metoden brukt i denne artikkelen kombinerer bruk av en enkelt-port røyking enhet, som simulerer sigarett puffing, med elektron spinn resonans (ESR) spektroskopi, en teknikk som måler spinne energien slippes ut av uparede elektroner i frie radikaler. En viktig modifikasjon av én port røyking enhet som brukes i denne artikkelen, er innføringen av et flytende nitrogen felle foran spin fellen. Flytende nitrogen fjerner vanndamp fra sigarettrøyk og forbedrer ESR spektra som resultat.

I tillegg tilmåling av frie radikaler konsentrasjon finnes i sigarettrøyk, blir plante antioksidanter innført i endret sigarett filter og ESR spektra av sigarettrøyk gått gjennom disse filtrene er oppnådd. Druefrøekstrakt og lykopen ble observert å ha de mest betydningsfulle scavenging effekt på frie radikaler, og hvis kostnadseffektiv måte å inkludere disse molekylene i sigarett filter kan utvikles, kan en mindre skadelig sigarett bli opprettet.

I klinisk og translasjonell medisin, presenterer Jove en analytisk metode for å bestemme de lokale Gyrification Index (LGI) – et mål på omfanget av kortikale folding. Kortikale bretter utvikle seg i løpet av de første få postnatal måneder, og uønskede hendelser i løpet av denne tiden kan føre til avvik i hjernens overflate anatomi, som kan til slutt korrelerer med nevropsykiatriske lidelser.

Analysen verktøy utviklet for å beregne lokale Gyrification Index er Freesurfer, som kan konvertere T1 vektet MRI skanner inn 3D rekonstruksjoner av hjernebarken. Separate rekonstruksjoner er skapt for de grå / hvit mater og grå / pial grensesnitt, som justeres manuelt før computating den LGI. Etter en glatting operasjon, er sirkulære regioner i pial og grå / hvite flater forhold, for å beregne LGI for tusenvis av punkter over hele hjernen. Freesurfer gjør analyse av gyrification enkle og tilgjengelige for klinikere og hjerneforskere, som er interessert i å sammenligne omfanget av kortikale folding mellom ulike individer i normal og sykdom stater.

Jove er Immunologi og infeksjonsbiologi artikkel for januar måned fortsetter tidsskriftets tradisjon for publisering cutting edge metodikk i vektor født sykdom forskning. Konkret legger denne artikkelen til Jove omfattende samling av protokoller for malaria forskning ved å utvide vårt bibliotek til cerebral malaria – en ødeleggendetilstand med høy følsomhet hos barn. Kort fortalt innebærer denne protokollen utsette en monolayer av menneskelige hjerne endotelceller, passaged på petriskåler, til plasmodium falciparum-infiserte røde blodceller. Etter vask og berikende trinn, kan høy avkastning av parasitter, som bærer potensialet til å infisere hjernen, bli isolert og ytterligere karakterisert.

I Neuroscience, viser Jove en metode for å studere migrering av neural crest cellene. Disse cellene er en forbigående, multipotent, utviklingsmessige celletype som kan, i tillegg til å bli neuronal vev, differensieres til glatt muskulatur, chromaffin celler, cartiliage og bein. Kyllingembryo er nøye forberedt, slik at stammen regionen kan bli isolert og nevralrøret excised for overnight kultur på fibronektin-belagt Dekkglass, som lar neural crest cellene å emigrere fra nevralrøret. Etter fjerning av nevralrøret, Dekkglass inneholder dyrkede neural crest celleneoverføres til en modifisert Zigmond kammer – et kammer som muliggjør en konsentrasjonsgradient av mulige kjemotaktisk agent for å bli etablert på tvers av kultur. Timelapes bildebehandling etterfulgt av analyse av celle baner, brukes til å vurdere kjemotaktisk potensialet av molekyler lastet inn i zigmund kammer, og gir innsikt i de molekylære signaler som styrer migrering av denne viktige utviklingsforstyrrelser celletype.

Disse inneholdt artikler består av fire av femti video-protokoller for utgivelse i januar. Andre bemerkelsesverdige artikler omfatter metoder for å visualisere cuticle strukturer c. elegans, termisk avbildning av forsinket utbruddet stølhet, dyrking av ventrale midthjernen i organotypic skiver, og inducing åreforkalkning i mus.

