非侵襲Mモード心エコー検査によるマウスでの心拍数の子宮内測定で
Summary
超高周波超音波小動物における心臓の異常を調べるための強力なライブイメージングツールです。その非侵襲性は、胚の生理的な状態を維持することができます。ここで、我々は子宮内で E18.5で胚の心拍数を測定するためのM-モード超音波を使用することを示している。
Abstract
先天性心疾患（CHD）出生時の死亡の最も頻度の高い非感染性の原因である。 CHDの発生率は、4〜50/1、000出生（病気やケガ、地域の推定、世界保健機関、2004）の範囲である。多くの場合、生活の質を損なう手術は、CHDの原因を見つけることの大切さを思い出させ、心臓欠陥を修正するために必要な。変異マウスモデルとライブイメージング技術は、この疾患の病因を研究するために不可欠なツールとなっている。高度な方法は、胚における異常な心のライブイメージングを可能にするが、後者の生理学的および血行動態状態は、しばしば外科的および/または時間のかかる手順を侵害された。非侵襲超音波イメージングは、しかし、それによってそれらの生理機能を維持し、外科的に胚を曝露することなく使用することができる。ここで、我々は子宮内で E18.5で胚の心拍数を評価するために、単純なM-モード超音波を使用しています。異常な心拍数の検出は、確かに良いインディカですこのため、心臓の機能障害のTORとは、心不全につながる可能性発達障害の識別の最初のステップとなる。
Introduction
CHDは、出生1での死亡の最も一般的な非感染性の原因である。複数の手術は、しばしば、生活の質を損なわ1残ること被験者における構造的欠陥を修正するために必要とされる。 CHDを持つ子どもは、頻繁に開発2,3上の子宮への影響の重要なことを示す、彼らが手術を受けていない場合でも、神経疾患を開発しています。妊娠、原因CHD中のウイルスや化学物質への曝露（アルコール）などの遺伝的要因と環境要因の両方。遺伝的貢献を研究することは、その初期段階ではまだですが、急速に成長。これらの貢献者を特定し、シンプルかつ強力なツールと変異マウスの表現型を、心臓発生における役割を理解するために非常に有益である。
マウスは確かにCHDを研究するための任意の動物モデルであり、ヒト症例のほとんどは4,5マウスで再生することができる。その結果、マウス胎児の心臓表現型は、株式会社となっているreasingly重要なヒトCHDの病因を調査し、適切なツールが必要です。固定した標本上の組織学的研究は非常に貴重ですが、生きている動物のリアルタイムイメージングは、心臓の生理機能を理解することが重要です。ビデオ顕微鏡、ライブイメージングを提供しています。しかしながら、それによりそれらの生理学的および血行動態の状態を損なうこと、胚を露出させるために開腹を必要とする。最近では、心エコー検査は、診療所だけでなく、マウスでの心臓評価のための標準的なイメージング技術となっている。
マウス胎児心エコー検査は、標準的な臨床超音波システム、ならびに超高周波超音波システムを用いて行われる。後者は、二次元画像を生成し、初期胚の段階の評価を可能にする30 MHz以上の周波数変換器を提供する。これらのトランスデューサは、しかし、適切な撮像面を取得し、基本的な心臓年率を判断するのに十分であるが、比較的貧弱な侵入深さ（-13 mm）を有する例えば、心拍数、拡張期と収縮期と隔壁と壁の厚さで左及び右心室内径、開腹術を行うことなくとしてrameters。
我々の研究では、胎生E18.5でのマウス胚の心拍数を評価するために、超高周波数超音波システムを使用している。私たちは、12.7ミリメートルの焦点距離と、胎児の大き与えられた理想的なX 20ミリメートル、20ミリメートルのフィールドビューを提供30 MHzのトランスデューサを選択しました。しかしながら、より高い周波数変換器は、以前の発達段階を分析するために選択することができる。選択されたM-modeは千フレーム/秒の高時間分解能への運動のおかげで組織の可視化を可能にする。フル手順は簡単で、胎児の生理学的および血行動態状態のいずれかの摂動を避けるために、可能な限り迅速に行うべきである。約8胚の解析は、約1時間を必要とします。
Protocol
Representative Results
Discussion
Mモード心エコー検査は、マウス胚の子宮内の心拍数で測定するための効果的かつ簡単な方法です。市販のトランスデューサは、小さな鼓動の心を視覚化するのに十分な解像度を提供します。従って、それらは、パルス測定等の他の方法と比較して、精度の高い心拍数測定を可能にし、高解像度のビデオ顕微鏡法を代用することができる。しかし、現在のツールでは、胚のそれ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々は図1と図2に示した写真を撮るための心エコー検査での訓練のためのマノンLapriseとアンシャンベランに感謝します。この作品は、健康の研究助成金からMOP 44363とカナダの椅子950から216684のカナダの協会によってサポートされていました。
Materials
| Isoflurane | Pharmaceutical Partners of Canada Inc. | CP0406v2 | 1-chloro-2,2,2-trifluoroethyl difluoromethyl ether |
| Ultrasound gel | Parker Laboratories Inc. | Aquasonic Clear | |
| Electrode gel | Parker Laboratories Inc. | Spectra 360 | |
| Ophthalmic gel | Novartis | Tear-Gel | |
| Depilatory cream | Church & Dwight Co., Inc. | Nair | |
| Hair clipper | |||
| Gauze/cotton swap | Q-tips | ||
| Permanent marker | |||
| High-Resolution In vivo Ultrasound Imaging System | Visual Sonics | Vevo770 | |
| 30 MHz Transducer | Visual Sonics | RMV707B | |
| Imaging platform and physiology controller unit | Visual Sonics | ||
| Anesthetic System | Cyprane North America Inc. | 312462 | |
| Infrared heating lamp |
Referências
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