Summary

Mus på kort och lång sikt rörelseaktivitet Analyzed by Video Tracking Software

Published: June 20, 2013
doi:

Summary

Rörelseaktivitet (LMA) är en enkel och lätt utförs mätningar av beteende hos möss. Koppling av video spårningsprogram (VTS) och LMA möjliggör förbättring av specificitet och sensitivitet, särskilt jämfört med den manuella, korsar metod LMA analys. Dessutom VTS möjliggör långsiktig uppföljning av mus LMA.

Abstract

Rörelseaktivitet (LMA) är en enkel och lätt utförs mätningar av beteende hos möss och andra gnagare. Förbättringar i video spårningsprogram (VTS) har gjort det möjligt att kopplas till LMA testning, vilket dramatiskt förbättrar specificitet och sensitivitet jämfört med linje korsningar metoden med manuell scoring. Dessutom möjliggör VTS hög genomströmning experiment. Medan liknande automatiserad video tracking används för det öppna fältet testet (OFT), är LMA testning unik genom att den tillåter möss att stanna kvar i sitt hem bur och inte utnyttja ångestökande stimulans av ljus belysning under den aktiva fasen av ljus-mörker cykel. Traditionellt har LMA använts för korta tidsperioder (min), medan längre rörelse studier (h-dagar) har ofta använt implanterade sändare och biotelemetry. Med möjlighet till spårning i realtid, lång, liksom kortsiktiga LMA testning, kan nu utföras med hjälp av Videografi. Långsiktig LMA testning kräver en specialiserad, Men lätt konstruerade, bur så att mat och vatten (som vanligtvis är placerad på burtopp) inte hindrar Videografi. Viktigt ger Videografi och VTS för kvantifiering av parametrar, såsom väg musrörelser, som är svåra eller omöjliga att mäta med linjekorsning och / eller biotelemetry. Sammanfattningsvis ger LMA testning kopplad till VTS en mer fullständig beskrivning av mus rörelse och förmågan att undersöka förflyttning över en utsträckt tidsperiod.

Protocol

Ett. Kortfristiga LMA Set Up and Procedure Kortfristiga LMA bur inrättas Testa kortsiktiga LMA i hemmet buren av en enda inrymt mus. För att underlätta VTS-beroende bildanalys, använder sängkläder i hög kontrast med musen färg (dvs. mörka sängkläder för vita möss och ljusa sängkläder för svarta möss). Under kortsiktiga LMA testning, täcka burar med tydlig ¼ i plexiglas med 11 x ¼ i diameter hål att stödja lämplig ventilation. <…

Representative Results

Ett exempel på resultat från en upprepad åtgärder, är kortsiktiga LMA testet visas i figur 1. Denna siffra visar att efter lipopolysackarid (LPS) administration, möss inrymt i individuellt ventilerade bur (IVC) återhämta kortsiktiga rörelseaktivitet snabbare än möss inrymt i omgivande miljö caging (AEC) 6. Medan den initiala förlusten av rörelseaktivitet är likartad mellan LPS injicerade grupper, är återhämtningen för basala LMA snabbare i IVC hysta möss var som hastighete…

Discussion

Symtom på sjukdom i möss letargi, förlust av intresse för sociala och miljömässiga omgivningar, sjukdomskänsla och anorexi 2-3. Hos möss och andra gnagare kan LMA användas för att utvärdera sjukdom efter immun aktivering 4-5. Dessutom erbjuder långsiktiga LMA möjlighet att spåra rörelser över en 24 h (eller högre) period, vilket gör att analysen av behandling-inducerade förändringar i dygnsrytm beteende eller störningar i sömn / vakna mönster. LMA erbjuder flera fördelar jä…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Support: Denna forskning stöds av National Institutes of Health (DK064862, NS058525 och AA019357 till GGF).

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Video camera Sony HDR-XR500V Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers     Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)     Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops     Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7) Noldus Information Technology   A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC Dell Inc.   See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator Dohm DS A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs     Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper     Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.

Referências

  1. Goulding, E. H., Schenk, A. K., Juneja, P., MacKay, A. W., Wade, J. M., Tecott, L. H. A robust automated system elucidates mouse home cage behavioral structure. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 20575-20582 (2008).
  2. Kent, S., Bluthé, R. M., Kelley, K. W., Dantzer, R. Sickness behavior as a new target for drug development. Trends Pharmacol. Sci. 13, 24-28 (1992).
  3. Dantzer, R. Cytokine, sickness behavior, and depression. Immunol. Allergy Clin. North Am. 29, 247-264 (2009).
  4. Godbout, J. P., et al. Exaggerated neuroinflammation and sickness behavior in aged mice following activation of the peripheral innate immune system. FASEB J. 19, 1329-1331 (2005).
  5. York, J. M., et al. The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation. Brain Behav. Immun. 26, 218-227 (2012).
  6. York, J. M., et al. Individually ventilated cages cause chronic low-grade hypoxia impacting mice hematologically and behaviorally. Brain Behav. Immun. 26, 951-958 (2012).
  7. Jennings, M., et al. Refining rodent husbandry: the mouse. Report of the Rodent Refinement Working Party. Lab. Anim. 32, 233-259 (1998).
  8. York, J. M., Blevins, N. A., Baynard, T., Freund, G. G. Mouse testing methods in psychoneuroimmunology. Methods in Molecular Biology. 934, 243-276 (2012).
  9. Dantzer, R., O’Connor, J. C., Freund, G. G., Johnson, R. W., Kelley, K. W. From inflammation to sickness and depression: when the immune system subjugates the brain. Nat. Rev. Neurosci. 9, 46-56 (2008).
  10. Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of rodents. Comp. Med. 53, 140-146 (2003).
  11. Karelina, K., et al. Social isolation alters neuroinflammatory response to stroke. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 5895-5900 (2009).
check_url/pt/50252?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).

View Video