Gratis vävnad överföring är allmänt används i rekonstruktiv kirurgi för att återställa form och funktion efter onkologisk resektion och trauma. Förkonditionering denna vävnad före kirurgi kan förbättra resultatet. Denna artikel beskriver en<em> In situ</em> Tvärgående rectus abdominis myocutaneous klaff (TRAM) hos råttor som ett medel för att testa prekonditionerande strategier.
Gratis vävnad överföring är den gyllene standarden för rekonstruktiv kirurgi för att reparera komplicerade defekter inte mottagliga för lokala alternativ eller de som kräver sammansatta vävnad. Ischemireperfusionsskada (IRI) är en känd orsak till delvis fri flik misslyckande och har ingen effektiv behandling. Etablera ett laboratorium modell av denna skada kan visa sig kostsamt både ekonomiskt som större däggdjur konventionellt används och i den kompetens som krävs av den tekniska svårigheten av dessa förfaranden vanligtvis kräver att anställa en erfaren microsurgeon. Denna publikation och video demonstrerar en effektiv användning av en modell av IRI i råttor som inte kräver mikrokirurgisk kompetens. Detta förfarande är en in situ-modell av en tvärgående abdominis myocutaneous (TRAM) fliken där atraumatiska klämmor utnyttjas för att återge ischemi-reperfusionsskada i samband med denna operation. En laser Doppler Imaging (LDI) skanner används för att bedöma flik perfusion och bildbehandling software, Bild J bedöma procentuell överlevnad område hud som primära effektmått av skada.
Målet med detta protokoll är att påvisa en pålitlig och reproducerbar modell av ischemi-reperfusion skada observerades i fri vävnad transfer för att möjliggöra interventionell strategier som skall undersökas.
Gratis vävnad överföring definieras som den vaskulära avlossning av en isolerad block av vävnad följt av autolog transplantation av denna vävnad med anastomos av luckans avskurna fartyg till inhemska fartyg vid mottagande platsen. Förfarandet är känt som FTT och vävnaden överförs kallad fri flik.
Gratis vävnad överföring är guldmyntfoten metod för korrigering av komplexa, sammansatta defekter där lokala alternativ är olämpliga eller otillgänglig. 1-4 ischemireperfusionsskada (IRI) är oundviklig i fri vävnad transfer, bidrar att flaxa misslyckande 5,6 och har ingen effektiv behandling. Den elektiva karaktär fria flik operationer tillåter administrering av farmakologisktcal agenter till förutsättning mot IRI.
IRI resulterar i nedsatt flöde genom mikrocirkulationen av endothelial aktivering och metabolisk dysfunktion, ökade 7 kapillärpermeabilitet och efterföljande interstitiell ödem 7, inflödet av inflammatoriska celler, 8 frisättning av inflammatoriska mediatorer, reaktiva syreradikaler 9 och komplement nedfall. 10 Denna komplexa process av hypoxi och efterföljande reperfusionsskada leder slutligen till celldöd. En modell av myocutaneous IRI möjliggör effektiv förbehandling strategier för kliniska resultat som ska bedömas. Senaste arbete har validerat användningen av djurmodeller av IRI studier som ett surrogat för mänsklig IRI genom att jämföra de molekylära förändringar som observerats hos människa och befintliga data djur. 10,11
Råttan tvärgående rectus abdominis myocutaneous (spårvagn) flik beskrevs första gången 1987 i tyska 12 och 199313 på engelska. Denna modell vunnit stor popularitet 13-25 som en billig, robust modell för att undersöka olika strategier för att minska IRI i samband med fri vävnad transfer. 14,17-22 Majoriteten av dessa studier var utformade som unipedicled TRAM flikar baserade på den djupa, sämre, . epigastrisk vaskulära BLOMSTJÄLK 15-18,20-22 Jämförelse av data från dessa studier kompliceras av användningen av olika storlek kutana öar (10.5 – 30 cm 2) och olika längder av postoperativ uppföljning (2 – 10 dagar). Den genomsnittliga totala procentuella area flik nekros i kontrollgruppen av dessa studier är 69 ± 6,2% (medelvärde ± SEM). Det bör noteras att dessa sex artiklar alla anställa muskler rectus abdominis som en bärare för den vaskulära BLOMSTJÄLK men inte avslöja, dela och microanastomose eller klämma fartygen. Zhang m.fl.. 23 har beskrivit ett sant, fri flik råtta TRAM baserat på de överlägsna epigastrisk behållare i vilka fvarv höjdes, fartyg delat och myocutaneous fliken överförts och microanastomosed till ljumsken fartygen. Detta svår teknik krävde microanastomosis av 0,45-0,5 mm kaliber fartyg. Endast femton utfördes och av dessa 67% överlevt. 