Summary

לטווח ארוך והקצרה של תנועה פעילות עכבר נותחה על ידי תוכנה למעקב וידאו

Published: June 20, 2013
doi:

Summary

הפעילות של תנועה (אה"ע) היא מדידה פשוטה ומתבצע בקלות בהתנהגות בעכברים. צימוד של תוכנת מעקב וידאו (VTS) ואה"ע מאפשר השיפור של ייחוד ורגישות, במיוחד בהשוואה לשימוש, שיטת חציית קו אה"ע הניתוח. בנוסף VTS מאפשר מעקב ארוך טווח של העכבר אה"ע.

Abstract

הפעילות של תנועה (אה"ע) היא מדידה פשוטה ומתבצע בקלות בהתנהגות בעכברים ומכרסמים אחרים. שיפורים בתוכנת מעקב וידאו (VTS) שאפשרו לה להיות בשילוב לאה"ע בדיקות, שיפור משמעותי סגוליות ורגישות בהשוואה לשיטת מעברי הקו עם ניקוד ידני. בנוסף, מאפשר VTS ניסויים תפוקה גבוהה. אמנם דומה למעקב וידאו אוטומטי המשמש לבדיקת השדה הפתוחה (OFT), אה"ע בדיקות היא ייחודית בכך שהיא מאפשרת לעכברים להישאר בכלוב בבית שלהם ולא לנצל את גירוי anxiogenic של תאורה בהירה במהלך השלב הפעיל של אור בחושך מחזור. באופן מסורתי, אה"ע שימש במשך פרקי זמן (דקות) קצרים, ואילו מחקרי תנועה ארוכות יותר (HRS-ימים) השתמשו לעתים קרובות מושתלים משדרים וbiotelemetry. עם האפשרות למעקב בזמן אמת, ארוכה, כמו בדיקות אה"ע לטווח קצר, יכול כעת להתבצע באמצעות צילום וידאו. בדיקות אה"ע לטווח ארוך דורשת מיוחדות, אך נבנה בקלות, כך שכלוב מזון ומים (שהוא בדרך כלל ממוקם בראש הכלוב) אינו מסתיר videography. חשוב מכך, צילום הווידאו וVTS מאפשרים כימות של פרמטרים, כגון נתיב של תנועת עכבר, שקשים או בלתי אפשריים למדוד עם קו חצייה ו / או biotelemetry. לסיכום, בדיקות אה"ע מצמידים VTS מעניקה תיאור מלא יותר של תנועת עכבר ואת היכולת לבחון את התנועה על פני תקופה ממושכת של זמן.

Protocol

1. סט אה"ע לטווח קצר עד ונוהל לטווח קצר אה"ע כלוב להגדיר בדוק אה"ע לטווח קצר בתוך הכלוב בבית של עכבר בודד שוכנו. כדי להקל על ניתוח תמונת VTS תלוי, להשתמש במצ…

Representative Results

דוגמה לתוצאות מצעדים חוזרים ונשנים, בדיקת אה"ע טווח קצר מוצגת באיור 1. נתון זה מראה כי לאחר lipopolysaccharide ממשל (LPS), עכברים שוכנו בcaging מאוורר בנפרד (IVC) לשחזר את הפעילות של תנועה לטווח קצר מהירים יותר מעכברים שוכנו בcaging סביבת הסביבה (AEC) 6. בעוד האובדן הראשוני…

Discussion

סימפטומים של מחלה בעכברים כוללים עייפות, אובדן העניין בסביבה חברתית וסביבתית, תחושת חולי ואנורקסיה 2-3. בעכברים ומכרסמים אחרים, ניתן להשתמש בו כדי להעריך אה"ע מחלה לאחר חיסון הפעלה 4-5. בנוסף, אה"ע לטווח ארוך מציע את היכולת לעקוב אחר תנועה על פני 24 שעות (?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

תמיכה: מחקר זה נתמך על ידי המכונים הלאומי לבריאות (DK064862, NS058525 וAA019357 לGGF).

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Video camera Sony HDR-XR500V Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers     Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)     Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops     Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7) Noldus Information Technology   A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC Dell Inc.   See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator Dohm DS A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs     Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper     Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.

Referências

  1. Goulding, E. H., Schenk, A. K., Juneja, P., MacKay, A. W., Wade, J. M., Tecott, L. H. A robust automated system elucidates mouse home cage behavioral structure. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 20575-20582 (2008).
  2. Kent, S., Bluthé, R. M., Kelley, K. W., Dantzer, R. Sickness behavior as a new target for drug development. Trends Pharmacol. Sci. 13, 24-28 (1992).
  3. Dantzer, R. Cytokine, sickness behavior, and depression. Immunol. Allergy Clin. North Am. 29, 247-264 (2009).
  4. Godbout, J. P., et al. Exaggerated neuroinflammation and sickness behavior in aged mice following activation of the peripheral innate immune system. FASEB J. 19, 1329-1331 (2005).
  5. York, J. M., et al. The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation. Brain Behav. Immun. 26, 218-227 (2012).
  6. York, J. M., et al. Individually ventilated cages cause chronic low-grade hypoxia impacting mice hematologically and behaviorally. Brain Behav. Immun. 26, 951-958 (2012).
  7. Jennings, M., et al. Refining rodent husbandry: the mouse. Report of the Rodent Refinement Working Party. Lab. Anim. 32, 233-259 (1998).
  8. York, J. M., Blevins, N. A., Baynard, T., Freund, G. G. Mouse testing methods in psychoneuroimmunology. Methods in Molecular Biology. 934, 243-276 (2012).
  9. Dantzer, R., O’Connor, J. C., Freund, G. G., Johnson, R. W., Kelley, K. W. From inflammation to sickness and depression: when the immune system subjugates the brain. Nat. Rev. Neurosci. 9, 46-56 (2008).
  10. Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of rodents. Comp. Med. 53, 140-146 (2003).
  11. Karelina, K., et al. Social isolation alters neuroinflammatory response to stroke. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 5895-5900 (2009).
check_url/pt/50252?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).

View Video