Summary

अग्नाशय के कैंसर प्रगति की bioluminescent Orthotopic के लिए मॉडल

Published: June 28, 2013
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Summary

अग्नाशय के कैंसर के जीव विज्ञान की समझ में सुधार गंभीर रूप से अग्नाशय के कैंसर के इलाज के लिए बेहतर उपचार के विकल्प के विकास को सक्षम करने की जरूरत है. इस जरूरत को संबोधित करने के लिए, हम प्रयोग कैंसर प्रगति की गैर इनवेसिव निगरानी परमिट कि अग्नाशय के कैंसर की एक orthotopic मॉडल का प्रदर्शन<em> Vivo में</em> Bioluminescence इमेजिंग.

Abstract

<p class="jove_content"> अग्नाशय के कैंसर 4-6% की एक अत्यंत गरीब पांच वर्ष जीवित रहने की दर है. नई चिकित्सकीय विकल्प समीक्षकों की जरूरत और अग्नाशय के कैंसर जीव विज्ञान की समझ में सुधार पर निर्भर कर रहे हैं. बेहतर अग्नाशय microenvironment के साथ कैंसर की कोशिकाओं की बातचीत को समझते हैं, हम कैंसर प्रगति की गैर इनवेसिव निगरानी परमिट कि अग्नाशय के कैंसर की एक orthotopic मॉडल प्रदर्शित करता है. Luciferase टैग अग्नाशय के कैंसर की कोशिकाओं Matrigel में resuspended और laparotomy के दौरान अग्नाशय पूंछ में वितरित कर रहे हैं. Matrigel इंजेक्शन के दौरान कैंसर कोशिकाओं के रिसाव को रोकने के लिए शरीर के तापमान पर solidifies. दूर के अंगों को प्राथमिक ट्यूमर के विकास और मेटास्टेसिस का उपयोग कर, luciferase सब्सट्रेट luciferin के इंजेक्शन के बाद निगरानी कर रहे हैं<em> Vivo में</emकैंसर> इमेजिंग.<em> विवो में</em> इमेजिंग भी लकीर के बाद प्राथमिक ट्यूमर पुनरावृत्ति को ट्रैक करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस orthotopic मॉडल syngeneic और xenograft मॉडल दोनों के लिए अनुकूल है और प्राथमिक अग्नाशय के ट्यूमर और मेटास्टेसिस के विकास पर उपन्यास विरोधी कैंसर चिकित्सा के प्रभाव की जांच के लिए पूर्व नैदानिक ​​परीक्षण में इस्तेमाल किया जा सकता है.</p>

Introduction

अग्नाशय के कैंसर 4-6% की एक 5 साल की जीवित रहने की दर के साथ, कैंसर से संबंधित मौत का चौथा प्रमुख कारण है. रोगियों के 1,2 केवल 15% सर्जरी के लिए पात्र होने के लिए रोग में काफी पहले का निदान, और ट्यूमर पुनरावृत्ति कर रहे हैं > में उन रोगियों का 80%. 3,4 Gemcitabine अग्नाशय adenocarcinomas के उपचार के लिए प्रयोग किया जाता है, तथापि, chemoresistance आम है और अक्सर दवा समग्र अस्तित्व पर कम असर पड़ता है. अग्नाशय के कैंसर के इलाज के लिए 5 नई औषधीय रणनीतियों समीक्षकों की जरूरत है. उनके विकास चिकित्सकीय हस्तक्षेप के प्रति संवेदनशील हो सकता है कि रोग प्रगति के महत्वपूर्ण कदम की काफी सुधार समझ पर निर्भर करता है.

