מנהל אפי של Therapeutics CNS לעכברי Awake
Summary
שיטת intranasally מנת להחדיר תרופות לעכברים ערים לצורך מיקוד המוח מתוארת. שיטה זו מאפשרת למינון חוזר לאורך תקופות ארוכות באמצעות ממשל אפי של תרופה ללא הרדמה, ומשלוח אף למוח עם חשיפה מינימאלית מערכתית.
Abstract
אפי ממשל הוא שיטה של מתן סוכנים טיפוליים למערכת העצבים המרכזית (CNS). זה אינו פולשני ומאפשר מולקולות גדולות שאינו חוצות את גישת מחסום דם המוח למערכת העצבים המרכזיים. תרופות ממוקדות ישירות למערכת העצבים המרכזיים עם משלוח אפי, הפחתת חשיפה מערכתית ותופעות לוואי מערכתיות ובכך לא רצויות 1. משלוח מהאף למערכת העצבים המרכזיים מתרחש בתוך דקות לאורך שני המסלולים העצביים הריח וtrigeminal באמצעות מסלול תאי ואינו דורש תרופה להיקשר לכל קולט או תחבורת אקסונלית 2. משלוח אפי הוא שיטה זכתה לפרסום נרחב, וכיום הוא משמש בניסויים קליניים בבני אדם 3.
משלוח אפי של תרופות במודלים של בעלי חיים מאפשר הערכה ראשונית של הפצה ויעילות פרמוקוקינטיים. בעכברים, ניתן להחדיר תרופות לבעלי חיים ערים (לא מורדם) על בסיס קבוע באמצעות specialized אחיזה אפי. משלוח ער מועיל משום שהוא מאפשר למינון כרוני לטווח ארוך ללא הרדמה, זה לוקח פחות זמן מאשר עם הרדמה, וניתן ללמוד ונעשה על ידי אנשים רבים, כך שצוותות של טכנאים מספרים גדולים יכולים מינון של עכברים בפרקי זמן קצרים. יעילות של תרופות מנוהלות intranasally בדרך זו לעכברים הודגמה במספר המחקרים כוללים אינסולין במודלים של עכברים סוכרתיים 4-6 וdeferoxamine מודלי עכבר אלצהיימר. 7,8
האחיזה אפי לעכברים ניתן ללמוד, אבל זה לא קל ודורשת תרגול, מיומנות, ואחיזה מדויקת בצורה יעילה כדי לספק תרופות למוח ולהימנע מניקוז לריאות וקיבה. עכברים הם מרוסנים בעבודת יד בעורף שונה ביד הלא הדומיננטית בצוואר שהתקיים במקביל לרצפה, ואילו סמים מועברים עם pipettor שימוש ביד הדומיננטית. בדרך כלל לוקח 3-4 שבועות של הסתגלות לטיפול לפני העכבריםניתן לערוך את אחיזה זה ללא תגובת לחץ. הכנו וידאו יופיטר זה לעשות טכניקת מסירה אפי זה לנגיש יותר.
Protocol
Representative Results
Discussion
שיטה זו מראה כיצד עכברים ניתן לתת מינונים רגילים של תרופה אפי כדי למקד את המוח ללא שימוש בהרדמה. תרופה אפי יכולה להיות מועברת לקבוצות גדולות של עכברים לפרקי זמן ממושכים עם מינימום מאמץ. קבוצה אחת של עד 20 עכברים ניתן לטפל intranasally על ידי אדם יחיד בפחות משעה אחת. מגוון רחב …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים מבקשים להודות לטיפול בבעלי חי HealthPartners המוסדי והשתמש ועדה בבית חולי אזורים.
Materials
| Materials | Company | Cat # | Comment |
| P20 pipettor set at 6 μl | |||
| Gel loading pipette tips | |||
| Timer | |||
| Waste receptacle for tips | |||
| Dosing sheet for notes | |||
| Pen | |||
| Drug and vehicle | |||
| Container to hold drug vials | |||
| Animals to be dosed | |||
| Spare gloves | |||
| Paper towels to wipe urine | |||
| Table 3. Materials Needed |
Referências
- Dhuria, S. V., Hanson, L. R., Frey, W. H. Intranasal delivery to the central nervous system: mechanisms and experimental considerations. J. Pharm Sci. 99, 1654-1673 (2010).
- Thorne, R. G., Pronk, G. J., Padmanabhan, V., Frey, W. H. Delivery of insulin-like growth factor-I to the rat brain and spinal cord along olfactory and trigeminal pathways following intranasal administration. Neurociência. , 127-481 (2004).
- Benedict, C., et al. Intranasal insulin as a therapeutic option in the treatment of cognitive impairments. Exp. Gerontol. 46, 112-115 (2011).
- Francis, G. J., et al. Intranasal insulin prevents cognitive decline, cerebral atrophy and white matter changes in murine type I diabetic encephalopathy. Brain. 131, 3311-3334 (2008).
- Francis, G., et al. Intranasal insulin ameliorates experimental diabetic neuropathy. Diabetes. 58, 934-945 (2009).
- Marks, D. R., Tucker, K., Cavallin, M. A., Mast, T. G., Fadool, D. A. Awake intranasal insulin delivery modifies protein complexes and alters memory, anxiety, and olfactory behaviors. J. Neurosci. 29, 6734-6751 (2009).
- Hanson, L., et al. Intranasal delivery of deferoxamine reduces spatial memory loss in APP/PS1 mice. Drug Delivery and Translational Research. 2, 160-168 (2012).
- Danielyan, L., et al. Protective effects of intranasal losartan in the APP/PS1 transgenic mouse model of Alzheimer disease. Rejuvenation Research. 13, 195-201 (2010).
- Fine, J. M., et al. Intranasal deferoxamine improves performance in radial arm water maze, stabilizes HIF-1alpha, and phosphorylates GSK3beta in P301L tau transgenic mice. Exp. Brain Res. 219, 381-390 (2012).
- Lochhead, J. J., Thorne, R. G. Intranasal delivery of biologics to the central nervous system. Adv. Drug Deliv. Rev. 64 (11), 614-628 (2012).
- Hanson, L. R., et al. Intranasal deferoxamine provides increased brain exposure and significant protection in rat ischemic stroke. J. Pharmacol. Exp Ther. 330, 679-686 (2009).
- Reger, M. A., et al. Effects of intranasal insulin on cognition in memory-impaired older adults: modulation by APOE genotype. Neurobiol. Aging. 27, 451-458 (2006).
- Kim, C. H., Song, H. y. u. n., M, E. u. n. A. h. n., Lee, Y., G, J., Yoon, J. H. Effect of hypo-, iso- and hypertonic saline irrigation on secretory mucins and morphology of cultured human nasal epithelial cells. Acta Otolaryngol. 125, 1296-1300 (2005).
- Greiff, L., Andersson, M., Wollmer, P., Persson, C. G. Hypertonic saline increases secretory and exudative responsiveness of human nasal airway in vivo. Eur. Respir. J. 21, 308-312 (2003).
