PRP comme une nouvelle approche pour prévenir l'infection: Préparation et<em> In vitro</em> Propriétés antimicrobiennes de PRP
Summary
Implant associée à l'infection est une complication clinique importante. Cette étude décrit une approche basée sur plasma riche en plaquettes (PRP) pour prévenir les infections associées aux implants, présente le protocole pour la préparation de PRP avec la concentration de plaquettes constante, et rend compte des propriétés nouvellement identifiés antimicrobiennes de PRP et les protocoles connexes pour examiner de telles propriétés antimicrobiennes<em> In vitro.</em
Abstract
Implant associée à l'infection devient de plus en plus difficile pour l'industrie des soins de santé dans le monde entier en raison de la résistance croissante aux antibiotiques, la transmission de bactéries résistantes aux antibiotiques entre les animaux et les humains, et le coût élevé du traitement des infections.
Dans cette étude, nous décrivons une nouvelle stratégie qui pourrait être efficace dans la prévention des infections associées aux implants basée sur les propriétés antimicrobiennes potentielles de plasma riche en plaquettes (PRP). En raison de ses propriétés bien étudiées pour favoriser la cicatrisation, PRP (un produit biologique) a été de plus en plus utilisées pour des applications cliniques, y compris les chirurgies orthopédiques, chirurgies parodontales et orale maxillo-faciale, la chirurgie, la chirurgie plastique, médecine du sport, etc
PRP pourrait être une alternative de pointe pour traitements antibiotiques conventionnels en matière de prévention des infections associées implant. L'utilisation de PRP peut être avantageux par rapport aux traitements antibiotiques conventionnels scnce PRP est moins susceptible d'induire une résistance aux antibiotiques et PRP antimicrobienne et la guérison des propriétés favorisant peut avoir un effet synergique sur la prévention des infections. Il est bien connu que les agents pathogènes et les cellules humaines sont en compétition pour les surfaces de l'implant, et les propriétés de PRP de guérison de promotion pourrait améliorer la fixation des cellules humaines réduisant ainsi les chances d'infection. En outre, le PRP est intrinsèquement biocompatible et sécuritaire et exempt de risque de maladies transmissibles.
Pour notre étude, nous avons sélectionné plusieurs souches bactériennes cliniques qui sont généralement trouvés dans les infections orthopédiques et a examiné si PRP a les propriétés in vitro antimicrobiens contre ces bactéries. Nous avons préparé PRP en utilisant une approche qui permet centrifugation deux fois la même concentration plaquettaire à obtenir pour tous les échantillons. Nous avons obtenu des résultats cohérents antimicrobiens et a constaté que PRP a une forte propriétés de vitro antimicrobiens contre les bactéries comme methicillin sensible et résistant à la méthicilline Staphylococcus aureus, streptocoques du groupe A, et Neisseria gonorrhoeae. Par conséquent, l'utilisation de PRP peut avoir le potentiel pour prévenir l'infection et à réduire le besoin de coûteux traitement post-opératoire de l'implant infections nosocomiales.
Introduction
Implant associée à l'infection est une complication clinique importante. Staphylococcus aureus (S. aureus) est l'un des microorganismes les plus fréquemment isolés à partir implant infections nosocomiales. Il est capable de produire un biofilm qui recouvre les surfaces des implants et peut conduire à l'infection de 1,2 résistante aux antibiotiques. Traitement des infections associées aux implants nécessite souvent une hospitalisation à long terme pour débridements répétés et prolongés thérapie parentérale d'antibiotiques. En cas de résistance aux antibiotiques, le retrait de l'implant peut être nécessaire. La résistance croissante des bactéries aux antibiotiques a également été évoquée par les Centers for Disease Control and Prevention (CDC) comme «l'un des problèmes de la santé les plus pressants." Avec le temps, sans le développement de nouveaux traitements antimicrobiens et efficace, il est possible que plusieurs médicaments pathogènes résistants sera intraitable avec les antibiotiques classiques. Prévention de l'implant associél'infection est donc important et de nouveaux agents prophylactiques ou approches sont nécessaires pour prévenir ces infections.
Plasma riche en plaquettes (PRP) est une concentration de sang autologue qui contient plus de 30 facteurs de croissance qui peuvent contribuer à l'os et la cicatrisation de greffe osseuse 3-5. L'application de PRP pour favoriser la régénération osseuse et de la maturation des tissus mous a été rapporté dans les cliniques de plus en plus en raison de sa forte concentration de divers facteurs de croissance libérés par les plaquettes.
