הקמת מודל orthotopic גידול בשלפוחית השתן להעריך את ההשפעות נוגדות הגידולים של סרנה נמסר intravesically וצמיחה ניטור הגידול והדמיה על ידי אולטרסאונד bioluminescent.
Abstract
אנו מציגים שיטה חדשה לטיפול בסרטן שלפוחית השתן עם מסירת intravesically הפעלת RNA קטן (סרנה) בשנת המודל orthotopic העכבר xenograft שלפוחית השתן הגידול. מודל העכבר הוא הוקם על ידי צנתור השופכה בשאיפה תחת הרדמה מלאה. כוויה כימית הוא הציג אז את רירית שלפוחית השתן באמצעות פתרון השלפוחית כסף חנקתי לשבש את שכבת glycosaminoglycan שלפוחית השתן מאפשר לתאים לצרף. אחרי כמה שטיפות עם מים סטריליים, סרטן שלפוחית השתן האנושית KU-7-luc2-GFP תאים החדירו דרך קטטר לתוך שלפוחית השתן להתעכב במשך 2 שעות. לאחר צמיחה של גידולים בשלפוחית השתן הוא אישר ומפוקחים על ידי אולטרסאונד שלפוחית השתן vivo והדמיה bioluminescent. הגידולים מטופלים אז intravesically עם סרנה נוסח חלקיקים שומנים בדם (LNPs). הגידול מנוטר עם אולטרסאונד ביולומינציה. כל השלבים של התהליך הזה הם הפגינו בסרטון המצורף.
Protocol
הנהלים הקשורים בנושאים בעלי חיים אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדי ועדת שימוש (IACUC) באוניברסיטת קליפורניה בסן פרנסיסקו. 1. תא הכנה שלפוחית השתן האנושית סרטן תאים קו KU-7-luc2-GFP (Cali…
Discussion
אנו מציגים פרוטוקול להקמת מודל orthotopic העכבר xenograft גידול בשלפוחית השתן בעקבות הטיפול השלפוחית של גידולים עם סרנה LNP ניסח שמכוונת את האמרגן של p21 CIP1/WAF1 (p21) להפעלה תעתיק. 2, 3 גידולים כתוצאה יכול להיות אישר פיקוח עם הדמיה bioluminescent ו אולטרסאונד שלפוחית ה?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מחקר זה מומן על ידי הנרי AACR סרטן שלפוחית השתן שפרד מענק מחקר (09-60-30-LI).
Kang, M. R., Yang, G., Charisse, K., Epstein-Barash, H., Manoharan, M., Li, L. An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment. J. Vis. Exp. (65), e4207, doi:10.3791/4207 (2012).