Haut Tätowieren als einen neuartigen Ansatz für DNA Vaccine Lieferung
Summary
Haut Tätowieren ist ein potenter und sicheren Weg zur Auslieferung DNA-Impfstoff intradermal. Hier wird ein DNA-Plasmid kodiert EGFP durch Tätowierung auf der Haut eines Labormaus geliefert, und die Expression von EGFP in den Hautzellen wird dann durch konfokale Mikroskopie untersucht.
Abstract
Nukleinsäure-basierte Impfungen ist ein Thema von wachsendem Interesse, insbesondere Plasmid-DNA (pDNA) Codieren immunologisch wichtigen Antigenen. Nachdem sich das manipulierte pDNA den Impfstoffen verabreicht wird, wird es transkribiert und übersetzt in Immunogen Proteine, die Antworten des Immunsystems auslösen kann. Viele Wege zur Umsetzung der DNA-Impfstoffe untersucht worden, aber jede Lieferung Strecke hat seine eigenen Vorteile und Fallstricke. Haut Tätowieren ist eine neuartige Technik, die sicher, kostengünstig und bequem ist. Darüber hinaus könnten die Einstiche von der Nadel zugefügt auch als potente Adjuvans dienen. Hier haben wir a) zeigen die intradermalen Verabreichen von Plasmid DNA, die verstärkt grün fluoreszierende Protein (EGFP pCX-) in einem Maus-Modell unter Verwendung eines Geräts Tätowieren und b) bestätigen die effektive Expression von EGFP in den Hautzellen mittels konfokaler Mikroskopie.
Protocol
Representative Results
Discussion
DNA-Impfung gilt als sicherer als herkömmliche Impfstrategien, da sie nicht verlangen, Manipulation oder aussetzen Impfstoffe, live oder abgeschwächte Erreger 4. Jedoch hängt das Ergebnis der DNA-Vakzinierung stark von der Lieferroute. Haut ist reichlich in Antigen-präsentierende Zellen, wie Langerhans-Zellen und dendritischen Zellen 1 und damit eine ideale Ort für die Immunisierung im Hinblick auf Immunogenität und leichte Zugänglichkeit 5,6. Als Ergebnis ist intradermale Impfstr…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Wir möchten alle Mitglieder der Kong Lab und Dr. Yan Deng am Microscopy Core, Office of Collaborative Wissenschaft, NYUMC danken für ihre Unterstützung und technischen Support. Diese Arbeit wurde von einem Piloten Zuschuss von der New York University Center for AIDS Research (CFAR, NIH AI027742) unterstützt.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalogue Number | Comments |
| pCX-EGFP plasmid DNA | Clontech | ||
| STEALTH Rotary Tattoo System | Worldwide Tattoo Supply | STEALTH-L | |
| Tattoo needles | Worldwide Tattoo Supply | 1207RSB | |
| EndoFree Plasmid Maxi Kit | Qiagen | 12362 | |
| 0.22 μm PVDF sterile filter | Millipore | SLGV013SL | |
| electrical hair trimmer | Commercially available | ||
| disposable safety razors | Commercially available | ||
| Silver Sulfadiazine Cream | Watson | NDC 0591-0810-55 | |
| Ketamine HCL | NDC 0856-2012-01 | ||
| Zylazine Sterile Solution | NADA 139-236 |
Referências
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