Plusieurs caractéristiques de PRP PRP indiquent que peuvent aussi avoir des propriétés antimicrobiennes 6-9. PRP contient un grand nombre de plaquettes, une forte concentration de leucocytes (qui peut posséder hôte de défense contre les actions des bactéries et des champignons), et plusieurs peptides anti-microbiens 7,8,10. Dans une étude récente sur une large cohorte de patients de chirurgie cardiaque, il a été révélé que l'utilisation peropératoire de PRP-gel au cours de la plaie fermeture Significantly diminué l'incidence de l'infection par le sternum superficielle et profonde 11. Pour ces raisons et d'observations, nous avons émis l'hypothèse que le PRP, en plus de ses bien étudiées guérison des propriétés favorisant, possède des propriétés antimicrobiennes. Les avantages potentiels de l'utilisation de PRP pour prévenir l'infection peuvent inclure: (i) PRP est moins susceptible d'induire une résistance par rapport à des traitements antibiotiques conventionnels. (Ii) PRP a aussi des propriétés qui favorisent la guérison qui peut avoir un effet synergique sur la prévention des infections; PRP de la guérison, la promotion de propriétés pourrait fournir un joint pour empêcher la fixation des bactéries réduisant ainsi les chances d'infection par les pathogènes et les cellules humaines sont en compétition pour les surfaces de l'implant 12 , 13. (Iii) PRP est intrinsèquement biocompatible et sécuritaire et exempt de risque de maladies transmissibles.
Notre objectif à long terme est d'utiliser PRP comme une nouvelle approche pour prévenir implant associé infections. Le but de cette étude était de préparer PRP en utilisant une approche centrifugation à deux reprises, d'examiner PRP dans des propriétés antimicrobiennes in vitro, et de décrire les protocoles pour l'évaluation de ces propriétés antimicrobiennes.
Protocol
Representative Results
Discussion
Plasma riche en plaquettes a été de plus en plus utilisées pour des applications cliniques en raison de ses propriétés favorisant la guérison 15-17. Dans la présente étude, le PRP a été présentée comme une nouvelle approche pour la prévention des infections. Le PRP a été constaté que de fortes propriétés antimicrobiennes contre le SARM, SASM, streptocoque du groupe A, et Neisseria gonorrhoeae. Les principaux avantages de la PRP, par rapport à des traitements antibiotiques …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs remercient Therwa Hamza, John E. Tidwell, Nina Clovis, et Suzanne Smith pour son aide expérimentale et Suzanne Smith pour la relecture. Les auteurs remercient également Jean Thomas, Ph.D. de fournir les isolats bactériens cliniques et John B. Barnett, PhD, pour son soutien et à l'utilisation du laboratoire de sécurité biologique au Département de microbiologie, d'immunologie et de biologie cellulaire à l'Université West Virginia. Les auteurs tiennent à remercier le soutien financier de l'ostéosynthèse et Trauma Care Foundation et la National Science Foundation (# 1003907). Expériences de microscopie et analyse d'images ont également été réalisés dans l'installation de la West Virginia University Imaging, qui est soutenu en partie par le Mary Babb Randolph Cancer Center et NIH P20 RR016440.
L'utilisation d'animaux pour les prises de sang ont été approuvés par les soins de la West Virginia University animaux institutionnel et Use Committee. Toutes les expériences ont été exécutées en conformité avec toutes les guidelin pertinentees, les règlements et les organismes de réglementation.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Bovine thrombin | King Pharmaceuticals, Inc | 60793-215-05 | Thrombin (bovine origin) |
| Calcium chloride | King Pharmaceuticals, Inc | 60793-215-05 | 10% calcium chloride |
| Ethanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
| Isoflurane | Baxter | 1001936060 | |
| Mueller Hinton broth | Becton, Dickinson and Company | 275710 | |
| Phosphate-buffered saline | Sigma-Aldrich | D8662 | |
| Tri-sodium citrate | Sigma-Aldrich | W302600 | |
| Tryptic soy agar | Fisher Scientific | R01202 | |
| Centrifuge | Kendro Laboratory Products | 750043077 | |
| Syringe filter | Millipore | SLGP033RS |
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