비 침습적으로 위 비우는의 결정 [<sup> 13</sup> C]-octanoic 여성 NOD LtJ 마우스의 추적 gastroparesis에 대한 산 호흡 테스트.
쥐 위 비우는 연구는 가장 일반적으로 사용되는 기술은 동물과 식사 1,2의 사후 복구를 죽이는해야하기 때문에 같은 동물의 위 비우는 변경 사항을 따르도록 없다는 의해 제한되었습니다. 이 방법은 나이와 질병의 진행과 위 비우는의 변화를 결정하기 위해 길이 방향의 연구를 방지 할 수 있습니다. 일반적으로 사용되는 [13 C]-octanoic 인간 3 산 숨이 시험은 마우스 4-6와 쥐 7 사용하기 위해 수정 우리는 이미이 시험은 약물에 응답하고 동안 안정적이고 위 비우는 변화에 반응을 보여 주었다되었습니다 당뇨병 질환의 진행 8. 이 비디오 프리젠 테이션에서이 수정 테스트의 원칙과 실제 구현은 설명합니다. 이전 연구에서와 같이, NOD LtJ 마우스는 제 1 형 당뇨병 9 모델을 사용합니다. 이 마우스의 비율은 diabet의 합병증, gastroparesis의 증상을 개발에스 위 (10)의 기계적 방해하지 않고 지연 위의 비우는의 특징.
본 논문은 테스트 식사를 준비하고 4 시간 위 비우는 데이터와 어떻게 얻은 데이터를 분석하는 방법을 구하는 방법, 테스트를 위해 쥐를 훈련하는 방법을 보여줍니다. 본 연구에 사용 된 탄소 동위 원소 분석기는 동시에 12 쥐 최대의 공기 샘플의 자동 샘플링에 적합합니다. 이 기술은 당뇨병이나 다른 오랜 질병으로 생쥐의 큰 그룹의 위 비우는의 종 후속 수 있습니다.
이 원고 쥐 위 비우는의 비 침습적 측정에 관련된 기술 및 방법론 고려 사항에 대해 설명합니다. 에 따라 프로토콜이 여기에 설명, 조사가 안정적으로 reproducibly 인한 질병의 발전에 비우는 위의 변화를 추적 할 수, 위 비우는의 약리 대리인의 영향을 연구하고 기본 질병 또는 결함 6,8의 치료 위 비우는의 반응을 따라 11,12. 이전 출판물에서 13 C의 응용 프로그램은 octanoic 산성 숨이 테스트는 사람과 동물 3,8에서 위 비우는을 측정하는 유용한 방법을 표시했습니다.이 보고서는 상세 설명 6-8으로 신뢰할 수있는 데이터를 얻을하는 데 필요한 절차 당뇨병 쥐 위 비우는의 길이 방향 연구에 필요한 개월. 이전에 다음 ID로 출판 방법에 비해이 프로토콜에 따라의 장점은 탐정이 데이터 obtaine을 보장 할 수 아르d는 신뢰할 수 있고 재현 할 수 있습니다. 또한, 수집 및 가스 샘플을 분석 자동화 된 시스템이 여기에 설명 된 연구에서 동시에 추적 할 수있는 동물의 수를 증가합니다. 전반적으로,이 문서의 목표는 테스트에 마우스 habituation와 그 얻은 결과에 변화를 줄일를 유지 주요 요인을 파악하는 것입니다.
위 비우는의 생체 측정의 경우, 마우스는 하루 아침에 금식하고 지속적인 공기 흐름을 투명 플라스틱 시험 챔버에 투입. 마우스가 튜브에 길들여지면, 기본은 2 수준 결정 13 CO를 exhaled과 공기가 적절히 조정. 다음, 우리는 13 C-라벨 octanoic 산을 섞어 계란 노른자로 구성된 테스트 식사를 관리 할 수 있습니다. 마우스가 금식과 훈련되기 때문에, 그들은 일반적으로 2 분 이내에 테스트 식사를 먹습니다. 관리 octanoic 산성은 위장에서 흡수되지 않습니다하지만 십이지장에 연결됩니다D는 주변 공기를 13 CO 2의 농축의 결과로, 출시와 exhaled되어 13 CO 2로 간에서 대사 질 것입니다. 공기 샘플은 결정 시간 간격으로 수집하고 탄소 동위 원소 분석기에 의해 분석됩니다. 이 모든 과정에서 속도 – 제한 단계는 위 비우는와 CO 2는 직접 레이블 식사 위 비우는과 일치하는 13 폐 배설입니다.
그림 1. 위 비우는 장치의 도식. 밤새 금식 한 후, 마우스는 그들이 자유롭게 이동하고 회전 할 수 있도록 투명한 방에 배치됩니다. 입구 관은 신선하고 지속적으로 공기 유입을 허용하고 콘센트는 13 C-에-12을 측정 할 수있는 동위 원소 분석기로 연결의 C 비율은 숨을 exhaled. 챔버는 [13 C]-octanoic 산을 포함하는 음식을 제공을위한 중앙 포트가 있습니다.
설명 기술은 여기 쥐 고체 위의 비우는의 생체 측정의 반복과 비 침습적 할 수 있습니다. 이 시스템은 사람들이 자유롭게 이동하고 회전 할 수 있도록 동물이 측정 챔버에 묶여하지 않는 장점이 있습니다. 이 익숙하지 않은 환경 때문에, 마우스는 여전히 훈련 위 비우는에 스트레스의 영향을 방지하기 위해 테스트 챔버에게 길들여해야합니다. 일반적으로 연속 위 비우는 테스트 사이의 내?…
The authors have nothing to disclose.
이 비디오 공개는 DK 68,055 프로그램 프로젝트 기금 '장용 시스템의 Pathobiology "에 대한 당뇨병과 소화기 및 신장 질환 국립 연구소 (NIDDK)에서 기금에 의해 가능하게되었다. 크리스토퍼 T. Creedon는 로체스터의 공립 학교 멘토링 프로그램에 의해 지원되었다.
우리는 기술 지원, 비서 지원 및 로스 Gatos 연구, Inc의 (마운틴 뷰, CA)에서 박사 더글라스 베어 미스 크리스티 Zodrow에 씨 게리 Stoltz 감사드립니다.
NAME | COMPANY | CAT NUMBER | COMMENTS |
A source of constant air-supply, flow as well as composition | central air supply in the research facility | ||
130 ml sampling chamber that has air inlet, air outlet, and food administration opening Plastic tubes for air supply |
In-house built | ||
Octanoic acid | Cambridge isotope laboratories (Andover, MA) | CLM-293-1 | |
To prepare the egg meal:
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Any supplier | Try to be consistent with the egg supplier since the nutritional content and palatability of the eggs can affect ingestion and gastric emptying of the meal | |
Carbon dioxide isotope analyzer | Los Gatos Research Inc. (Mountain View, CA) |