Summary

Maus Kurz-und Langzeit-Bewegungsaktivität von Video-Tracking-Software analysiert

Published: June 20, 2013
doi:

Summary

Laufaktivität (LMA) ist eine einfache und leicht durchgeführt Messung des Verhaltens bei Mäusen. Kopplung von Video-Tracking-Software (VTS) und LMA ermöglicht die Verbesserung der Spezifität und Sensitivität, vor allem, wenn mit dem Handbuch, Linie überqueren Methode der LMA Analyse verglichen. Zusätzlich VTS ermöglicht langfristige Verfolgung von Maus LMA.

Abstract

Laufaktivität (LMA) ist eine einfache und leicht durchgeführt Messung des Verhaltens bei Mäusen und anderen Nagetieren. Verbesserungen in der Video-Tracking-Software (VTS) haben es erlaubt zu LMA Tests gekoppelt werden, dramatisch verbessert Spezifität und Sensitivität bei der Linienüberquerungen Verfahren mit manueller Scoring verglichen. Darüber hinaus ermöglicht VTS Hochdurchsatz-Experimente. Während ähnliche automatisierte Video-Tracking für den offenen Feldtest (OFT) verwendet werden, ist LMA Tests einzigartig, da es ermöglicht Mäusen, in ihrer Heimat zu bleiben und Käfig nutzt nicht das anxiogenen Reiz der hellen Beleuchtung während der aktiven Phase des Hell-Dunkel- Zyklus. Traditionell wurde LMA für kurze Zeit (Minuten) verwendet worden, während längere Bewegung Studien (Stunden-Tage) häufig verwendet haben Sender und biotelemetry implantiert. Durch die Möglichkeit der Echtzeit-Tracking-, Fern-, wie kurzfristige LMA Prüfung können jetzt unter Verwendung Videografie werden. Langfristige LMA Tests erfordert eine spezialisierte, Aber leicht konstruiert, Käfig, so dass Nahrung und Wasser (die in der Regel auf dem Käfig oben positioniert) nicht behindert Videografie. Wichtig ist, ermöglicht Videografie und VTS für die Quantifizierung von Parametern wie Weg der Bewegung der Maus, die schwierig oder unmöglich, mit Linie Kreuzung und / oder biotelemetry messen sind. In der Summe ergibt LMA Tests gekoppelt VTS eine vollständigere Beschreibung der Mausbewegung und die Fähigkeit zur Fortbewegung über einen längeren Zeitraum zu untersuchen.

Protocol

1. Kurzfristige LMA Set Up und Vorgehensweise Kurzfristige LMA Käfig einrichten Testen kurzfristigen LMA im eigenen Käfig eines einzeln untergebracht Maus. Um VTS-abhängige Bildanalyse zu erleichtern, verwenden Betten in hohem Kontrast mit Maus Farbe (dh dunkle Bettwäsche für weiße Mäuse und helle Bettwäsche für schwarze Mäuse). Während kurzfristige LMA Tests decken Käfige mit klaren ¼ in Plexiglas mit 11 x ¼ Durchmesser Löcher, geeignete Belüftung …

Representative Results

Ein Beispiel der Ergebnisse aus einer wiederholten Maßnahmen wird kurzfristig LMA-Test in Abbildung 1 dargestellt. Diese Zahl zeigt, dass nach Lipopolysaccharid (LPS) Verwaltung, Mäuse einzeln in belüfteten Käfighaltung (IVC) erholen kurzfristigen Bewegungsaktivität untergebracht schneller als Mäuse in umgebenden Umwelt Käfighaltung (AEC) 6 untergebracht. Während die anfängliche Verlust der motorischen Aktivität ist ähnlich zwischen LPS injiziert Gruppen, ist die Erholung basalen L…

Discussion

Die Symptome der Krankheit bei Mäusen sind Lethargie, Verlust des Interesses an sozialen und ökologischen Umgebung, Unwohlsein und Appetitlosigkeit 2-3. Bei Mäusen und anderen Nagetieren, können verwendet werden, um Krankheit LMA nach Aktivierung des Immunsystems 4-5 zu bewerten. Darüber hinaus bietet langfristige LMA die Fähigkeit, Bewegung über eine 24 Stunden (oder mehr) Zeit zu verfolgen, so dass die Analyse der Behandlung induzierten Veränderungen der circadianen Verhalten oder Störun…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Support: Diese Arbeit wurde von den National Institutes of Health (DK064862, NS058525 und AA019357 zu GGF) unterstützt.

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Video camera Sony HDR-XR500V Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers     Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)     Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops     Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7) Noldus Information Technology   A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC Dell Inc.   See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator Dohm DS A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs     Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper     Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.

Referências

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York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).

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