文化与偏振刺激人体肠道黏膜植的新方法
Summary
我们引入了一种新的方法，为维护人类文化和监测至少24小时应对各类刺激肠黏膜。有了我们的方法中，维持组织的极性，可用于生理刺激通过心尖路由。
Abstract
目前很少有车型存在，逼真地模拟复杂的人类肠道内的微环境，在那里发生的各种相互作用。适当的稳态直接取决于这些相互作用的，因为它们形成整个的免疫反应对食物抗原诱导免疫耐受，而在同一时间对意外地与食物摄入的病原微生物的有效的免疫反应。
肠道动态平衡也被保留通过各种微生物（包括食品相关的有益的细菌菌株）和主机，调节附件/降解粘液之间复杂的相互作用，生产抗菌肽上皮屏障，而“教育”上皮细胞表型独特，肠道居民淋巴细胞人口控制的耐受性或免疫原性。这些相互作用到目前为止已经很难复制的体外实验可以使用培养的细胞系或外周血单核细胞。此外，小鼠模型显着不同的元件相对于人体肠道对肠粘膜（粘液层的组织，共生细菌群落）。因此在诊所被带到重要的压力相关的或病理情况下，如肠易激综合征，炎性肠病或结直肠癌的治疗方法有多种，研究一直难以开展。
为了解决这些问题，我们开发了一种新的系统，使我们能够刺激人体肠道黏膜植保留其在原位空调主机菌群和免疫反应，极化方式。偏振光根尖刺激引起的免疫反应的结果，非常重要的。已经一再证明，相同的刺激，可以产生完全不同的反应，当他们绕过心尖面对肠道外延thelium basolaterally或刺激上皮细胞进入固有层组件的直接接触，切换从耐受性表型的免疫原性，并在区域造成不必要的过度的炎症反应。
通过胶粘的分隔的区域的顶端面的粘膜刺激对将要描述在协议中的一个洞穴缸实现极化刺激。我们用这个模型来考察，其中包括三个不同的乳酸杆菌菌株的不同影响。我们发现，这个模型系统评估益生菌的免疫调节特性，在健康和疾病的情况下是非常强大的。
Protocol
Representative Results
Discussion
需要有关生理模型人体肠道黏膜上的治疗方法，可以有效地测试一直很重视。许多研究人员已经发现在两种细胞和小鼠模型6迄今所使用为该目的而潜在的工件和缺陷。事实上，即使有前途的临床前数据往往是获得，这些很少转化为显着的临床益处。
在这项工作中所描述的方法，提出了一个相对简单的，但有效的，新颖的适应人体肠道粘膜偏振方式的外植体的培养和?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢埃里卡Mileti，优异的技术支持和安东尼奥·SABATINO博士提供氧舱。
资金来源 ：本工作得到补助从欧盟第七框架计划（IBDase ERC：Dendroworld），和基金会Cariplo的MR和支持居里夫人国际培训移动网络（相声，赠款协议编号：21553-2） KT。
Materials
| Regeant | Company | Catalog No. | |
| Reagents | |||
| 10X HBSS | Eurocalne | ECM4006XL | |
| Peni/Strepto | Lonza | DE17602E | |
| Gentamycin | Gibco | 15750-037 | |
| DMEM | Lonza | BE12614 | |
| FBS-Na | Gibco | 16000-044 | |
| 100X ITS-X | Gibco | 51500-056 | |
| EGF | Tebu-bio | 100-15 | |
| L-Glutamine | Lonza | BE17605E | |
| Non essential aminoacids 100X | Gibco | 11140-035 | |
| NaPyr | Gibco | 11360-039 | |
| Materials | |||
| Cloning cylinders 6×8 mm | BellCo | 2090-00608 | |
| Cloning cylinders 8×8 mm | BellCo | 2090-0080 | |
| Cloning cylinders 10×10 mm | BellCo | 2090-01010 | |
| Metal grids | Home made | ||
| Centre well organ culture plate | BD Falcon | 353037 | |
| Surgical glue (Vetbond) | 3M | 1469SB | |
| Oxygen Jars | Home made | ||
| Oxygen tanks | Air Liquid Sanità |
Referências
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