Summary

Farelerde Endotrakeal Entübasyon<em> Via</emBir Otoskop Kullanma> Doğrudan Larengoskopi

Published: April 05, 2014
doi:

Summary

Biz 2.0 mm spekulum ile bir otoskop kullanarak direkt laringoskopi yoluyla farelerde entübasyon için, basit, güvenilir ve nispeten ucuz bir yöntem geliştirdik. Bu teknik, atravmatik ve kronik deneylerde tekrarlanan ölçümler için de kullanılabilir. Biz üstün trakeostomi veya daha önce cerrahi dışı teknikler bildirdi bulabilirsiniz.

Abstract

Fareler, vahşi tipli ve transjenik hem şu anda, biyomedikal araştırmalarda asıl memeli modeli vardır. Entübasyon ve mekanik ventilasyon derin anestezi veya akciğer fonksiyon ölçümleri altında ameliyat gerektiren bütün hayvan deneyleri için gereklidir. Trakeostomi mekanik havalandırma sağlamak için bu farelerde entübasyon için standart olmuştur. Orotrakeal entübasyon nedeniyle önemli teknik zorluk veya çok özel ve pahalı ekipman için bir gereklilik rapor edilmiştir ancak başarılı birçok çalışmada kullanılmıştır olmamıştır. Burada bir 2.0 mm spekulum ile donatılmış bir otoskop kullanarak ve bir endotrakeal tüp olarak 20 G intravenöz kateter kullanarak doğrudan laringoskopi bir teknik rapor. Biz entübe ve farelerde akciğer fonksiyonunun doğru değerlendirmeler yapmak için yaygın ve güvenilir bu tekniği kullandık. Bu teknik, deneyimli ellerde aslında hiçbir hayvan kaybı ile güvenli kanıtlamıştır. Ayrıca, bu teknik,Kronik bir model farelerin tekrarlanan çalışmalar için de kullanılabilir.

Introduction

Laboratuvar faresi biyoloji ve patobiyolojisinde başlıca memeli model olarak hemen hemen tüm türlerin yerini almıştır. Laboratuvar faresi açıkça ve yoğun insan hastalığının bir model olarak değer olduğu gösterilmiştir ve insan biyolojisi ve hastalık anlayışımızın gelişmeler paha biçilmez kanıtlamıştır küçük memeli türüdür. Kısa gebelik süresi ve önemli ölçüde daha düşük maliyetli bir biyomedikal araştırmalarda yaygın araç olarak boş ve transjenik farelerin geliştirme ve çalışma sağladı. Ancak, ortalama laboratuvar faresi (20-25 g) büyüklüğü dolayısıyla, bazı araştırmacılar, daha büyük memeli türler olan, fizyolojik ya da cerrahi araştırmalarda kendi çalışma sınırlı gelmiştir. Bu çalışmalarda fareler kullanarak bir engel derin anestezi altında fizyolojik ölçümler veya geniş cerrahi prosedürler sağlayacak entübasyon teknikleri ile karşılaşılan zorluk olduğunu. Trakeostomi 1, standart te olarak kullanılmaktadırçünkü gerekli bu tekniği ve mütevazı beceri yerine daha kolay yerine entübasyon NİK. Ancak, trakeostomi kronik veya kurtarma cerrahi çalışmalar için elverişli değildir; bu nedenle, akut deneyler ile sınırlıdır. Trakeostomi de iltihap veya hassas fizyolojik refleksleri önemli olduğu araştırma karıştırıcı bir değişken olabilir.

Bizim laboratuvar diğer araştırmacılar tarafından açıklanan tekniklerin çoğunu denedim ve çeşitli nedenlerle için onları yetersiz buldu. Trakeostomi çok travmatik ve kanama ve hava yolu iltihabı neden olur. Çok daha sorunlu bunun fizibil tekrar edilemez olmasıdır. Ekipman mütevazı bir yatırım gerektiren birçok nispeten non-invaziv teknikler yeterince güvenilir değildir. Diğer teknikler ekipman belirli bir uygulamada çalışacak olmadığını bilmeden haklı zordur pahalı ekipman gerektirir. Böylece, biz artık t gerekli bir nontravmatik tekniğini geliştirmek için çalıştıhan özel bir ekipman mütevazı bir yatırım, hızlı bir şekilde gerçekleştirilebilir olabilir ve güvenilir bir şekilde, kronik modellerinde tekrar olabilir ve hayvanların çok sayıda kullanılabilir. İşte biz böyle bir teknik rapor.

Protocol

1.. Hayvan Preparasyon (Küçük fareler bir uzman tarafından entübe edilebilir) 8 hafta daha eski ve daha 20 g olan fareler edinin. Anestezi Periton boşluğu içine bir preanesthetic olarak ketamin ve ksilazin 20 mg / kg, her biri, farelere enjekte edilir. (Bu doz tamamen fare uyutmak için yeterli değildir, ancak mekanik ventilasyon entübasyon sonrası güvenli taşınmasını kolaylaştırır.) Ancak, dozlar ayarlama kurumsal veterinere danışılarak anestezik yanıta göre gerekli…

