성인 Zebrafish의를 Gavaging
Summary
동물 모델로 제브라 피쉬의 사용 증가 화합물 및 솔루션의 알려진 양의 전달을위한 효과적인 방법의 개발이 필요합니다. 아래에 설명 된 위관 절차는 성인 zebrafish의를 안전하고 효율적으로, 안정적으로 솔루션 정확한 양의 경구 제공 할 수 있습니다.
Abstract
제브라 피쉬는 생물 의학 연구에서 생체 내 모델에서 중요 해지고있다. 효과적인 방법이 개발 및 과학 연구를위한 솔루션 화합물 또는 대리인을 제공하기 위해 활용해야합니다. 성인 zebrafish의 구두로 화합물을 관리하기위한 현재의 방법은 물고기의 자발적 소비의 변화로 인해 부정확합니다. 위관 절차는 생물 의학 연구에 연구 제브라하는 병원체의 정확한 양을 제공하기 위해 개발되었다. 생후 6 개월 성인 제브라 피쉬는 150 ㎎ / L로 마취 MS-222을 버퍼링 컷 22-G 바늘 팁에 부착 된 유연한 카테터 주입 튜브를 사용하여 용액 5 μL와 gavaged. 튜브의 끝이 아가미 (약 1cm)을지나 연장까지 유연한 튜브는 제브라 피쉬의 구강으로 낮아졌다. 이 솔루션은 천천히 창자에 주입 하였다. 이 방법은 물고기가 평온 무사하게 회복과 함께, 시간의 88 % 효과가 있었다. 이한 사람이 한 시간 20-30 물고기를 투여 수있는 절차도 효율적입니다. 이 방법은 정확하게 성인 zebrafish에있는 전염성 질병 연구, 또는 다른 화합물의 연구에 에이전트를 관리하는 데 사용할 수 있습니다.
Introduction
제브라 피쉬에 구두 화합물을 관리하기위한 현재의 방법은 관리 화합물 공급 위에 상단 코팅, 젤라틴 다이어트 1로 혼합, 소금물 새우 2에 bioencapsulated, 지질 캡슐 다이어트 3, 왁스 스프레이 구슬 4에 글루텐 기반의 다이어트를 통해 혼합 (가) 있습니다. 5 제한 경구 투여의 방법들은 높은 침출 속도와 각 물고기에 의해 불완전하거나 예측할 수없는 복합 소비를 이용하실 수 있습니다. 전염성 질병 연구에, 물고기에 투여 감염 복용량 연구의 성공을위한 중요한 수 있습니다 알고 있기 때문에 이러한 변수는 문제가 있습니다. 또한, 전작 수조에 투여 특정 화합물은 연구 중에있을 수 있습니다 창자 효과가 발생하기 전에 아가미를 제브라 피쉬에 독성 병변을 일으킬 것으로 나타났습니다. 6
위관 알래스카와 제품의 정확한 수량을 관리하는 다른 실험실 동물 종에 사용되는 표준 방법입니다생물 의학 및 제약 연구에 연구를위한 nown 농도. 최근에 문헌에 기술 된 제브라 피쉬를 gavaging하는 방법이 있습니다. 설명 하나의 기술 솔루션의 5 μL를 전달하기 위해 2-20 μL 피펫에 부착 된 24 G 카테터 칼집을 사용하여 두 사람 방법입니다. 설명 7 방법은 첫 번째와 두 번째의 사망률 8.7 %의 속도와 39 %를했다 각각 재판, 사망의 대부분은 임신하는 여성에 기인 하였다. 두 번째 투여 기술은 5 medakas에 대한 솔루션의 μL (Oryzias의 latipes). 사망률 8 정보가 제공되지 않았으며 투여 설명되지 않았습니다 수행하는 정확한 과정을 관리하는 데 사용 무딘 팁 투여 주사기를 설명했다. 위로 물고기의 체중의 1 % 동물 관리 및 실험실 제브라 피쉬에 캐나다위원회에 따르면, 위관을 통해 관리 할 수 있습니다. 9,10 우리의 목표는 COM 정확한 양을 전달하는 반복, 안전하고 효율적인 방법을 개발하는 것이 었습니다파운드 구두 남녀 성인 제브라 피쉬에와 재생의 모든 단계합니다. 이 절차는 화합물의 정확한 경구 투여가 요구되는 모든 연구에 적용 할 수있다.
Protocol
Representative Results
Discussion
의미
이 기술은 개선 성인 제브라 피쉬를 gavaging에 대한 두 가지 이전에 설명한 기술에 비해 몇 가지 장점을 제공합니다. 첫째, 물고기를 억제하는 스폰지의 사용은 두 사람이 필요로 설명한 기술을 반대 한 사람이 절차를 수행 할 수 있습니다. 7 둘째, 카테터 주입 튜브 인해 차 외상을 최소화 할 수있는 IV 카테터보다 더 유연 유사 무딘 팁 주사기를 사용하여 천공한다. …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
록펠러 대학 비교 생명 과학 센터는이 프로젝트에 대한 지원을 제공했습니다. 우리는 기술 지원을 쟈넬 Monnas 감사합니다.
Materials
| Equipment | |||
| A sponge | |||
| 1-cc luer lock syringe | Becton Dickinson & Co | ||
| 22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 22-G needle (cut, if needed) | Becton Dickinson & Co | ||
| pH meter | Hanna probe | ||
| 1 scalpel blade | |||
| [header] | |||
| Reagent/Material | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |
Referências
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