Tibial तंत्रिका transection - चूहे में वितंत्रीभवन प्रेरित कंकाल की मांसपेशी शोष के लिए एक मानकीकृत मॉडल
Summary
tibial तंत्रिका transection मॉडल कंकाल की मांसपेशी शोष के एक, अच्छी तरह से सहन पुष्टि, और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मॉडल है. मॉडल शल्य चिकित्सा प्रोटोकॉल C57Black6 चूहों में वर्णित और प्रदर्शन किया है.
Abstract
tibial तंत्रिका transection मॉडल कृन्तकों में वितंत्रीभवन प्रेरित कंकाल की मांसपेशी शोष के एक, अच्छी तरह से सहन पुष्टि, और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मॉडल है. मूल रूप से विकसित की है और अपने बड़े आकार के कारण चूहे में बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया जाता है, चूहों में tibial तंत्रिका sciatic तंत्रिका की peroneal और पिडली का तंत्रिका शाखाओं बरकरार है और इस तरह के संरक्षण छोड़ रहा है, यह आसानी से कुचलने या transection किसी के साथ चालाकी से किया जा सकता है कि काफी बड़ा है अपने लक्ष्य की मांसपेशियों. इस प्रकार, इस मॉडल sciatic तंत्रिका transection के मॉडल की तुलना में कम रुग्णता और ambulation की बाधा उत्प्रेरण का लाभ प्रदान करता है और भी जांचकर्ताओं अनुवांशिक इंजीनियर चूहों में पेशी शोष की प्रक्रिया को विनियमित करने, शारीरिक सेलुलर और आणविक जीवविज्ञान का तंत्र का अध्ययन करने के लिए अनुमति देता है. tibial तंत्रिका gastrocnemius, soleus और plantaris मांसपेशियों को आपूर्ति करती है, इसलिए इसकी transection तेजी से चिकोटी प्रकार द्वितीय फाइबर और / या धीमी गति से चिकोटी प्रकार से बना किसी तंत्रिका को काटकर निकाल देना अथवा तंत्रिका पूर्ति में रुकावट पैदा करना कंकाल की मांसपेशी का अध्ययन परमिट मैंफाइबर. यहाँ हम C57Black6 माउस में tibial तंत्रिका transection मॉडल प्रदर्शित करता है. हम आयल एम्बेडेड histologic वर्गों पर मांसपेशियों वजन और फाइबर प्रकार विशिष्ट पार के अनुभागीय क्षेत्र को मापने के द्वारा 1, 2 पर, एक प्रतिनिधि मांसपेशियों के रूप में, gastrocnemius मांसपेशियों का शोष का आकलन, और 4 सप्ताह के बाद वितंत्रीभवन तेजी से चिकोटी मायोसिन के लिए immunostained.
Introduction
दर्दनाक परिधीय तंत्रिका चोट, बीमारी या pharmacologic हस्तक्षेप की वजह से कंकाल की मांसपेशी वितंत्रीभवन, मांसपेशियों स्वैच्छिक सिकुड़ा समारोह के तत्काल नुकसान में परिणाम है. स्नायु समन्वित रूप शोष के लिए शुरू होता है और समय पर, अच्छी गुणवत्ता वाले reinnervation 1,2 आती है, तो इस शोष प्रतिवर्ती है. Reinnervation के अभाव में, myofiber शोष की प्रगति, और मांसपेशियों में अपरिवर्तनीय जीवविज्ञान परिवर्तन मांसपेशी फाइब्रोसिस और myofiber मौत के साथ होते हैं. यहाँ हम चूहों में tibial तंत्रिका transection मॉडल, वितंत्रीभवन प्रेरित कंकाल की मांसपेशी शोष और फाइब्रोसिस की एक मॉडल प्रदर्शित करता है. इस मॉडल gastrocnemius और soleus मांसपेशियों में vivo में पेशी शोष कायम करना है कि, शारीरिक सेलुलर और आणविक जीवविज्ञान का तंत्र का अध्ययन करने के लिए वैज्ञानिकों को सक्षम बनाता है. ऐतिहासिक रूप से चूहों में मुख्य रूप से इस्तेमाल किया, पीटा और विशेष रूप से ट्रांसजेनिक माउस लाइनों के लिए इस मॉडल का अधिक हाल ही में आवेदन, जांचकर्ताओं उनकी की भूमिका का आकलन करने के लिए अनुमति देता हैविवो में शामिल करने, विकास और रखरखाव, या वैकल्पिक रूप से संकल्प, मांसपेशियों शोष और फाइब्रोसिस में ब्याज की विशेष प्रोटीन (ओं).