Protocol

Selection of Plasmodium falciparum Parasites for Cytoadhesion to Human Brain Endothelial Cells Antoine Claessens, J. Alexandra RoweCentre for Immunity, Infection and Evolution, University of Edinburgh An in vitro model for cerebral malaria sequestration is described1. Plasmodium falciparum infected red blood cells are selected for binding to immortalized human brain microvascular endothelial cells. The selected parasites show a distinct phenotype. The selection process can be applied using various P. falciparum strains and endothelial cell lines. Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice Michael T. Kuhlmann1, Simon Cuhlmann2, 3, Irmgard Hoppe1, Rob Krams3, Paul C. Evans2, Gustav J. Strijkers4, Klaas Nicolay4, Sven Hermann1, Michael Schäfers11European Institute for Molecular Imaging, Westfälische Wilhelms-University Münster, 2British Heart Foundation Cardiovascular Sciences Unit, Imperial College London , 3Department of Bioengineering, Imperial College London , 4Biomedical Engineering, Eindhoven University of Technology The constricting cuff presented in this article is designed to induce atherosclerosis in the murine common carotid artery. Due to the conical shape of its inner lumen the implanted cuff generates well-defined regions of low, high and oscillatory shear stress triggering the development of atherosclerotic lesions of different inflammatory phenotypes. Analysis of Trunk Neural Crest Cell Migration using a Modified Zigmond Chamber Assay Christopher C. Walheim1, Juan Pablo Zanin2, Maria Elena de Bellard11Department of Biology, California State University, Northridge, 2Centro de Biología Celular y Molecular, Universidad Nacional de Córdoba An approach to analyze the migration of explanted cells (trunk neural crest cells) is described. This method is inexpensive, gentle, and capable of distinguishing chemotaxis from both chemokinesis and other influences on migratory polarity such as those derived from cell-cell interactions within the primary trunk neural crest cell culture. Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro Gabriela Oana Bodea, Sandra BlaessInstitute of Reconstructive Neurobiology, University of Bonn A method to generate organotypic slices from the E12.5 murine embryonic midbrain is described. The organotypic slice cultures can be used to observe the behavior of dopaminergic neurons or other ventral midbrain neurons. Visualization of Caenorhabditis elegans Cuticle Structures using the Lipophilic Vital Dye, DiI Robbie D. Schultz1, 2, Tina L. Gumienny21Department of Molecular and Cellular Medicine, Texas A&M University System Health Science Center, 2Department of Molecular and Cellular Medicine, Texas A&M University System Health Science Center, College of Medicine We present a method to visualize cuticle in live C. elegans using the red fluorescent lipophilic dye DiI (1,1′-dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate), which is commonly used in C. elegans to visualize environmentally exposed neurons. With this optimized protocol, alae and annular cuticular structures are stained by DiI and observed using compound microscopy. A Protocol for Detecting and Scavenging Gas-phase Free Radicals in Mainstream Cigarette Smoke Long-Xi Yu1, Boris G. Dzikovski2, Jack H. Freed3, 21CDCF-AOX Lab, 2National Biomedical Center for Advanced ESR Technology (ACERT), Department of Chemistry and Chemical Biology, Cornell University, 3ACERT Research, Center Department of Chemistry and Chemical Biology, Baker Laboratory, Cornell University Spin-trapping ESR spectroscopy was used to study the effect of plant antioxidants lycopene, pycnogenol and grape seed extract on scavenging gas-phase free radicals in cigarette smoke. How to Measure Cortical Folding from MR Images: A Step-by-step Tutorial to Compute Local Gyrification Index Marie Schaer1, Meritxell Bach Cuadra2, 3, Nick Schmansky4, Bruce Fischl4, Jean-Philippe Thiran2, Stephan Eliez11Department of Psychiatry, University of Geneva School of Medicine, 2Signal Processing Laboratory, École Polytechnique Fédérale de Lausanne, 3Department of Radiology, University Hospital Center and University of Lausanne, 4Athinoula A. Martinos Center for Biomedical Imaging, Massachusetts General Hospital Measuring gyrification (cortical folding) at any age represents a window into early brain development. Hence, we previously developed an algorithm to measure local gyrification at thousands of points over the hemisphere1. In this paper, we detail the computation of this local gyrification index. The Use of Thermal Infra-Red Imaging to Detect Delayed Onset Muscle Soreness Hani H. Al-Nakhli1, Jerrold S. Petrofsky1, 2, Michael S. Laymon2, Lee S. Berk11Loma Linda University, 2Azusa Pacific University The purpose of this investigation was to assess whether using an infra-red thermal camera is a valid tool for detecting and quantifying the muscle soreness after exercising.

Tags

Play Video

Citar este artigo
Kolski-Andreaco, A. January 2012: This Month in JoVE. J. Vis. Exp. (59), e4194, doi:10.3791/4194 (2012).

View Video