Summary

Mouse a breve e lungo termine di attività locomotoria analizzati da Tracking Software Video

Published: June 20, 2013
doi:

Summary

Attività locomotoria (LMA) è una misura semplice e di facile esecuzione di comportamento nei topi. Accoppiamento di software di video tracking (VTS) e LMA permette il miglioramento della specificità e sensibilità, soprattutto se confrontato con il manuale, linea metodo di attraversamento LMA analisi. Inoltre VTS permette il monitoraggio a lungo termine di topo LMA.

Abstract

Attività locomotoria (LMA) è una misura semplice e di facile esecuzione di comportamento nei topi e altri roditori. Miglioramenti nel software di video tracking (VTS) hanno permesso di essere accoppiato a test LMA, migliorando notevolmente la specificità e la sensibilità rispetto al metodo linea di incroci con il punteggio manuale. Inoltre, VTS permette la sperimentazione di alto-rendimento. Simile al video tracking automatico utilizzato per la prova in campo aperto (OFT), test di LMA è unica in quanto permette topi di rimanere nella loro gabbia casa e non utilizza lo stimolo ansiogeno di forte illuminazione durante la fase attiva del chiaro-scuro ciclo. Tradizionalmente, LMA è stato utilizzato per brevi periodi di tempo (minuti), mentre gli studi più lunghi del movimento (ore-giorni) hanno spesso usato impiantati trasmettitori e biotelemetria. Con l'opzione di monitoraggio in tempo reale, a lungo, come il test a breve termine LMA, possono ora essere eseguiti utilizzando videografia. Test a lungo termine LMA richiede una specializzazione, Ma facilmente costruiti, gabbia in modo che il cibo e l'acqua (che è di solito posizionato sulla parte superiore della gabbia) non osti videografia. È importante sottolineare che, videografia e VTS permette la quantificazione di parametri, come ad esempio il percorso di movimento del mouse, che sono difficili o irrealizzabile per misurare con la linea di passaggio e / o biotelemetria. In sintesi, prove LMA accoppiato ad VTS permette una descrizione più completa di movimento del mouse e la capacità di esaminare locomozione su un periodo esteso di tempo.

Protocol

1. LMA Set a breve termine Up e procedura A breve termine LMA gabbia istituito Testare LMA a breve termine all'interno della casa gabbia di un mouse a singolo ospitato. Per facilitare l'analisi delle immagini VTS-dipendente, utilizzare biancheria da letto in alto contrasto con il colore del mouse (cioè letto di colore scuro per i topi bianchi e biancheria da letto di colore chiaro per i topi neri). Durante il test a breve termine LMA, coprire le gabbie con…

Representative Results

Un esempio di risultati di una misure ripetute, prova LMA breve termine è mostrato in Figura 1. Questa figura mostra che, dopo lipopolisaccaride (LPS), l'amministrazione, i topi alloggiati in gabbie ventilate individualmente (IVC) recuperare l'attività locomotoria a breve termine più velocemente di topi alloggiati in ambiente ambiente ingabbiamento (AEC) 6. Mentre la perdita iniziale di attività locomotoria è simile tra LPS gruppi iniettati, il recupero di basale LMA è più rapi…

Discussion

I sintomi della malattia nei topi includono letargia, perdita di interesse in un ambiente sociale e ambientale, malessere e anoressia 2-3. Nei topi e altri roditori, LMA può essere utilizzato per valutare la malattia dopo immunitario attivazione 4-5. Inoltre, LMA a lungo termine offre la possibilità di monitorare il movimento su una 24 ore (o superiore) periodo, permettendo l'analisi delle alterazioni indotte dal trattamento nel comportamento circadiano o disturbi nel sonno / veglia. LMA offr…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Supporto: Questa ricerca è stata sostenuta dal National Institutes of Health (DK064862, NS058525 e AA019357 di GGF).

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Video camera Sony HDR-XR500V Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers     Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)     Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops     Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7) Noldus Information Technology   A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC Dell Inc.   See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator Dohm DS A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs     Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper     Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.

Referências

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York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).

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