अग्नाशय के कैंसर के Orthotopic के मॉडल अग्नाशय के कैंसर के जीव विज्ञान के अध्ययन के लिए उन्हें आदर्श उपकरण बनाने, मानव रोग के प्रमुख पहलुओं का अनुकरण. अग्नाशय के कैंसर कोशिका व्यवहार के इन विट्रो में सेल आधारित assays के विपरीत एक में 6-9अग्नाशय के कैंसर के vivo मॉडल में घ चमड़े के नीचे, orthotopic मॉडल अग्नाशय microenvironment के साथ ट्यूमर सेल बातचीत की जांच की अनुमति. रोग प्रगति के कैनेटीक्स orthotopic मॉडल में अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हैं और उन्हें अच्छी तरह से उपन्यास चिकित्सा विज्ञान के पूर्व नैदानिक ​​परीक्षण के लिए अनुकूल बनाता है जो एक छोटे समय सीमा (सप्ताह), से अधिक होते हैं. इस रोग शुरू होने के एक लंबे समय तक और अधिक परिवर्तनशील समय सीमा (महीने 1 वर्ष के लिए). 10 अधिक आक्रामक सेल लाइनों के साथ प्रयोग किया जाता है पर होता है जहां ट्रांसजेनिक मॉडल के विपरीत है, अग्नाशय के कैंसर के orthotopic मॉडल में देखा उन के समान सहज मेटास्टेसिस के पैटर्न है रोगियों. ऐसे जुगनू luciferase रूप bioluminescent रिपोर्टर जीन की 8 अभिव्यक्ति ट्यूमर के विकास के अनुदैर्ध्य निगरानी, ​​मेटास्टेटिक प्रसार, पुनरावृत्ति और चिकित्सा विज्ञान के जवाब की सुविधा. 6,11

यहाँ हम Matr इस्तेमाल करता है कि अग्नाशय के कैंसर की एक orthotopic मॉडल का वर्णनट्यूमर प्रगति की गैर इनवेसिव निगरानी के लिए स्थानीय सेल वितरण और vivo bioluminescence इमेजिंग में लिए Igel. अग्नाशय के कैंसर के इस orthotopic मॉडल रोग प्रगति और syngenic या xenograft मॉडल में उपचारात्मक उपायों के जवाब की गैर इनवेसिव विश्लेषण की अनुमति देता है.

Protocol

प्रदर्शन किया जा रहा प्रोटोकॉल लेखक की संस्था के जानवरों की देखभाल और उपयोग समिति के मार्गदर्शन और अनुमोदन के तहत किया जाता है. सभी प्रयोगों सभी प्रासंगिक दिशा निर्देशों, नियमों और नियामक एजेंसियों क…

Representative Results

इस विधि संज्ञाहरण की प्रेरण, laparotomy, Matrigel और पेट बंद (चित्रा 1 ए) में कैंसर कोशिकाओं के इंजेक्शन सहित शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं का उपयोग कर, अग्नाशय के कैंसर की एक orthotopic मॉडल का वर्णन करता है. इंजेक्शन को?…

Discussion

यहाँ हम अग्नाशय के ट्यूमर के विकास और प्रगति के अनुदैर्ध्य मूल्यांकन के लिए एक orthotopic मॉडल का वर्णन है. प्राथमिक ट्यूमर के विकास कैनेटीक्स प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हैं (चित्रा 3) और उपन्यास वि?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

यह काम राष्ट्रीय स्वास्थ्य और चिकित्सा अनुसंधान परिषद, ऑस्ट्रेलिया (1008865), ऑस्ट्रेलियाई अनुसंधान परिषद (LE110100125), राष्ट्रीय कैंसर संस्थान (CA138687-01), एरिका स्लोअन राष्ट्रीय स्तन कैंसर से एक जल्दी कैरियर फैलोशिप द्वारा समर्थित है के द्वारा समर्थित किया गया फाउंडेशन, ऑस्ट्रेलिया. कोरिना किम फुच्स स्विस कैंसर लीग और औषधि विज्ञान के मोनाश इंस्टीट्यूट से एक hdr छात्रवृत्ति से एक फैलोशिप द्वारा समर्थित है. Eliane आक्रोश बर्न कैंसर लीग से अनुदान द्वारा समर्थित है.

Materials

Equipment Company Catalog Number Comments
Clean Bench coat
Heating pad Set to 37 °C
Ivis Lumina ll Bioluminescent imager Caliper Alternative bioluminescent imaging systems include In vivo F PRO (Carestream) and Photon Imager (Biospace Lab)
Dissecting scissors
Iris forceps (serrated)
Needle holder
27 G 0.3 ml insulin syringe Terumo T35525M2913

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Citar este artigo
Chai, M. G., Kim-Fuchs, C., Angst, E., Sloan, E. K. Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression. J. Vis. Exp. (76), e50395, doi:10.3791/50395 (2013).

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