Summary

الماوس قصيرة وطويلة الأجل الحركي نشاط تحليلها بواسطة برامج تتبع فيديو

Published: June 20, 2013
doi:

Summary

النشاط الحركي (LMA) هو قياس بسيطة ويؤديها بسهولة من السلوك في الفئران. اقتران من برنامج تتبع الفيديو (VTS) وLMA يسمح لتحسين خصوصية وحساسية، وخصوصا عندما بالمقارنة مع دليل، خط طريقة عبور LMA التحليل. بالإضافة إلى ذلك VTS يسمح تتبع طويل الأجل من الماوس LMA.

Abstract

النشاط الحركي (LMA) هو قياس بسيطة ويؤديها بسهولة من السلوك في الفئران والقوارض الأخرى. وقد سمحت التحسينات في برنامج تتبع الفيديو (VTS) إلى أن يقترن إلى LMA الاختبار، وتحسين نوعية وحساسية بشكل كبير بالمقارنة مع الطريقة المعابر يتماشى مع دليل التهديف. وبالإضافة إلى ذلك، تمكن خدمة حركة السفن التجريب عالية الإنتاجية. بينما مماثلة لتتبع الفيديو الآلي المستخدمة في الاختبار الميداني المفتوحة (OFT)، LMA الاختبار هي فريدة من نوعها من حيث أنه يسمح الفئران أن تبقى في قفص وطنهم ولا الاستفادة من التحفيز anxiogenic من الإضاءة الساطعة خلال المرحلة النشطة من ضوء الظلام دورة. تقليديا، وقد استخدمت LMA لفترات قصيرة من الوقت (دقيقة)، في حين أن الدراسات حركة أطول (ساعة أيام) وغالبا ما تستخدم زرع أجهزة الإرسال والقياس البيولوجي البعادي. مع خيار تتبع في الوقت الحقيقي، طويلة، مثل اختبار LMA على المدى القصير، ويمكن الآن أن تجرى باستخدام بالفيديو. اختبار LMA على المدى الطويل يتطلب المتخصصة، ولكن شيدت بسهولة، قفص بحيث الغذاء والماء (والتي عادة ما وضعه على رأس قفص) لا تعيق بالفيديو. الأهم، بالفيديو وVTS يسمح لتقدير المعلمات، مثل مسار حركة الماوس، التي يصعب أو غير مجدية لقياس مع خط معبر و / أو القياس البيولوجي البعادي. وباختصار، اختبار LMA بالإضافة إلى خدمة حركة السفن يعطي وصفا أكثر اكتمالا من حركة الماوس والقدرة على فحص تنقل على مدى فترة ممتدة من الزمن.

Protocol

1. LMA مجموعة قصيرة الأجل والإجراءات انشاء المدى القصير LMA القفص حتى اختبار LMA على المدى القصير داخل قفص المنزل على فأرة الحاسوب تسكينهم واحد. لتسهيل تحليل الصور …

Representative Results

مثال على النتائج من التدابير المتكررة، ويظهر اختبار LMA قصيرة الأجل في الشكل 1. هذا الرقم يدل أنه بعد عديد السكاريد الشحمي (LPS) إدارة والفئران الموجودة في حبس التهوية بشكل فردي (IVC) استعادة النشاط الحركي على المدى القصير بشكل أسرع من الفئران الموجودة في المحيط ح…

Discussion

وتشمل أعراض المرض في الفئران الخمول، وفقدان الاهتمام في محيط الاجتماعية والبيئية، والشعور بالضيق وفقدان الشهية 2-3. في الفئران وغيرها من القوارض، LMA يمكن استخدامها لتقييم المرض بعد المناعي التنشيط 4-5. بالإضافة إلى ذلك، LMA طويل الأجل يوفر القدرة على تتبع حر…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

الدعم: وأيد هذا البحث من قبل المعاهد الوطنية للصحة (DK064862، NS058525 وAA019357 إلى GGF).

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Video camera Sony HDR-XR500V Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers     Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)     Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops     Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7) Noldus Information Technology   A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC Dell Inc.   See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator Dohm DS A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs     Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper     Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.

Referências

  1. Goulding, E. H., Schenk, A. K., Juneja, P., MacKay, A. W., Wade, J. M., Tecott, L. H. A robust automated system elucidates mouse home cage behavioral structure. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 20575-20582 (2008).
  2. Kent, S., Bluthé, R. M., Kelley, K. W., Dantzer, R. Sickness behavior as a new target for drug development. Trends Pharmacol. Sci. 13, 24-28 (1992).
  3. Dantzer, R. Cytokine, sickness behavior, and depression. Immunol. Allergy Clin. North Am. 29, 247-264 (2009).
  4. Godbout, J. P., et al. Exaggerated neuroinflammation and sickness behavior in aged mice following activation of the peripheral innate immune system. FASEB J. 19, 1329-1331 (2005).
  5. York, J. M., et al. The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation. Brain Behav. Immun. 26, 218-227 (2012).
  6. York, J. M., et al. Individually ventilated cages cause chronic low-grade hypoxia impacting mice hematologically and behaviorally. Brain Behav. Immun. 26, 951-958 (2012).
  7. Jennings, M., et al. Refining rodent husbandry: the mouse. Report of the Rodent Refinement Working Party. Lab. Anim. 32, 233-259 (1998).
  8. York, J. M., Blevins, N. A., Baynard, T., Freund, G. G. Mouse testing methods in psychoneuroimmunology. Methods in Molecular Biology. 934, 243-276 (2012).
  9. Dantzer, R., O’Connor, J. C., Freund, G. G., Johnson, R. W., Kelley, K. W. From inflammation to sickness and depression: when the immune system subjugates the brain. Nat. Rev. Neurosci. 9, 46-56 (2008).
  10. Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of rodents. Comp. Med. 53, 140-146 (2003).
  11. Karelina, K., et al. Social isolation alters neuroinflammatory response to stroke. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 5895-5900 (2009).
check_url/pt/50252?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).

View Video