Potenciação de longo prazo da Via Perfurante-giro denteado Synapse em Livremente Comportando Ratos

Summary

Modelos de camundongos transgênicos e knockout de doenças neurológicas são úteis para estudar o papel dos genes em neurofisiologia normal e anormal. Este artigo descreve metodologias que podem ser usados ​​para estudar a potenciação a longo prazo, um mecanismo celular que pode ser a base de aprendizagem e de memória, em transgénicos e knockout livremente comportando modelos de rato de neuropatologia.

Abstract

Estudos da potenciação de longa duração de eficácia sináptica, um fenômeno sináptica dependente de atividade que tem propriedades que o tornam atraente como um potencial mecanismo celular subjacente aprendizagem e armazenamento de informações, têm sido muito utilizados para elucidar a fisiologia de vários circuitos neuronais no hipocampo, amígdala e outras estruturas límbicas e corticais. Com isto em mente, os modelos de camundongos transgênicos de doenças neurológicas representam plataformas úteis para conduzir potenciação de longa duração (LTP) estudos para desenvolver uma maior compreensão do papel dos genes na comunicação sináptica normal e anormal em redes neuronais envolvidos na aprendizagem, emoção e informação processamento. Este artigo descreve as metodologias para indução de forma confiável LTP no rato comportando livremente. Estas metodologias podem ser utilizadas em estudos sobre transgênicos e knockout comportando livremente modelos do rato de doenças neurodegenerativas.

Introduction

O desenvolvimento da tecnologia para manipular genes produziu modelos de ratos transgênicos e knockout de quase todas as doenças neurodegenerativas e neurológicos. Isso exigiu a tradução de técnicas de pesquisa eletrofisiológicos anteriormente utilizados em espécies de roedores maiores para o modelo animal mouse. Uma tal técnica de investigação neurofisiológicos é o uso de potenciação de longo prazo (LTP), para testar a eficácia das conexões sinápticas nas redes neuronais envolvidas em várias doenças neuropatológicas. Este protocolo descreve técnicas para a investigação eletrofisiológica confiável de LTP em comportar livremente ratos. A vantagem deste protocolo sobre....

Protocol

Este protocolo é apropriado para os ratinhos de 3 e 18 meses de idade e peso corporal aproximado de 30-50 g). Ratos podem ser obtidos no Laboratório Jackson (Bar Harbor, ME). Todos os protocolos cirúrgicos e experimentais foram aprovados pelo Comitê Animal Care e Use o Trinity College e estavam de acordo com o Guia do NIH para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório.

1. Preparação Animal e Procedimentos Cirúrgicos

1. Prepare coquetel contendo anestesia de cetamina (25 mg / ml), xilazina (2,5 mg / mL) e acepromazina (0,5 mg / ml). Injectar 1 mL / kg de peso corporal no quadrante inferior direito do abdómen completada por injecções 0,2 ml / kg a cada ....

Results

A Tabela 1 mostra as coordenadas para DG e MPP, usado neste protocolo Figura 1A apresenta as marcações para as estruturas alvo no crânio;.. Também são indicados a localização da terra e eletrodos de referência Figura 1B ilustra representante resposta evocada traça tanto pre- e posttetanization no mesmo animal. Note-se que a resposta evocada posttetanization é maior do que a resposta pretetanization que é indicativa de indução de LTP ^2. Figura 1C

Discussion

Neste protocolo, demonstramos um método simples e confiável para o estudo de LTP em DG em ratos comportando livremente. Enquanto muitos estudos de LTP em ratos acordados foram realizados ^3,4, muito poucos têm sido realizados em ratos acordados, principalmente devido à complexidade técnica colocado pela imobiliária craniana limitada em ratos eo peso do headstages eletrodo em relação ao peso médio de camundongos ^5. Os poucos estudos que demonstraram LTP na DG em comportar livremente camundongos utili.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Cetamina (100 mg/ml)	Henry Schein	10177
Xilazina (20 mg/ml)	Henry Schein	33197
Acepromazina (10 mg/ml)	Henry Schein	2177
Pó acrílico dental	Lang Dental Manufacturing Co.	1330CLR
Dental acrílico líquido	Lang Dental Manufacturing Co.	1306CLR
Fio de tungstênio (0,127 mm)	World Precision Instruments	TGW0515
Tubo hipodérmico de aço inoxidável (0,286 mm)	World Precision Instruments	832400
Flunixin (50 mg/ml)	Henry Schein	14165
Epoxilyte	Superior Essex	EP 6001-M
Inserção de fio de aço inoxidável (0,2 mm)	Mundo Precision Instruments	792900
Aparelho de armação estereotáxica	Kopf Instruments	Modelo 902
Ear cuffs (fones de ouvido)	Kopf Instruments	Modelo 921
Estimulador eletrofisiológico	Astro-Med, Inc.	Osciloscópio digital S88
	B K Precision Corp.	2542
Unidade de isolamento atual	Astro-Med, Inc.	Amplificador diferencial PSIU-6
	World Precision Instruments, Inc.	DAM-50
Comutador	Plásticos Uma	SLC6
	Stoelting	58650