tibial तंत्रिका कृंतक hindlimb में एक मिश्रित मोटर संवेदी परिधीय तंत्रिका है, और sciatic तंत्रिका की तीन टर्मिनल शाखाओं में से एक है. Tibial तंत्रिका की transection gastrocnemius, soleus और plantaris मांसपेशियों (और पीछे tibialis, आकुंचिका digitorum longus और आकुंचिका hallicus longus सहित पैर के तीन छोटे गहरी flexor मांसपेशियों) denervates, और चूहों 3,4 में एक अच्छी तरह से मानकीकृत और पुष्टि मॉडल है . gastrocnemius और soleus मांसपेशियों आसानी tibial तंत्रिका transection, तय हो गई है और अध्ययन के उद्देश्य के लिए पेशी आरएनए और प्रोटीन की निकासी के लिए जमे हुए मांसपेशी ऊतक और मांसपेशी फाइबर मौरफोमैटरिक्स, या फ्लैश के आकलन के लिए कार्रवाई, उदाहरण के लिए, पोस्ट धारावाहिक समय बिंदुओं पर विच्छेदित किया जा सकता है पेशी शोष विनियमन सेलुलर नेटवर्क संकेतन. गाstrocnemius मांसपेशी एक मिश्रित फाइबर प्रकार की मांसपेशी (प्रकार मैं और प्रकार द्वितीय, मुख्य रूप से प्रकार द्वितीय हालांकि) है और soleus मांसपेशी जिससे मूल्यांकन 5,6 के लिए तेज और धीमी दोनों चिकोटी मांसपेशी उपलब्ध कराने, प्रकार मैं फाइबर का एक बड़ा हिस्सा से बना है. tibial तंत्रिका transection मॉडल (महीने के लिए सप्ताह) लघु अवधि (दिन) 7 और दीर्घकालिक दोनों 4,8 में वितंत्रीभवन प्रेरित मांसपेशी शोष की प्रक्रिया के अध्ययन के लिए उपयुक्त है.
Sciatic तंत्रिका transection मॉडल (सामान्यतः कृन्तकों में इस्तेमाल वितंत्रीभवन प्रेरित मांसपेशी शोष का एक दूसरा मॉडल) के विपरीत, tibial तंत्रिका transection यह एक अधिक आकर्षक मॉडल बनाने, पशु में कम रुग्णता लाती है. Tibial तंत्रिका की transection sciatic तंत्रिका की peroneal और पिडली का तंत्रिका शाखाओं बरकरार पत्ते जबकि sciatic तंत्रिका की transection इस प्रकार के संरक्षण, 2 ambulate को जानवर की क्षमता आई., पैर (घुटने से नीचे) और पैर की सभी मांसपेशियों denervatesअपने लक्ष्य की मांसपेशियों और संवेदी प्रदेशों. माउस तल फ्लेक्स करने में असमर्थ या पैर पलटना है, लेकिन आसानी से ambulate करने में सक्षम है और वजन जिससे काफी मॉडल की रुग्णता ह्रासमान, दोनों पिछले पैर पर समान रूप से पड़ता है. चलने के पैटर्न का मूल्यांकन चाल विश्लेषण पढ़ाई tibial और sciatic तंत्रिका चोटों के बाद चूहों में प्रदर्शन किया और पदचिह्न और वजन असर बेहतर tibial चोट 9,10 साथ संरक्षित है कि प्रदर्शित किए गए हैं. अध्ययन डिजाइन 3 की आवश्यकता है, इसके अलावा, tibial तंत्रिका transection मॉडल में, peroneal तंत्रिका एक बाद में समय बिंदु पर जुटाए जा सकता है और देरी reinnervation के एक स्रोत के रूप में स्थानांतरित कर दिया. इसके विपरीत, sciatic तंत्रिका transection मॉडल में देरी reinnervation बहुत काफी मॉडल की तकनीकी कठिनाई बढ़ रही है और कुशल सर्जन के लिए इसके उपयोग को सीमित करने, sciatic तंत्रिका घाटे को एक तंत्रिका भ्रष्टाचार का उपयोग जरूरी है.
जबकि tibial तंत्रिका transection मॉडल आरयह innervates tibial तंत्रिका और पिंडली की मांसपेशियों दोनों पशु शल्य चिकित्सा में बाँझ ऑपरेटिव तकनीक के साथ ऑपरेटर के परिचित, equires सर्जन नहीं कर रहे हैं, या अत्यधिक पशु शल्य चिकित्सा के साथ अनुभवी व्यक्तियों, जो आसानी से इस मॉडल महारत हासिल कर सकता है, ताकि हेरफेर के लिए आसानी से सुलभ और पहचान योग्य हैं .
Protocol
Representative Results
Discussion
वितंत्रीभवन प्रेरित कंकाल की मांसपेशी शोष का tibial तंत्रिका transection मॉडल चूहों में एक सामान्य रूप से कार्यरत हैं और अच्छी तरह से मान्य मॉडल है. हम अन्वेषक अनुवांशिक इंजीनियर चूहों के अस्तित्व का लाभ लेने के…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम CIHR Neuromuscular अनुसंधान भागीदारी (-; JAEB को 90,959 JNM) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Reagents and Materials | |||
| 10-0 Nylon suture | Ethicon | 2850G | |
| 5-0 Vicryl suture | Ethicon | J553G | |
| Equipment | |||
| Spring microdissecting scissors | Fine Surgical Tools | 15021-15 | |
| Ultra fine forceps | Fine Surgical Tools | 11370-40 | |
| Non locking micro needle holder (driver) | Fine Surgical Tools | 12076-12 | |
| Spring retractor | Fine Surgical Tools | 17000-02 |
Referências
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