Hipertensão ocular crônica é induzida pelo uso de fotocoagulação a laser da malha trabecular em rato olhos. A pressão intra-ocular (IOP) é elevada durante vários meses após o tratamento com laser. A diminuição da acuidade visual e sensibilidade ao contraste de animais experimentais são monitorados por meio do teste optomotor.
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Artigo de método
Um modelo de rato induzida por laser de crônica Ocular Hypertension para Caracterizar defeitos visuais
Neste artigo
Resumo
Resumo
Glaucoma, frequentemente associada com a pressão intra-ocular elevada (PIO), é uma das principais causas de cegueira. Buscou-se estabelecer um modelo do rato de hipertensão ocular para imitar alta tensão humana glaucoma. Aqui iluminação laser é aplicado ao limbo corneano para photocoagulate o escoamento do humor aquoso, induzindo fechamento angular. As mudanças de pressão intra-ocular são monitorizadas utilizando um tonómetro rebote antes e após o tratamento com laser. Um teste comportamental optomotor é usado para medir as mudanças correspondentes na capacidade visual. O resultado representante de um rato que desenvolveu elevação da PIO sustentada após a iluminação a laser é mostrado. Uma diminuição da acuidade visual e sensibilidade ao contraste é observado neste rato hipertenso ocular. Juntos, nosso estudo apresenta um modelo de sistema valioso para investigar a degeneração neuronal e dos mecanismos moleculares subjacentes em camundongos portadores de glaucoma.
Protocolo
Procedimentos
Camundongos C57BL/6J (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) são levantadas a Animal Care Facility da Universidade Northwestern. Todos os animais são utilizados em conformidade com os protocolos aprovados pela Northwestern University Animal Care Institucional e Comitê de Uso e conformados com as orientações sobre o uso de animais em pesquisa Neurociência do NIH.
1. Fotocoagulação a laser
O procedimento de fotocoagulação com laser é modificado a partir de protocolos previamente publicados 5-7.
- Anestesiar um rato de 40-60 dias de idade por uma injecção i....
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Resultados
Tal como descrito nos Procedimentos, iluminação laser é apontado para a malha trabecular na região límbica para photocoagulate o escoamento do humor aquoso, induzindo ângulo fechado (Figura 1). Olhos mais lasered exibiu nenhum dano físico significativo, descolamento pigmento ou infecção, de acordo com os achados anteriores 6. Quando um pequeno grupo de ratos (menos de 5% de todos os animais lasered) apresentaram sinais de danos físicos graves, como bolas deflacionados oculares graves, catarat.......
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Discussão
Descrevemos anteriormente que a hipertensão ocular sustentada pode ser induzida pela iluminação do laser em olhos de rato. Em comparação com o modelo de injecção de solução salina 18 e o modelo cautério veia 11 ambos os quais requerem extensivas técnicas de microcirurgia, a iluminação laser é relativamente simples e fácil de executar. Normalmente, podemos realizar a iluminação a laser para 4-6 ratos em 2-3 horas. Os passos fundamentais para alcançar elevação da PIO sustentado são a câmara anterior .......
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Divulgações
Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.
Os autores são funcionários em tempo integral da Universidade de Northwestern.
Os autores não receberam financiamento que foi fornecida por empresas que produzem reagentes e instrumentos utilizados neste artigo.
Agradecimentos
O trabalho contido neste artigo tem sido apoiada pelo Prêmio Johnson Dr. Douglas H. de Pesquisa Glaucoma da American Assistance Foundation Saúde (XL), o William & Mary Greve Scholar Award Especial da Investigação para Prevenir Cegueira (XL), o Illinois Sociedade para a Prevenção da Cegueira (HC) e NIH conceder R01EY019034 (XL).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Reagent | |||
| moxifloxacina | Alcon Labs, Inc. | NDC 0065-4013-03 | 0,5%, Rx apenas |
| Cloridrato de Proparacaína | Bausch Lomb | NDC 24208-730-06 | 0,5%, Rx apenas |
| Solução Oftálmica USP | Bausch Lomb | NDC 24208-730-06,5 | %, Rx apenas |
| cetamina | Butler Schein Animal Health | NDC 11695-0550-1 | 100 mg / kg |
| xilazina | LLOYD Inc. de Iowa | NADA 139-236 | 10 mg / kg |
| solução de sulfato de atropina | Alcon Labs, Inc. | NDC 61314-303-02 | 1%, Rx only |
| Equipment | |||
| Slit Lamp, TOPCON | Visual Systems Inc | SL-3E | alimentado por PS-30A |
| OptoMotry 1.8.0 virtual | CerebralMechanics Inc. | ||
| sistema de teste optocinético | CerebralMechanics Inc. | ||
| Tonômetro, TonoLab, para camundongos | de suprimentos | ||
| Sunbeam Products Inc | 722-810 | ||
| Laser de argônio | Coherent Inc | Ultima 2000SE | |
| DECAPICONE Suporte de cone de plástico | Braintree Sci Inc. | MDC-200 | para mouse |
Referências
- Gupta, N., Yucel, Y. H. Glaucoma as a neurodegenerative disease. Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).
- Quigley, H. A. Neuronal death in glaucoma. Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).
- McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W.
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Reimpressões e permissões
