Gavaging اسماك الزرد الكبار
Summary
تزايد استخدام الزرد كنموذج للحيوانات يتطلب تطوير أساليب فعالة لإيصال كميات من المركبات المعروفة والحلول. الإجراء التغذية الأنبوبية هو موضح أدناه يسمح للتسليم عن طريق الفم كميات دقيقة من حل موثوق، بأمان وكفاءة إلى الزرد الكبار.
Abstract
أصبح الزرد هاما في نموذج الجسم الحي في البحوث الطبية الحيوية. يجب تطوير أساليب فعالة واستخدامها لتسليم المركبات أو وكلاء في حلول للأبحاث العلمية. الأساليب الحالية لإدارة المركبات عن طريق الفم لالزرد الكبار غير دقيقة بسبب التباين في استهلاك التبرعات التي يديرها الأسماك. وقد وضعت إجراء التغذية الأنبوبية لتسليم كميات الدقيق للعوامل المعدية إلى الزرد للدراسة في البحوث الطبية الحيوية. كانت الزرد الكبار أكثر من 6 أشهر من العمر تخدير مع 150 ملغ / لتر من مخزنة MS-222 وgavaged مع 5 ميكرولتر من الحل باستخدام القسطرة أنابيب مرنة غرس تعلق على خفض 22-G طرف الإبرة. تم تخفيض أنابيب مرنة في تجويف الفم من الزرد حتى غيض من أنابيب تمديد الماضية الخياشيم (1 سم تقريبا). ثم تم حقن المحلول ببطء في الأمعاء. وكانت هذه طريقة فعالة 88٪ من الوقت، مع الأسماك تتعافى بشكل هادئ. هذاالإجراء هو أيضا فعالة مثل شخص واحد يمكن تسمين الأسماك 20-30 في ساعة واحدة. هذه الطريقة يمكن استخدامها لإدارة بدقة وكلاء لدراسات الأمراض المعدية، أو دراسات من المركبات الأخرى في الزرد الكبار.
Introduction
الأساليب الحالية لإدارة المركبات عن طريق الفم لالزرد تشمل المركبات بالإدارة أعلى المغلفة على الأعلاف، ومختلطة في الوجبات الغذائية الجيلاتين 1، bioencapsulated في محلول ملحي الروبيان 2، ويخلط مع دهن حمية مغلفة 3، 4 حبات رذاذ الشمع وعبر النظم الغذائية القائمة على الغلوتين. 5 من القيود وتشمل هذه الأساليب من تناوله عن طريق الفم معدلات الرشح عالية وغير مكتملة أو لا يمكن التنبؤ بها استهلاك مركب من قبل الأسماك الفردية. هذه المتغيرات هي إشكالية لأنه في دراسات الأمراض المعدية، ومعرفة الجرعة المعدية تدار على الأسماك قد تكون حاسمة لنجاح الدراسة. أيضا، وقد أظهرت الأعمال السابقة أن بعض المركبات تدار في حمامات المياه تسبب آفة سامة للاسماك الزرد الخياشيم قبل الآثار المعوية التي قد تكون قيد الدراسة تحدث 6.
التغذية الأنبوبية هو أسلوب القياسية المستخدمة في أنواع الحيوانات المختبرية الأخرى لإدارة كميات الدقيق للمنتج مع حزب العدالة والتنميةتركيز nown للدراسة في البحوث الطبية الحيوية والمستحضرات الصيدلانية. في الآونة الأخيرة فقط طرق gavaging الزرد وصفت في الأدب. أسلوب واحد هو موضح هو أسلوب من شخصين باستخدام غمد القسطرة 24 G تعلق على ماصة ميكرولتر 2-20 لتقديم 5 ميكرولتر من الحل. 7 وصف الأسلوب كان معدل الوفيات من 8.7٪ و 39٪ على الأولى والثانية ويعزى معظم الوفيات للإناث حامل؛ المحاكمة، على التوالي. وصف تقنية التغذية الأنبوبية الثانية تستخدم المحاقن أنبوب تغذية حادة ذات الرؤوس لإدارة 5 ميكرولتر من الحل لmedakas (latipes Oryzias). لم يتم توفير 8 معلومات عن وفيات وهذه العملية الدقيقة للأداء بالتزقيم لم يكن وصفها. ويمكن وفقا للالمجلس الكندي للرعاية الحيوان واسماك الزرد مختبر، وتصل إلى 1٪ من وزن جسم السمكة أن تدار من خلال أنبوب تغذية. 9،10 هدفنا هو تطوير طريقة للتكرار، آمنة وفعالة لإيصال كميات دقيقة من COMجنيه شفويا إلى الزرد الكبار من كلا الجنسين وفي جميع مراحل الاستنساخ. سيكون هذا الإجراء تكون قابلة للتطبيق لأية دراسة التي تتطلب جرعات عن طريق الفم دقيقة من مركب.
Protocol
Representative Results
Discussion
أهمية
هذه التقنية هو تحسين ويوفر مزايا عديدة أكثر من الأساليب المذكورة سابقا لgavaging الزرد الكبار. أولا، استخدام اسفنجة لكبح الأسماك يسمح شخص واحد لتنفيذ الإجراء، بدلا من تقنية هو موضح سابقا تتطلب شخصين. 7 الثانية، القسطرة أنا…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
قدمت جامعة المقارن مركز روكفلر العلوم البيولوجية الدعم لهذا المشروع. نشكر Monnas جانيل للحصول على المساعدة الفنية.
Materials
| Equipment | |||
| A sponge | |||
| 1-cc luer lock syringe | Becton Dickinson & Co | ||
| 22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 22-G needle (cut, if needed) | Becton Dickinson & Co | ||
| pH meter | Hanna probe | ||
| 1 scalpel blade | |||
| [header] | |||
| Reagent/Material | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |
Referências
- Royes, J. -. A. B., Chapman, F. . Preparing Your Own Fish Feeds. , (2009).
- Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg. Aquaculture. 196, 1-12 (1906).
- Langdon, C. Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae. Aquaculture. 227, 259-275 (2003).
- Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia. Aquaculture. 284, 151-158 (2008).
- Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish. Zebrafish. 8, 203-210 (2011).
- Goldsmith, J. R., Jobin, C. Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology. Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).
- Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection. Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).
- Marie, B., Huet, H., et al. Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes). Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).
- Canadian Council on Animal Care. . CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing. , (2005).
- Harper, C., Lawrence, C. . The Laboratory Zebrafish. , (2011).
- De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. Guidelines for the Care and Use of Fish in Research. ILAR Journal. 37 (4), (1995).
- Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia. Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).
- Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish. Neurogastroenterology & Motility. 21, 304-312 (2009).