23 Den modell som beskrivs av Zhang et al. 23 är en utmärkt modell för den humana fri TRAM flik som det verkligen speglar den skada som uppkommit under FTT. De andra publicerade modeller av en råtta TRAM flik mer exakt speglar skador som uppkommit under en human pedicled spårvagn men inte korrekt återspeglar IRI eftersom dessa flik i inte genomgår en ischemisk period följt av reperfusion som den vaskulära BLOMSTJÄLK är aldrig klämmas eller uppdelat och microanastomosis utförs. Detta protokoll och video beskriver en ny modell av fri vävnad transfer med råttan spårvagn i vilken IRI replikeras med microclamps. Denna mer troget replikerar IRI än pediclen TRAM föregångare, men är tekniskt enklare än performing den microanastomosis. Microclamps har använts i stor utsträckning genom transplantation forskare att återskapa IRI förknippas med solid organtransplantation, 26-33 men detta är första gången det har beskrivits i råtta TRAM fliken.
Ändringar och felsökning
Protokollet presenteras här återger IRI ses i fri vävnad transfer i ett experimentellt system som möjliggör ytterligare förståelse av denna process och ger en möjlighet att undersöka sätt att lindra IRI och förbättra resultatet. Detta kan lätt modifieras för att skapa en mer allvarlig skada om det byggde på den icke-dominanta, djupt, sämre epigastrisk pedicle eller om den ischemiska tiden ökade var.
Begränsningar av teknik <…
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete har finansierats av Vetenskapsrådet bidrag G1000299.
Motsvarande Författaren vill tacka Gary Borthwick, University of Edinburgh, för att assistera under operationen.
Författarna vill tacka för tips från Helen Douglas och Iain Mackay och tillåter oss att observera deras djupa Sämre Epigastrisk (DIEP) klaff förfarande (Canniesburn plastikkirurgi Unit, Glasgow Royal Infirmary, 84 Castle Street, Glasgow G4 0SF, UK).
Författarna vill också tacka Gary Blackie vid universitetet i Edinburgh för hans hjälp i att producera video för den här artikeln.
Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
Moor LD12 laser doppler imaging scanner | http://gb.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 | ||
Complete homeothermic blanket system with flexible probe. Small. 230 VAC, 50 Hz | 507221F | www.harvardapparatus.com | |
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved | 11052-10 | 2, http://www.finescience.de | |
Acland clamps | 00398 V | B-1 ‘V’ pattern clamps used on both artery and vein. http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf | |
Clamp applicator | CAF-4 | http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf | |
Gemini cautery unit | 726067 | www.harvardapparatus.com | |
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 | D-5a.2 | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 | JFA-5b | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 | JF-5 | http://www.merciansurgical.com | |
Acland Single Clamps B-1V (Pair) | 396 | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight | 67 | http://www.merciansurgical.com | |
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT | EA7613-11 | http://www.merciansurgical.com | |
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT | EA7652-14 | http://www.merciansurgical.com | |
Derf Needle Holders 12 cm TC | 703DE12 | http://www.merciansurgical.com | |
Ethilon 5-0 | W1618 | http://www.farlamedical.co.uk/ | |
Vicryl rapide 6-0 | W9913 | http://www.millermedicalsupplies.com/ | |
Instrapac – Adson Toothed Forceps (Extra Fine) | 7973 | http://www.millermedicalsupplies.com/ | |
Castroviejo needle holders | 12565-14 | http://s-and-t.ne | |
Heat Lamp | http://www.chicken-house.co.uk | ||
Silicone sheeting 0.3 mm translucent | http://www.silex.co.uk/ | ||
Image J software | http://rsbweb.nih.gov/ij/ | ||
Zeiss OPMI pico | http://www.zeiss.co.uk/ | ||
Operating microscope | |||
Vet tech solution isofluorane rig | http://www.vet-tech.co.uk/ | ||
Vet tech solution isofluorane rig | http://www.vet-tech.co.uk/ |