Nós descrevemos um protocolo para a desestabilização do menisco medial modelo (DMM) em camundongos, uma ferramenta eficaz para a osteoartrite (OA) de pesquisa. Além disso, temos demonstrado que a deficiência de exagerar desenvolvimento OA progranulincan e progressão usando esse modelo, indicando que progranulin desempenha um papel protetor na patogênese da OA.
Desestabilização do menisco medial (DMM) modelo é uma importante ferramenta para estudar os papéis fisiopatológicos da artrite inúmeras moléculas associadas na patogênese da osteoartrite (OA) in vivo. No entanto, o pormenorizada, especialmente o protocolo visualizado para o estabelecimento deste modelo complicado em ratinhos, não está disponível. Aqui aproveitamos tipo selvagem e progranulin (PGRN) – / – ratos como exemplos para introduzir um protocolo para a indução do modelo DMM em camundongos, e comparou o início da OA após o estabelecimento deste modelo induzida cirurgicamente. As operações realizadas em ratos eram ou operação simulada, que acaba de abrir cápsula articular, ou operação DMM, que cortou o ligamento menisco-tibial e causou desestabilização do menisco medial. Osteoartrite gravidade foi avaliada utilizando o ensaio histológico (por exemplo, coloração de Safranina O), manifestações de genes OA-associados, a degradação de cartilagem moléculas de matriz extracelular, e forma de osteófitosção. Operação DMM induzida com sucesso a iniciação e progressão da OA em tanto o tipo selvagem e PGRN-/ – ratinhos, e a perda de factor de crescimento PGNR levou a um fenótipo OA mais grave neste modelo induzido cirurgicamente.
A osteoartrite (OA), também conhecida como artrite degenerativa, afeta 15% da população mundial e mais de 46 milhões de pessoas nos Estados Unidos, e é caracterizada por sinovite, degeneração da cartilagem e formação de osteófitos 1. Ele pode ser um resultado de uma interacção complexa de factores genéticos, metabólicos, bioquímicos e biomecânicos. Os mecanismos subjacentes da OA continuar a iludir a comunidade científica. Existem atualmente vários modelos animais que podem imitar a patogênese da OA 2,3. É importante estabelecer modelos animais em ratos por causa tanto da disponibilidade de vários ratinhos geneticamente modificados e a relação custo-eficácia da experimentação. Entre os diferentes tipos de modelos experimentais de OA, a desestabilização induzida cirurgicamente de menisco medial modelo (DMM) é um modelo bem aceite OA por causa da sua boa reprodutibilidade e uma progressão relativamente lenta durante o desenvolvimento de OA. Ambos os atributos têmsido importantes para a avaliação de progressão da OA em diferentes tratamentos ou transgenes 3-8. No entanto, a consistência do modelo OA cirúrgica é afetada por vários fatores durante a cirurgia e, como resultado, a aplicação do modelo cirúrgico do mouse é limitado.
Progranulin (PGRN) é um factor de crescimento multi-funcional expressa em várias células. Sabe-se que PGRN desempenha um papel crucial em diversos processos fisiológicos e patológicos tais como cicatrização de feridas 9, 10 tumorigénese, e inflamação 11-15. Estudos também mostraram que a insuficiência de PGRN pode causar doenças degenerativas do sistema nervoso, em seres humanos e ratinhos 16-18. Sabe-se que PGRN é expresso na cartilagem articular humana, e o seu nível é significativamente elevado na cartilagem dos pacientes com OA e de artrite reumatóide 19. Além disso, PGRN também desempenha um papel fundamental na proliferação de condrócitos 20, diferenciação e endocondralossificação da placa de crescimento durante o desenvolvimento 21,22. Recentemente, informamos que PGRN TNF-α antagonizou através da ligação a receptores de TNF e exibiu uma função anti-inflamatória em modelos de artrite inflamatória 13,14,23,24. No entanto, o papel de PGRN na OA, especialmente in vivo, continua a ser um enigma. Aqui, apresentamos o procedimento para induzir um modelo DMM cirúrgico, e investigar o papel do PGRN no desenvolvimento OA através do estabelecimento de modelo DMM no WT e PGRN-/ – ratos.
É relatado que a linhagem de ratos é muito importante para a indução do modelo DMM, com diferentes linhagens de camundongos têm diferentes gravidade da OA após DMM, com alto nível na cepa 129/SvEv, seguido por C57BL6, 129/SvInJ e FVB / n 26. Uma grande parte dos transgenes são estabelecidos em ratos C57BL6, como PGRN-/ – ratos foram utilizados no presente estudo, que são relativamente suscetíveis a DMM. No entanto, se o transgene é baseado na estirpe insensível como FVB / n murganhos, é necessár…
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi financiado em parte pelo NIH bolsas de investigação R01AR062207, R01AR061484, R56AI100901, K01AR053210, e uma doença Targeted Research Grant da Fundação de Pesquisa de Reumatologia (para CJ Liu).
No. 10 Surgical blades | FEATHER | 25-2976#10 | |
6-0 suture | APPLIED DENTAL | WG-N53133 |