Representative Results

Yukarıdaki tekniği ile entübasyon, güvenilir ve hızlı. Endotrakeal tüpün uygun yerleştirme en kolay ve batık ekspiratuar uzuv süresi dolan gaz kabarcıklarının oluşması gözlemleyerek tarafından doğrulanmadı ventilatör devresi (genellikle bir PEEP tuzak) ve (Şekil 1) izleme, bir hava yolu basıncı üzerindeki olumsuz sapmaların. Hava yolu basıncı izleme üzerinde olumsuz deplasmanlar en güvenilir. Diğer ekspiratuar vantilatör devresi 2'ye bağlı intravenöz bor…

Discussion

Bu yazıda travmatik olmayan ve aynı hayvanda tekrar tekrar kullanılabilir fareler entübe için basit, güvenilir bir tekniği açıklar. Bu teknik bir mütevazı toplamı için satın alınabilir basit laboratuar ya da tıbbi ekipman ile gerçekleştirilebilir. Ilk Hastings ve arkadaşları tarafından rapor edilen 4 doğrudan laringoskopide tekniği, çeşitli amaçlar için de kullanılabilir, ama esas olarak doğru bir alt solunum sistemine test maddesi sunmak için. Biz nedeniyle tekrarlanan ölçüml…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Veteran İşleri Bölümü'nden bir Liyakat Grant ve Sağlık Ulusal Enstitüleri enstitünün bir T32-HL098062 hibe bu çalışmaları destekledi. Biz minnetle Randolph H. Hasting, MD, Ph.D. tavsiyesi teşekkür etmek istiyoruz ve tavsiye ve VA San Diego Sağlık Sistemi Veteriner Tıp Birimi desteği.

Materials

Operating Otoscope Head Welch Allyn 21700  $188.98
Otoscope Handle Welch Allyn 71000  $112.20
Reuseable Speculum Welch Allyn 22002  $ 3.98
Fine Forceps Miltex 18-779  $107.18
Small clamp stand to hold otoscope
Optional Equipment
Isoflurane Vaporizer (multiple circuit with vacuum waste gas handling) Summit Medical $3,000
Flexivent (Animal Ventilator) SCIREQ $35,000
Supplies
Intravenous catheter (20 ga x 1 inch) BD 381233  $  9.62
Polyethylene tubing (PE10) (0.011 inch I.D., 0.024 inch O.D.) 100 ft Intramedic, Clay-Adams 427401  $115.70
Ketamine 100 mg/ml (10 ml bottle) Butler 23061  $10.00
Xylazine (100 ml bottle) Vedco 24105  $20.00
Isoflurane (250 ml bottle)  $15.00
vecuronium bromide 10 mg/10 ml Pfizer NDC 0069-0094-01 $15.00

Referências

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. natl. Acad. Sci. U.S.A. 88, 8277-8281 (1991).
  2. Watanabe, A., Hashimoto, Y., Ochiai, E., Sato, A., Kamei, K. A simple method for confirming correct endotracheal intubation in mice. Lab. Anim. 43, 399-401 (2009).
  3. Orebaugh, S. L. Succinylcholine: adverse effects and alternatives in emergency medicine. Am. J. Emerg. Med. 17, 715-721 (1999).
  4. Hastings, R. H., Summers-Torres, D. Direct Laryngoscopy in Mice. Contemp. Lab. Anim. Sci. 38, 33-35 (1999).
  5. Berul, C. I., Aronovitz, M. J., Wang, P. J., Mendelsohn, M. E. In vivo cardiac electrophysiology studies in the mouse. Circulation. 94, 2641-2648 (1996).
  6. Ewart, S. L., Gavett, S. H., Margolick, J., Wills-Karp, M. Cyclosporin A attenuates genetic airway hyperresponsiveness in mice but not through inhibition of CD4+ or CD8+ T cells. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 14, 627-634 (1996).
  7. Ewart, S. L., Mitzner, W., DiSilvestre, D. A., Meyers, D. A., Levitt, R. C. Airway hyperresponsiveness to acetylcholine: segregation analysis and evidence for linkage to murine chromosome 6. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 14, 487-495 (1996).
  8. Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Lab. 41, 128-135 (2007).
  9. Boll, H., et al. High-speed single-breath-hold micro-computed tomography of thoracic and abdominal structures in mice using a simplified method for intubation. J. Comput. Assist. Tomogr. 34, 783-790 (2010).
  10. Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).
  11. Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. Video-assisted orotracheal intubation in mice. Lab. Anim. 37, 204-206 (2003).
  12. Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 8, 103-106 (2004).
  13. Hamacher, J., et al. Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination. Lab. Anim. 42, 222-230 (2008).
  14. Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Cont. Top. Lab. Anim. Sci. 44, 52-55 (2005).
  15. MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).
  16. De Vleeschauwer, S. p. I., et al. Repeated invasive lung function measurements in intubated mice: an approach for longitudinal lung research. Lab. Anim. 45, 81-89 (2011).
  17. Zhao, X., et al. A technique for retrograde intubation in mice. Lab. Anim. 35, 39-42 (2006).
  18. Singer, T., et al. Left-sided mouse intubation: description and evaluation. Exp. Lung Res. 36, 25-30 (2010).
check_url/pt/50269?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Thomas, J. L., Dumouchel, J., Li, J., Magat, J., Balitzer, D., Bigby, T. D. Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope. J. Vis. Exp. (86), e50269, doi:10.3791/50269 (2014).

View Video