Infektion av prostata kan vara en bidragande faktor vid mediering bäckensmärta vid kronisk prostatit. Vi beskriver förfarandet för beredning av standardiserade bakteriella inokulat, instillation av bakterier i urinröret manliga möss och metoder för att mäta taktil allodyni hos möss över tid.
Uropatogena Escherichia coli (UPEC) är patogener som spelar en viktig roll i urinvägsinfektioner och bakteriell prostatit 1. Vi har nyligen visat att UPEC har en viktig roll vid initieringen av kronisk bäckensmärta 2, en funktion av kronisk prostatit / kronisk bäckensmärta syndrom (CP / CPP) 3,4. Infektion i prostatan genom kliniskt relevanta UPEC kan initiera och etablera kronisk smärta genom mekanismer som kan innebära vävnadsskada och inledandet av mekanismer autoimmunitet 5.
En utmaning att förstå patogenesen av UPEC i prostatan är den relativa otillgänglighet av prostatakörteln för manipulation. Vi utnyttjade en tidigare beskriven intrauretral infektion metod 6 för att leverera en klinisk stam av UPEC till hanmöss därigenom fastställa en uppåtgående infektion i prostatan. Här beskriver vi våra protokoll för standardisering av bacterial inokulum 7 samt förfarandet för catheterizing sövda hanmöss för instillation av bakterier.
CP / CPP kännetecknas primärt av närvaron av taktil allodyni 4. Beteende tester baserades på begreppet kutan hyperalgesi följd avses visceral smärta 8-10. En irriterad fokus i viscerala vävnader minskar kutan smärttröskeln möjliggör en överdriven reaktion på normalt icke smärtsamma stimuli (allodyni). Tillämpning av normal kraft på huden resulterar i onormala reaktioner som tenderar att öka med intensiteten av den underliggande visceral smärta. Vi beskriver metodiken i NOD / ShiLtJ möss som utnyttjar von Frey fibrer att kvantifiera taktil allodyni över tiden som svar på en enda infektion med UPEC bakterier.
Infektion av mus prostata med UPEC möjliggör in vivo-modellering av händelser som kan vara inblandade i patogenesen av bakteriell prostatit, CP / CPP eller som en predisponerande händelse i kronisk inflammation. De metoder som beskrivs för bakteriell förberedelse och instillation dra på en stor mängd litteratur om UPEC modeller i kvinnliga urinvägsinfektion 7,14. Modellen har bred tillämpbarhet för att studera patogenes, testa potentiella vaccinkandidater och mekanismer för immunmodulerin…
The authors have nothing to disclose.
Denna forskning stöddes av bidrag 1K01DK079019A2 (PT) från NIH / NIDDK.
Name of the reagent | Company | Catalogue number |
Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |