Vrije weefsel overdracht wordt op grote schaal gebruikt in de reconstructieve chirurgie om vorm en functie te herstellen na oncologische resectie en trauma. Voorconditionering dit weefsel vóór de operatie kan uitkomst te verbeteren. Dit artikel beschrijft een<em> In situ</em> Dwarse rectus abdominis myocutane flap (TRAM) in ratten als een middel voor het testen preconditionering strategieën.
Vrije weefsel overdracht is de gouden standaard reconstructieve chirurgie om complexe defecten niet vatbaar lokale opties of die waarvoor composiet weefsel te herstellen. Ischemie-reperfusie schade (IRS) is een bekende oorzaak van gedeeltelijke vrije flap mislukking en heeft geen effectieve behandeling. Oprichting van een laboratorium model van deze schade kan erg duur zijn zowel financieel als grotere zoogdieren gewoonlijk worden gebruikt en in de expertise die nodig is door de technische moeilijkheid van deze procedures vereist normaliter gebruik van een ervaren microchirurg. Deze publicatie en video tonen het effectieve gebruik van een model van IRI in ratten waarin microchirurgische deskundigheid vereist. Deze procedure is een in situ model van een dwarse abdominis myocutane (TRAM) flap wanneer atraumatische klemmen worden gebruikt om de ischemie-reperfusie letsel door deze operatie reproduceren. Een laser Doppler Imaging (LDI) scanner wordt gebruikt om flap perfusie en de beeldverwerking Softwa beoordelenre, Afbeelding J om procentuele gebied huid overleven als primaire uitkomstmaat van de schade te beoordelen.
Het doel van dit protocol is een betrouwbaar en reproduceerbaar model van ischemie-reperfusie schade waargenomen in vrije weefsel overdracht zodat interventiestrategieën te onderzoeken demonstreren.
Vrije weefsel overdracht is gedefinieerd als de vasculaire onthechting van een geïsoleerd blok weefsel gevolgd door autologe transplantatie van dat weefsel met anastomose van de flap is doorgesneden vaartuigen natieve vaten op de receptorplaats. De procedure staat bekend als FTT en het weefsel wordt overgedragen aangeduid als de vrije flap.
Vrije weefsel overdracht is de gouden standaard aanpak voor de correctie van complexe, samengestelde gebreken waarbij lokale opties zijn niet geschikt of niet beschikbaar. 1-4 Ischemie-reperfusie schade (IRS) is onvermijdelijk in de vrije weefsel overdracht, draagt bij aan het falen 5,6 flapperen en heeft geen effectieve behandeling. De electieve aard van vrije flap operaties toestaat toediening van farmacologischecal agenten om randvoorwaarde tegen IRI.
IRI resulteert in verminderde stroming door de microcirculatie door endotheliale activering en metabole dysfunctie, 7 verhoogde capillaire permeabiliteit en daaropvolgende interstitieel oedeem 7, influx van ontstekingscellen, 8 vrijkomen van ontstekingsmediatoren, reactieve zuurstof species 9 en complement afzetting. 10 Dit complexe proces van hypoxie en daaropvolgende reperfusie schade leidt uiteindelijk tot celdood. Een model van myocutane IRI kan de effectiviteit van preconditionering strategieën op klinische resultaten te beoordelen. Recent werk heeft gevalideerd het gebruik van dierlijke modellen van IRI studies als een surrogaat voor menselijke IRI door het vergelijken van de moleculaire veranderingen waargenomen in de menselijke proefpersonen en bestaande gegevens over dieren. 10,11
De rat dwarse rectusabdominis myocutane (TRAM) flap werd voor het eerst beschreven in 1987 in de Duitse 12 en in 199313 in het Engels. Dit model kreeg grote populariteit 13-25 als een goedkope, robuuste model om verschillende strategieën te onderzoeken om te verminderen IRI in verband met vrije weefsel overdracht. 14,17-22 De meerderheid van deze studies werden ontworpen als unipedicled TRAM flappen gebaseerd op de diepe, inferieure, . epigastrische vaatsteel 15-18,20-22 Vergelijking van de gegevens van deze studies wordt bemoeilijkt door het gebruik van verschillende grootte cutane eilanden (10,5-30 cm 2) en verschillende lengtes van postoperatieve follow-up (2-10 dagen). De gemiddelde totale percentage oppervlakte flap necrose in de controlegroep van deze studies is 69 ± 6,2% (gemiddelde ± SEM). Opgemerkt moet worden dat deze zes documenten al gebruik van de rechte buikspier als drager voor de vaatsteel maar niet blootstellen, verdelen en microanastomose of klem de schepen. Zhang et al.. 23 hebben een echte, vrije rat TRAM flap gebaseerd op de superieure epigastrische vaten beschreven waarbij de fronden zijn gerezen, schepen verdeeld en de myocutane flap overgedragen en microanastomosed aan de lies schepen. Deze moeilijke techniek vereist de microanastomosis van 0,45-0,5 mm kaliber schepen. Slechts vijftien werden uitgevoerd en van deze 67% overleefd. 23 De beschreven door Zhang et al. model. 23 is een uitstekend model voor de menselijke vrije TRAM flap zoals het werkelijk weerspiegelt het letsel opgelopen tijdens FTT. De andere gepubliceerde modellen van een rat TRAM flap betere weerspiegeling van de verwondingen opgelopen tijdens een mens gesteelde TRAM maar niet nauwkeurig de IRI als deze flap in geen een ischemische periode gevolgd door reperfusie als de vaatsteel wordt nooit geklemd of verdeeld en niet ondergaan microanastomosis uitgevoerd. Dit protocol en video beschrijven een nieuw model van de vrije weefsel overdracht met ratten TRAM waarin het IRI wordt gerepliceerd met behulp microclamps. Dit repliceert trouwer IRI dan de pedicle TRAM voorgangers, maar is technisch eenvoudiger dan Performing de microanastomosis. Microclamps zijn op grote schaal gebruikt door transplantatie onderzoekers om te recreëren IRI in verband met een solide orgaantransplantatie; 26-33 maar dit is de eerste keer dat het is in de rat TRAM flap beschreven.
Wijzigingen en trouble shooting
De hier gepresenteerde protocol neemt de IRI gezien in vrije weefsel overdracht in een experimenteel systeem om een beter begrip van deze werkwijze en een middel op middelen voor het verbeteren van IRI en verbetering resultaat onderzoeken. Dit kan eenvoudig worden aangepast om een meer ernstig letsel veroorzaken indien zij gebaseerd op de niet-dominante, diepe, inferieure epigastrische pedikel of de ischemische tijd verhoogd.
…
The authors have nothing to disclose.
Dit werk werd gefinancierd door de Medical Research Council subsidie G1000299.
De corresponderende auteur wil Gary Borthwick, Universiteit van Edinburgh, bedanken voor het bijstaan tijdens de operatie.
De auteurs willen graag advies van Helen Douglas en Iain Mackay erkennen en waardoor wij hun Deep Inferior Epigastrische (DIEP) flap procedure (Canniesburn Plastische Chirurgie Unit, Glasgow Royal Infirmary, 84 Castle Street, Glasgow G4 0SF, UK) te observeren.
De auteurs willen ook Gary Blackie danken aan de Universiteit van Edinburgh voor zijn hulp bij het produceren van de video voor dit artikel.
Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
Moor LD12 laser doppler imaging scanner | http://gb.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 | ||
Complete homeothermic blanket system with flexible probe. Small. 230 VAC, 50 Hz | 507221F | www.harvardapparatus.com | |
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved | 11052-10 | 2, http://www.finescience.de | |
Acland clamps | 00398 V | B-1 ‘V’ pattern clamps used on both artery and vein. http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf | |
Clamp applicator | CAF-4 | http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf | |
Gemini cautery unit | 726067 | www.harvardapparatus.com | |
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 | D-5a.2 | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 | JFA-5b | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 | JF-5 | http://www.merciansurgical.com | |
Acland Single Clamps B-1V (Pair) | 396 | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight | 67 | http://www.merciansurgical.com | |
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT | EA7613-11 | http://www.merciansurgical.com | |
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT | EA7652-14 | http://www.merciansurgical.com | |
Derf Needle Holders 12 cm TC | 703DE12 | http://www.merciansurgical.com | |
Ethilon 5-0 | W1618 | http://www.farlamedical.co.uk/ | |
Vicryl rapide 6-0 | W9913 | http://www.millermedicalsupplies.com/ | |
Instrapac – Adson Toothed Forceps (Extra Fine) | 7973 | http://www.millermedicalsupplies.com/ | |
Castroviejo needle holders | 12565-14 | http://s-and-t.ne | |
Heat Lamp | http://www.chicken-house.co.uk | ||
Silicone sheeting 0.3 mm translucent | http://www.silex.co.uk/ | ||
Image J software | http://rsbweb.nih.gov/ij/ | ||
Zeiss OPMI pico | http://www.zeiss.co.uk/ | ||
Operating microscope | |||
Vet tech solution isofluorane rig | http://www.vet-tech.co.uk/ | ||
Vet tech solution isofluorane rig | http://www.vet-tech.co.uk/ |